黄坚
- 作品数：16 被引量：52H指数：5
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 成都地区宠物犬感染犬瘟热病毒和犬呼吸道冠状病毒的分子流行病学调查被引量：8
- 2018年
- 为了解成都地区宠物犬犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬呼吸道冠状病毒(canine respiratory coronavirus,CRCoV)的感染情况,本试验应用RT-PCR对采自成都地区8家动物医院共计420份出现呼吸道症状的宠物犬鼻腔棉拭子样本进行分子检测。结果发现,从420份样本中,检出213份CDV阳性,检出率为50.71%;检出247份CRCoV阳性,检出率为58.81%;CDV和CRCoV混合感染的检出率为41.19%。表明成都地区宠物犬感染CDV和CRCoV较为严重,且二者混合感染率较高。宠物犬CDV和CRCoV的检出率与年龄、性别、品种、季节和免疫状况等因素的关系存在不同程度的差异。其中,1~3月龄幼犬检出率最高,分别为74.40%和79.20%;纯种犬的检出率较其他犬种高,分别为59.37%和62.22%;春季CDV的检出率较高,为56.19%,而冬季CRCoV的检出率较高,为67.59%;未免疫犬的检出率较高,分别为64.42%和63.46%。该研究丰富了成都地区宠物犬CDV和CRCoV的流行病学资料,为该地区宠物犬CDV和CRCoV的诊断及防控提供了基本数据。
- 张昕黄坚张萍杨晓农
- 关键词：分子流行病学
- 右美托咪定复合利多卡因持续输注对犬异氟烷麻醉的影响被引量：3
- 2017年
- 为了减小异氟烷麻醉的不良反应,获得良好的麻醉效果,探讨了盐酸右美托咪定和利多卡因复合静脉输注对异氟烷麻醉效果的影响。将12只临床健康的小型成年犬随机分为单一异氟烷(13mL/L)维持麻醉组(ISO)和右美托咪定(每小时2μg/kg静脉输注)-利多卡因(每小时50μg/kg静脉输注)-异氟烷(7.5mL/L)复合维持麻醉组(LDI)。两组犬均采用相同的麻醉前处理并辅助机械通气,麻醉维持时间1h,并监测和记录各项麻醉相关指标。结果显示,与ISO组相比,复合麻醉组犬只能更快地进入麻醉稳定期(P<0.01),镇静、镇痛和肌松效果更好(P<0.05),恢复苏醒的时间也更短(P<0.01);期间动物心率明显降低(P<0.01),但血压和血气离子浓度变化相对稳定。此外,心脏出现的代偿性扩张(P<0.05)和血液动力学变化并未明显影响心脏的收缩和射血功能,均在临床可接受范围内。结果表明,盐酸右美托咪定和利多卡因复合用药可减少异氟烷的使用浓度,提供稳定的麻醉效果,动物的苏醒质量更佳,可以用于临床麻醉。
- 黄坚沙聪曹伟陈晗秋杨晓农
- 关键词：利多卡因异氟烷麻醉
- 家兔矮小同源盒基因(Shox2)的克隆和表达分析
- 2019年
- 为了研究新西兰白兔矮小同源盒基因(Shox2)序列,预测其结构和功能,以及研究Shox2基因的时空表达特征,本研究克隆了新西兰白兔Shox2基因全长CDS区,分析其编码蛋白的同源性、亲疏水性、二级和三级结构特点、系统进化树等生物信息学特征,并用Western blot法验证融合蛋白TrxA-Shox2。分别在胚胎中期(E20.5d)、胚胎后期(E28.5d)、幼龄期(出生后10d)、成年期(A)4个时间点采集3只动物的肾、大血管、真皮、心、大脑、肝、肺、脾、肌肉、胆囊共10种组织,采用实时荧光定量PCR技术研究Shox2基因的时空表达图谱。结果,成功克隆了新西兰白兔Shox2基因(登录号:KP726285)。Shox2基因CDS区全长666bp,翻译221个氨基酸。生物信息学分析显示,Shox2为碱性、不稳定蛋白,Shox2蛋白氨基酸二级结构中α-螺旋区域占61.99%,无规则卷曲区域占33.48%,延伸链占4.52%。Western blot验证了融合蛋白TrxA-Shox2的表达。家兔Shox2蛋白氨基酸序列与眼镜猴、猩猩、褐家鼠、人的氨基酸序列同源性较高,说明Shox2蛋白在进化中较保守。Shox2基因mRNA在很多器官都有表达,在E20.5d的家兔胚胎中,Shox2mRNA在肾、肌肉和胆囊的表达量高,在E28.5d时表达量较高的是脾、心,幼龄期时表达量较高的是真皮、肝,成年期时表达量较高的是真皮、脾。本研究成功克隆了新西兰白兔Shox2基因,预测了其结构和功能。Shox2基因mRNA在很多器官都有表达,不同的组织和不同时间特征的表达量变化可能与Shox2功能高度相关,并受到严格的调控。
