李芳
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项广东省科技计划工业攻关项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 莱航鸡rRNA基因的克隆及大容量多位点打靶载体的构建
- 李芳
- 一株H9N2亚型禽流感病毒全基因组分析被引量：1
- 2012年
- 为了研究H9N2亚型AIV A/Chicken/Guangdong/333/2008的全基因组序列变异情况,试验利用RT-PCR方法扩增出该病毒的8个基因序列,并应用DNAStar和MEGA4.0软件分析所得基因序列。结果表明:该病毒HA基因的第226位氨基酸由Q(Gln)变为了L(Leu),其NP基因与Viet Nam/1203/2004(H5N1)的NP基因同源率最高。说明该病毒已具备了感染哺乳动物的分子特征,并可能在遗传演化过程中突变为高致病性的禽流感病毒(AIV)。
- 胡玥谭淑娴和君李小康李芳焦培荣亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型基因组系统发生分析
- H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法的建立被引量：6
- 2015年
- 【目的】H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,该亚型病毒为H7N9亚型和H10N8亚型流感病毒提供了6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS),并且一直处于动态重组过程中。因此,建立针对H9亚型禽流感的型特异性电化学发光免疫的高通量快速检测方法,加强H9亚型流感的监测,具有重要意义。【方法】用钌联吡啶标记H9亚型AIV的单克隆抗体,用MPI-E型电致化学发光分析系统评价钌标单抗标记效率;用生物素标记H9亚型AIV的多克隆抗体,HABA法检测抗体生物素化的效率;待测抗原与钌标单抗作用1 h后,将此抗原-抗体复合物与通过生物素-链霉亲和素系统固定在磁微球表面的多克隆抗体反应,最后加入反应底物三丙胺后即可在电化学分析系统进行发光检测。优化生物素化多抗和钌标单抗最佳工作浓度,确定临界值和反应谱,对所建立的方法进行敏感性、特异性和重复性试验。攻毒后3 d和5 d,采集攻毒组和空白对照组鸡只的88份咽拭子和肛拭子,分别用电化学发光免疫检测方法和鸡胚病毒分离法进行检测和比较。【结果】钌标抗H9亚型AIV单克隆抗体的标记效率为每个单抗Ig G分子上结合21个Ru2+,且间接免疫荧光方法证明其仍具有生物活性;生物素化兔抗H9N2亚型AIV多克隆抗体的标记效率为每个Ig G分子上结合了6个生物素分子,且Western blotting试验证明其仍保持生物活性;该方法的检测临界值为28.3,可疑区间为23.4—33.2;阴性和阳性变异系数均小于10%;检测限为5×104EID50,能够特异性地检测H9亚型AIV,不与其他亚型流感病毒(H1、H3、H4、H5和H6亚型)和其他类型的禽源病毒(NDV、IBV和IBDV)反应。3 h内即可完成检测,与鸡胚病毒分离法的符合率为86.4%。【结论】所建立的H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法可以用于临床样品检测,对H9亚型禽流感的监测和防控具有重要意义。
- 亓文宝李芳李华楠黄丽红和君穆光慧罗开健廖明
- 关键词：H9亚型禽流感
- 1株多重耐药的金黄色葡萄球菌的分离与鉴定
- 2011年
