胡自立
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技部农业科技成果转化资金广东省科技计划工业攻关项目国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一株H9N2亚型禽流感病毒分离株的生物学特性研究及其全基因组序列分析被引量：6
- 2012年
- 本试验对1株2010年从广东省分离的H9N2亚型禽流感病毒A/chicken/Guangdong/QY/2010(H9N2)的生物学特性进行研究并对其全基因组序列进行分析。结果显示,该毒株的鸡胚半数感染量EID50为10-9/0.1mL,鸡胚最小致死量的平均死亡时间MDT为104h,脑内致病指数ICPI值为0.51,静脉致病指数IVPI为0。用RT-PCR方法扩增病毒的基因组各片段,将扩增片段进行克隆、测序并进行序列分析。结果显示,该毒株的HA基因与Ck/HK/G9/97和Dk/HK/Y280/97在同一分支上,HA的裂解位点为PARSSR↓GLF,有8个潜在糖基化位点,226位氨基酸残基为L,较保守的202位受体结合位点由L突变为P,该毒株的HA和NA核苷酸序列与Dk/HK/Y280/97同源性较高,NS、PA、PB1的核苷酸序列均与Ck/SH/F/98同源性较高,NP基因与A/VN/1203/04(H5N1)的核苷酸序列同源性为95.3%。
- 刘海玲胡自立罗开健
- 关键词：H9N2亚型生物学特性全基因
- 3种方法纯化兔抗H9N2亚型禽流感病毒血清的比较被引量：2
- 2011年
- 本试验分别用蛋白G亲和层析法、饱和硫酸铵法和辛酸-硫酸铵法纯化兔抗H9N2亚型禽流感病毒血清,发现蛋白G亲和层析法纯化得到的抗体纯度最高,回收率较低,抗体活性未变,操作简便,但成本较高,适合实验室研究及小量样品的纯化;饱和硫酸铵法纯化得到的抗体纯度较蛋白G亲和层析法低一些,抗体活性不变,可通过多次盐析来提高抗体纯度,多作为蛋白G亲和层析法纯化前的初步纯化;辛酸-硫酸铵法纯化得到的抗体纯度不及前两种方法,回收率较高,抗体活性亦无改变,纯化时对pH的精确性和辛酸的浓度要求较高,多用于样品的粗提和单抗的纯化。
- 李芳王泽雄亓文宝刘海玲胡自立罗开健
- 关键词：纯化方法H9N2亚型禽流感病毒血清
- H5N1亚型高致病性禽流感病毒对鸽的致病性分析被引量：4
- 2011年
- 为评估H5N1亚型禽流感病毒对鸽的致病性,用我国2004年分离的一株H5N1亚型禽流感病毒A/pigeon/GD/C2/2004(H5N1)人工感染4周龄鸽,进行了致病性试验。结果表明,该株病毒以106EID50/100μL剂量感染能致死鸽,致死率为22.2%,病毒能在感染鸽体内广泛分布,其中肺脏和肾脏中病毒含量达到104.50EID50/mL,表明该株病毒对鸽具有感染性,且感染鸽未通过喉头和泄殖腔向外排毒。
- 乔立旺焦培荣张东霞李芳胡自立刘海玲辛朝安廖明罗开健
- 关键词：禽流感病毒H5N1
- 鹅细小病毒SS/10株VP3蛋白的原核表达及鉴定被引量：3
- 2012年
- 根据GenBank收录的鹅细小病毒(GPV)基因序列,设计并合成了一对VP3基因扩增引物。采用PCR技术对SS/10株的VP3基因进行扩增,将目的基因和原核表达载体PET-32a分别经HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接,获得重组质粒PET-32a-VP3,并将其转化表达菌BL21(DE3)pLysS。经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了72ku左右的融合蛋白,大部分以包涵体的形式存在于菌体中。Wesern blot结果表明,该蛋白能与GPV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。
- 胡自立刘海玲张光明张凯高瑞娟罗开健
- 关键词：鹅细小病毒VP3基因原核表达
- 鹅细小病毒SS/10株的分离鉴定及生物学特性研究被引量：2
- 2012年
- 2010年从佛山市某专业户送检的雏鹅肝组织中分离到1株鹅细小病毒(命名为SS/10株),并对其生物学特性进行了研究。该毒株的番鸭胚半数致死量为10-4.6/0.3 mL,动物回归试验显示其对10日龄雏鹅没有致死性,从组织切片观察肠、肝脏、肾脏和脑组织均有明显的病理变化。对该毒株测序分析结果发现,其VP1、VP2和VP3基因与GenBank收录的番鸭分离株DY株的同源性较其他参考毒株(鹅分离株)的同源性低,NS1和NS2基因的同源性没有这种差异;其VP3基因与82-0321V,VG32/1和标准株B株在同一分支上,与82-0321V亲缘关系最近,与番鸭细小病毒GD株亲缘关系最远;其VP3基因与B株相比少了505-507位的糖基化位点NRT。
- 胡自立刘海玲黄武饶雷罗开健
- 关键词：鹅细小病毒组织切片生物学特性