- 陈瑞陈瑞黄坚杨晓农
- 关键词：家兔克隆生物信息学分析
- 右美托咪定、利多卡因和丙泊酚全凭静脉麻醉用于犬去势手术的效果研究被引量：1
- 2020年
- 为了探讨右美托咪定-利多卡因-丙泊酚静脉复合静脉注射麻醉方式对接受生理性去势手术犬的镇痛效果,试验将20只临床健康犬随机分为单一丙泊酚组(P组)、右美托咪定-丙泊酚组(DP组)、利多卡因-丙泊酚组(LP组)和右美托咪定-利多卡因-丙泊酚组(DLP组),均以0.25 mg/(kg·min)的剂量静脉注射丙泊酚用于基础麻醉,然后分别经另一静脉通道分别注射生理盐水(对照)、右美托咪定[0.5μg/(kg·h)]、利多卡因[100μg/(kg·min)]、右美托咪定[0.5μg/(kg·h)]+利多卡因[100μg/(kg·min)],用于犬的维持麻醉。所有犬只均给予负荷剂量的右美托咪定(1.0μg/kg)和利多卡因(1.5 mg/kg)作为麻醉前用药,并以丙泊酚诱导和辅助机械通气。根据心率、血压变化及犬的表现来调整术中丙泊酚的用量,并麻醉维持至手术结束。记录犬麻醉前后血液学指标变化和苏醒时间,根据格拉斯哥综合疼痛评分系统(GCMPS)评价犬术后的疼痛反应,对于观察期第4小时得分大于9的犬需额外给予曲马多镇痛。结果表明:给予负荷剂量的右美托咪定和利多卡因后,犬只诱导麻醉和插管过程顺畅,可以平稳进入麻醉维持阶段,期间犬的心率稳步下降。在监测的各个时相点,随着手术刺激强度的增加,DLP组犬只的心率和血压变化较为平稳,均在临床接受范围内。维持麻醉所需的丙泊酚用量[(0.23±0.03)mg/(kg·min)]也明显减少,与其他组差异显著(P<0.05)。麻醉前后,P组犬只的白细胞数、红细胞数、血红蛋白浓度、血细胞比容、二氧化碳分压变化显著(P<0.05),其他组血液学指标的整体变化不显著(P>0.05)。虽然DLP组犬的苏醒期延长,但苏醒过程较为平稳。此外,DLP组术后的平均疼痛评分均低于其他组,需要额外给予镇痛剂的比例也更少(P<0.05)。说明右美托咪定、利多卡因联合用于持续静脉注射可以为丙泊酚静脉平衡麻醉提供安全、稳定的效果,减少丙
- 郭琪李妍杨晓农黄坚
- 关键词：利多卡因丙泊酚静脉麻醉去势手术
- 成都地区犬腺病毒2型分子流行病学调查及其纤突基因的生物信息学分析被引量：3
- 2020年
- 为了解成都地区犬腺病毒2型(canine Adenovirus tgpe 2,CAV-2)的流行情况及其纤突基因的遗传变异情况,试验对采集的291份样本(鼻腔样本78份、粪便样本213份)进行PCR检测,利用SPSS软件分析CAV-2感染与犬年龄、性别、免疫情况及季节之间的关系;对CAV-2阳性样本的纤突基因进行全基因扩增,并利用生物信息学软件对其遗传变异情况进行研究。结果表明:在291份样本中,CAV-2阳性率为16.49%(48/291),其中鼻腔样本中CAV-2检出率为17.95%(14/78),粪便样本中CAV-2检出率为15.96%(34/213)。6月龄以下的幼龄犬中CAV-2检出率较高,与其他年龄犬只间存在显著差异(P<0.05);免疫完全犬的感染率与未免疫和不完全免疫幼犬间存在极显著差异(P<0.01));CAV-2的感染率无性别、季节等差异(P>0.05)。获得的48条CAV-2纤突基因序列与`GenBank中收录的国内外CAV-2毒株之间有较高的核苷酸序列同源性(98.3%~99.9%)和氨基酸序列同源性(98.5%~99.6%);48例阳性样本的核苷酸序列都处于同一CAV-2分支上,CAV-2的纤突蛋白氨基酸序列的糖基化位点都发生在N-Linked糖基化的N-X-T、N-X-S这两种保守序列段中,糖基化位点的数目和位置未发生改变。说明CAV-2纤突基因的遗传性稳定,在成都地区未显示明显变异。
- 张发明黄坚封海波李妍吉文汇卢建远黄志宏杨晓农
- 关键词：流行病学调查生物信息学
- 成都地区健康犬及其畜主鼻腔金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌的分离及耐药性研究被引量：5