- 2009年4月,广东省一养殖场的肉鸡发生一起病例,临床症状表现为腹泻,胸腹部、翅内侧等处羽毛脱落,皮肤紫红色或破溃,皮下浸润出血。通过临床症状、病理变化观察和实验室诊断,确诊为金黄色葡萄球菌感染。对该分离菌株做药敏试验,发现其耐药性强。动物试验表明,该分离菌对雏鸡具有高度致病性。
- 李静怡贾小雅魏晓莉方热军李芳张建民郭莉莉陈济铛徐成刚
- 关键词：金黄色葡萄球菌病耐药性
- H5N1亚型高致病性禽流感病毒对鸽的致病性分析被引量：4
- 2011年
- 为评估H5N1亚型禽流感病毒对鸽的致病性,用我国2004年分离的一株H5N1亚型禽流感病毒A/pigeon/GD/C2/2004(H5N1)人工感染4周龄鸽,进行了致病性试验。结果表明,该株病毒以106EID50/100μL剂量感染能致死鸽,致死率为22.2%,病毒能在感染鸽体内广泛分布,其中肺脏和肾脏中病毒含量达到104.50EID50/mL,表明该株病毒对鸽具有感染性,且感染鸽未通过喉头和泄殖腔向外排毒。
- 乔立旺焦培荣张东霞李芳胡自立刘海玲辛朝安廖明罗开健
- 关键词：禽流感病毒H5N1
- 3种方法纯化兔抗H9N2亚型禽流感病毒血清的比较被引量：2
- 2011年
- 本试验分别用蛋白G亲和层析法、饱和硫酸铵法和辛酸-硫酸铵法纯化兔抗H9N2亚型禽流感病毒血清,发现蛋白G亲和层析法纯化得到的抗体纯度最高,回收率较低,抗体活性未变,操作简便,但成本较高,适合实验室研究及小量样品的纯化;饱和硫酸铵法纯化得到的抗体纯度较蛋白G亲和层析法低一些,抗体活性不变,可通过多次盐析来提高抗体纯度,多作为蛋白G亲和层析法纯化前的初步纯化;辛酸-硫酸铵法纯化得到的抗体纯度不及前两种方法,回收率较高,抗体活性亦无改变,纯化时对pH的精确性和辛酸的浓度要求较高,多用于样品的粗提和单抗的纯化。
- 李芳王泽雄亓文宝刘海玲胡自立罗开健
- 关键词：纯化方法H9N2亚型禽流感病毒血清
- 基于H9亚型AIV单克隆抗体的ELISA和电化学发光免疫检测方法的建立
- 禽流感是由禽流感病毒感染家禽后引起的各种综合征,对家禽业和人类公共卫生都有巨大威胁。近年来,H9N2亚型禽流感病毒在我国多个省区均时有流行,在临床上引起鸡群的呼吸道症状、产蛋下降、不同程度的发病率和致死率,对我国养禽业造...
- 李芳
- 关键词：H9亚型禽流感病毒单克隆抗体ELISA法检测电化学发光免疫法
- 一株天鹅源H5N1亚型禽流感病毒的分离鉴定被引量：2
- 2010年
- 2004年从广东某地送检的病死天鹅肺组织中分离到1株禽流感病毒,用血凝抑制试验(HI)、聚合酶链反应(PCR)、基因测序等对其进行了亚型鉴定。结果表明,此分离株具有血凝活性,且H5亚型禽流感病毒标准阳性血清能对其产生特异性抑制作用;分别用针对禽流感病毒M基因、H5亚型禽流感病毒HA基因、N1亚型禽流感病毒NA基因特异性引物对该分离株进行PCR扩增,均获得特异性目的片段;测序及BLAST分析表明HA基因与A/chicken/Viet Nam/Ncvd8/2003(H5N1)的HA基因同源性为98%;NA基因与A/swine/Fujian/1/2003(H5N1)的NA基因同源性为98%,由此该分离株鉴定为H5N1亚型禽流感病毒,按照国际流感病毒系统命名原则将该病毒株暂命名为A/Swan/Guangdong/197/2004。
- 郑煦灿焦培荣单芬韦艳梅乔立旺李芳韦良孟辛朝安任涛廖明罗开健
- 关键词：禽流感H5N1亚型天鹅
- 鸽葡萄球菌病的诊治
- 2011年
- 1基本情况
广东地区某鸽场存栏种鸽约2万对,发病死亡的主要是18～25日龄的乳鸽,发病初始,病鸽精神沉郁,缩颈低头,采食减少,每天死亡数只,发病10后,每天死亡乳鸽达百余只。剖检可见肝脾肿大,肌胃、腺胃出血,心包积液,肠道充血、出血,肾脏肿大场主曾怀疑是感染了鸽瘟,
- 李芳乔立旺罗开健
- 关键词：葡萄球菌病种鸽发病死亡诊治死亡数脾肿大
