薛欣 作品数:8 被引量:16 H指数:3 供职机构: 西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 西安市科技创新支撑计划基金 陕西省科学技术研究发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
HIV患者合并感染基因1和4型丙型肝炎病毒治疗效果的Meta分析 被引量:3 2009年 目的:探讨HIV患者共感染难治性丙型肝炎病毒(HCV,基因1型和4型)后的临床药物处理对策。方法:收集国内外2000年至今报道的干扰素或聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗HCV/HIV共感染患者的随机临床对照试验结果,提取其中共感染基因1型或4型HCV的HIV患者资料。利用Meta分析方法探讨HIV患者罹患丙型肝炎后,尤其是感染基因1型或4型HCV后的治疗方案。结果:Medline文献检索结果命中88篇文献,其中6篇符合纳入标准,共提取感染基因1型或4型HCV的HIV患者资料1 131份。数据分析结果显示,聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗基因1型或4型HCV的HIV患者所获得的持续病毒反应率是26%,高于干扰素联合利巴韦林治疗的反应率(8%)。聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗也优于聚乙二醇干扰素单独疗法(26%vs 13%)。而聚乙二醇干扰素联合利巴韦林疗法在基因2型或3型HCV感染的HIV患者可获得55%的持续病毒反应率。干扰素或聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗HCV/HIV共感染患者的副反应发生率和停药率相似。结论:聚乙二醇干扰素联合利巴韦林在治疗基因1型或4型HCV的HIV患者时优于干扰素联合利巴韦林或聚乙二醇干扰素单独疗法。 赵四海 刘恩岐 成大欣 薛欣 楚雍烈关键词:肝炎病毒 结核分枝杆菌异烟肼耐药基因katG的检测 被引量:2 2010年 目的探讨结核分枝杆菌异烟肼(INH)耐药的分子机制,建立快速检测结核分枝杆菌INH耐药性的方法。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测105株结核分枝杆菌临床分离株的katG基因,运用DNA测序和生物信息分析比对进行验证。结果以H37Rv标准株为对照,34株敏感株中5株(14.7%)存在KatG基因异常,105株耐药株中55株(52.4%)存在KatG基因异常。结论结核分枝杆菌对INH耐药与KatG基因突变有关,PCR-RFLP技术可快速、准确地检测结核分枝杆菌对INH的耐药性。 薛欣 邱奕 楚雍烈 赵四海 邵明明 曹春霞关键词:基因突变 限制性片段长度多态性 细胞角蛋白8真核表达载体的构建、表达及生物信息学分析 2011年 目的:构建人细胞角蛋白8(CK8)全长CDS序列真核表达载体,并转染人肝癌细胞SMMC7721,为研究CK8的生物学功能提供细胞模型。方法:RT-PCR扩增CK8全长CDS,克隆入pMD18-Tsimplevector质粒,鉴定正确后,亚克隆入质粒pEGFP-C1,构建真核表达载体pEGFP-CK8。脂质体介导转染SMMC7721细胞,荧光显微镜、realtimePCR和Westernblot检测CK8的表达。生物信息学软件分析CK8理化特性、信号肽及功能位点等。结果:PCR、酶切和测序结果均证实重组质粒含有人CK8全长CDS序列,转染实验表明CK8在SMMC7721细胞中发生了高表达。结论:成功地构建了人CK8全长CDS真核表达载体,并使其在SMMC7721细胞中获得高表达,为研究CK8的生物学功能奠定了实验基础。 寻萌 赵四海 曹春霞 薛欣 邵明明 李薇 徐琨 楚雍烈关键词:真核表达 生物信息学分析 结核分枝杆菌链霉素耐药基因rpsL的检测 被引量:3 2008年 目的探讨结核分枝杆菌(TB)对链霉素(Sm)耐药的分子机制,建立快速检测结核分枝杆菌Sm耐药性的方法。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测80株结核分枝杆菌临床分离株的rpsL基因。