徐健勇
- 作品数:37 被引量:42H指数:4
- 供职机构:中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金:天津市科技计划中国科学院重点部署项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学农业科学化学工程更多>>
- 一种密码子优化的脂肪酶基因、工程菌及其纺织应用
- 本发明公开了一种密码子优化的脂肪酶基因、工程菌及其纺织应用。对来源于Aspergillus fischeri NRRL 181的脂肪酶基因(NCBI accession No.XM_001261900.1)针对毕赤酵母宿...
- 郑宏臣宋诙谭明马红丽付晓平徐健勇
- 文献传递
- 一株枯草芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用
- 本发明公开了一株枯草芽孢杆菌及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用。枯草芽孢杆菌具体为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)816,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.1485...
- 付晓平郑宏臣宋诙杨世彬赵兴亚甄杰徐健勇
- 文献传递
- 耐热普鲁兰酶CBM68结构域中关键位点对其酶学性质的影响被引量:2
- 2016年
- 通过对Anoxybacillus sp.LM18-11来源的耐热普鲁兰酶(Pul A)与麦芽三糖共结晶的晶体结构分析,在新命名的底物结合域CBM68中预测出4个与底物结合有关的氨基酸位点(Y14、D16、K62和R96),分别将4个氨基酸位点突变为丙氨酸,得到突变体Pul A^(Y14A)、Pul A^(D16A)、Pul A^(K62A)和Pul A^(R96A)。其中,突变酶Pul A^(Y14A)和Pul A^(R96A)的底物结合力及催化效率与野生酶Pul A相比均有明显降低,其K_m值分别比Pul A提高了4.2倍和2.5倍,k_(cat)/K_m分别为Pul A的29%和37%。同时,Pul A^(Y14A)和Pul A^(R96A)的最适作用温度均降低了10℃,Pul A^(R96A)的最适作用p H也降低了0.5个单位。说明Y14和R96是CBM68结构域中的关键氨基酸位点,这两个位点的发现为进一步探究CBM68结构域的作用机制奠定了基础。
- 申莹莹郑宏臣李树芳付晓平徐健勇宋诙
- 关键词:定点突变
- 一株高产尿苷二磷酸的产氨短杆菌诱变菌株及其应用
- 本发明公开了一株高产尿苷二磷酸的产氨短杆菌诱变菌株及其应用。本发明的产氨短杆菌诱变菌株名称为ZW‑81,已于2020年1月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.19321。通过...
- 郑雯付晓平宋诙谭明甄杰徐健勇
- 文献传递
- 一个新型耐热普鲁兰酶结构与功能的研究
- 普鲁兰酶(Pullulanase,EC 3.2.1.41)是一种专一性水解支链淀粉分支点的α-1,6-糖苷键的葡萄糖苷水解酶,可特异性地将支链淀粉水解形成长度不同直链淀粉.在淀粉加工工业中,普鲁兰酶与糖化酶的联合应用可有...
- 徐健勇甄杰宋诙
- 一种提高织物毛效的生物复合物及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种提高织物毛效的生物复合物及其应用。本发明的生物复合物包含自行筛选得到的枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SH10、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SH12。这些芽胞杆菌发...
- 宋诙付晓平郑雯王梦超郑宏臣徐健勇
- 文献传递
- 植物乳杆菌发酵产高活性抗菌肽的方法
- 本发明公开了一种植物乳杆菌CGMCC5297发酵产高活性抗菌肽的发酵条件,优化发酵培养基配方为葡萄糖10‑60g/L,胰酪胨8‑12g/L,酵母粉3‑7.5g/L,发酵罐优化发酵条件为通气比4.7‑6.4vvm,转速10...
- 宋诙郑雯徐健勇谭明郑宏臣
- 费希尔曲霉脂肪酶在毕赤酵母中的优化表达及高密度发酵被引量:4
- 2020年
- 【背景】脂肪酶广泛应用于纺织、食品、药品、皮革等工业领域,其在微生物中的异源表达研究进一步促进了脂肪酶产品的生产和应用。【目的】实现来源于费希尔曲霉的脂肪酶在毕赤酵母中的高效异源表达,探究其合适的表达及发酵条件,提高产量,降低成本。【方法】对费希尔曲霉的脂肪酶编码基因进行密码子优化后,应用pPIC9k质粒整合到毕赤酵母GS115基因组上,构建高产脂肪酶Lip605的毕赤酵母工程菌;并通过响应面发酵条件优化、筛选最适伴侣蛋白和高密度发酵相结合的方法,综合提高脂肪酶表达量。【结果】确定高产脂肪酶毕赤酵母工程菌的最优摇瓶发酵产酶条件为:甲醇3.103%(体积比),生物素0.4 mg/L,酵母粉11.5 g/L,酵母基础氮源培养基(yeast nitrogen base,YNB)13.4 g/L,初始pH 6.4,装液量50 mL/250 mL,转速220 r/min,温度24°C,培养时间40 h。优化后的胞外脂肪酶酶活达到72.34 U/mL,较优化前提高了5.8倍;进一步选择12个伴侣蛋白分别与脂肪酶Lip605进行共表达,其中共表达伴侣蛋白Rpl10(pPICZA-RPL10)效果最佳,可使Lip605表达量进一步提高46.8%;在此基础上,经过10 L发酵罐分批补料的高密度发酵,工程菌株发酵142 h,胞外脂肪酶酶活最高达到680 U/mL,蛋白浓度为15.89 g/L。【结论】应用复合策略有效提高了脂肪酶Lip605在毕赤酵母中的发酵产量,为其进一步工业化生产奠定了良好的基础。
- 马红丽付晓平郑雯徐健勇郑宏臣宋诙
- 关键词:毕赤酵母共表达高密度发酵
- 一种提高织物毛效的生物复合物及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种提高织物毛效的生物复合物及其应用。本发明的生物复合物包含自行筛选得到的枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SH10、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SH12。这些芽胞杆菌发...
- 宋诙付晓平郑雯王梦超郑宏臣徐健勇
- 一种利用出芽短梗霉生产中分子量普鲁兰多糖的方法
- 本发明对保藏编号为CGMCC NO.23807的出芽短梗霉敲除或弱化代谢通路中的聚苹果酸合成酶基因得到的重组菌,并用于发酵生产中分子量的普鲁兰多糖的方法。本发明通过敲除代谢通路中的聚苹果酸合成酶基因,成功将该菌株生产的普...
- 柏文琴马延和宋诙陈淑宇高佳琪付晓平陈利梅谭明郑宏臣徐健勇