结果以H37Rv标准株为对照,21株敏感株中,1株(4.76%) SSCP和RFLP分析存在rpsL基因异常;59株耐药株中,36株(61.02%)SSCP和RFLP分析存在rpsL基因异常。结论结核分枝杆菌对Sm耐药与rpsL基因突变有关,PCR-SSCP和PCR-RFLP技术可快速、准确地检测结核分枝杆菌对Sm的耐药性。 邵明明 薛欣 楚雍烈 寻萌 宋娟 曹春霞 邱奕关键词:耐药 多态性 单链构象 限制性片段长度 HCV全基因组培养细胞的比较蛋白组学研究 被引量:3 2008年 利用比较蛋白质组技术研究了转染丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)全基因组的人肝癌细胞系Huh7细胞模型中蛋白质表达谱的变化,建立了Huh7-HCV的双向凝胶电泳蛋白质表达图谱和数据库.通过双向凝胶电泳分离和图像分析,对表达差异2倍以上蛋白质点进行了胶内酶解和MALDI-TOF MS鉴定.得到包括与细胞骨架蛋白、细胞周期、凋亡和信号转导等相关的14个蛋白质,并且用Western blot验证了热休克蛋白70的蛋白质组研究结果.利用HCV全基因组培养系统,采用蛋白质组学技术,为研究HCV病毒和宿主细胞相互作用提供了新的实验数据,为深入研究HCV病毒复制和分子致病机理奠定了基础. 赵四海 寻萌 楚雍烈 朱彤 薛欣 徐琨 宋娟 邵明明关键词:培养细胞 丙型肝炎病毒 蛋白质组学 丙型肝炎病毒研究模型的现状与未来 被引量:2 2007年 在过去较长时间内,由于缺少合适的丙型肝炎病毒研究模型,对丙肝病毒感染机制、生活周期和致病机制的研究进展较为缓慢。对丙肝病毒的认识不足严重阻碍了相关预防性疫苗和治疗药物的研制。近年建立的丙肝病毒全基因体外培养系统是一项重大突破,这将促进人们对丙肝病毒的全面认识和丙型肝炎防治药物的开发。 赵四海 楚雍烈 寻萌 薛欣关键词:病毒培养 肝炎病毒 病毒复制 丙型肝炎病毒 结核杆菌利福平耐药与rpoB基因突变的相关性研究 被引量:2 2009年 目的:分析西安地区耐利福平(RIF)结核杆菌临床分离株rpoB基因突变的特点,探讨快速检测结核杆菌耐RIF基因型的方法.方法:对120株西安地区收集的结核杆菌临床分离株(药敏结果为耐RIF81株,对RIF敏感39株),分别采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和等位基因特异性多重聚合酶链反应(MAS-PCR)检测rpoB基因突变情况.结果:PCR-SSCP检测,耐RIF菌株中rpoB基因突变发生率为85%(69/81),39株敏感株中仅有1株发生突变,突变率为2%(1/39).MAS-PCR检测,耐RIF菌株中rpoB基因突变发生率为93%(75/81),39株敏感株中未发现rpoB基因突变;531,516和526位点突变的比例分别为45%(34/75),24%(18/75)和20%(15/75).结论:西安地区结核杆菌临床分离株耐RIF与rpoB基因突变相关,MAS-PCR检测rpoB基因可作为临床耐RIF结核杆菌的简单快速准确的早期诊断方法. 卢阳 薛欣 楚雍烈关键词:结核杆菌 RPOB基因 利福平 宫颈癌相关新癌基因hWAPL的原核表达和免疫原性分析 被引量:1 2007年 目的:构建hWAPL原核表达载体,诱导hWAPL蛋白表达并制备其多克隆抗体。方法:RT-PCR技术扩增hWAPL cDNA片段,连接到pMD18-T载体,测序正确后亚克隆入原核表达载体pET28a并转化BL21菌株,用SDS-PAGE电泳鉴定重组菌的诱导表达情况,制备hWAPL蛋白并免疫BALB/c小鼠,ELISA法测定其抗体效价,Western blot鉴定表达hWAPL蛋白的免疫原性。结果:①经PCR、双酶切鉴定和测序,证实hWAPL正确插入pMD18-T载体,序列正确。②经IPTG诱导的pET28a-hWAPL重组菌表达出相对分子质量(Mr)约为25000的蛋白,与预期蛋白Mr相符。③免疫小鼠后测得的平均抗体效价为1∶3200。④Western blot结果显示Mr约25000处有反应蛋白条带。结论:pET28a载体能够表达hWAPL蛋白,表达蛋白具有良好的免疫原性,其免疫小鼠后获得的多克隆抗体具有高效价和特异性。 曹春霞 马军 寻萌 薛欣 陈萍 楚雍烈关键词:原核表达 多克隆抗体 宫颈癌