- 2017年
- 为了解成都地区健康犬及其主人金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌的携带率及耐药情况,对收集的鼻腔棉拭子样本308份(犬源和人源各154份)进行相关细菌分离、纯化及鉴定.对获得菌株进行药物敏感性和mec A基因检测.结果表明:犬源和人源金黄色葡萄球菌分离率分别为5.19%(8/154)和13.64%(21/154),犬源和人源中间型葡萄球菌分离率分别为9.74%(15/154)和2.60%(4/154);金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌中mec A检出率分别达20.71%和68.42%;29株金黄色葡萄球菌对磺胺二甲嘧啶耐药最严重(耐药率R达93.10%),对青霉素G和复方新诺明耐药较严重(R分别为72.41%和58.62%),对其余药物呈不同水平耐药性(耐药率范围6.90%~27.59%);19株中间型葡萄球菌对磺胺二甲嘧啶、青霉素G耐药非常严重(R分别达100.00%和94.74%),对红霉素及复方新诺明耐药较严重(R分别为78.95%和73.68%),对其余药物呈不同水平耐药性(R范围5.26%~63.16%),26.32%中间型葡萄球菌对苯唑西林耐药.不同来源菌株表现出较严重多重耐药性,尤其是耐苯唑西林中间型葡萄球菌呈100.00%多重耐药性.以上结果说明,健康犬和人类鼻腔内可携带金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌,这些菌株已呈较严重耐药性,在这些菌株中mec A基因普遍存在,应加强对这两种细菌流行情况及其耐药性检测.
- 曾婉秋杨晓农陈瑞翟禹涵黄坚
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性MECA基因
- 成都市猫泛白细胞减少症病毒、星状病毒和肠道冠状病毒的分子流行病学调查被引量：4
- 2019年
- 为了解成都市区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫星状病毒(FAstV)和猫肠道冠状病毒(FECoV)的分子流行情况,本试验采集了315份家养猫和34份社区流浪猫的肛门拭子,含228份临床发病猫样本和121份临床健康猫样本,采用PCR方法对所有样本进行病毒核酸检测。同时,根据动物年龄、生活状态和免疫情况等因素进行病原流行分析,并根据病毒基因片段序列构建遗传进化树。结果显示,FPV、FAstV和FECoV的检出率分别为38.4%(134/349)、23.2%(81/349)和19.5%(68/349)。在混合感染方面,以FPV/FAstV(9.5%,33/349)、FAstV/FECoV(4.6%,16/349)和FPV/FECoV(4.3%,15/349)双重感染为主。基于部分基因序列的分析结果显示,样本间FPV VP2基因序列的同源性为95.1%～100%,发病猫毒株分为两个分支,其中一支与葡萄牙毒株(GenBank登录号:KT240136)和加拿大毒株(GenBank登录号:MF069445)遗传关系较近;另一支与中国的CPV毒株(GenBank登录号:KY937664)关系较近。样本间FAstV ORF1b基因序列同源性为90.9%～99.7%,发病猫的毒株的两个分支中一支与葡萄牙毒株(GenBank登录号:KF374704)和美国毒株(GenBank登录号:KM017743)关系较近;另一分支与中国香港毒株(GenBank登录号:KF499111)关系紧密。样本间FECoV的N基因序列同源性范围为89.3%～100%,与美国毒株(GenBank登录号:FJ938059)、意大利毒株(GenBank登录号:GU017092/GU017107)和中国毒株(GenBank登录号:KT852997)关系密切。调查结果表明,成都市区猫携带病毒性腹泻病原的情况较为普遍,部分猫存在多病原混合感染,且病毒基因序列存在明显变异,增加了病原流行及带毒猫发病的风险,需积极地进行临床防控。
- 张梦薇陈艳李妍杨晓农黄坚
- 关键词：病毒性腹泻遗传进化
- 犬乳腺肿瘤诊治被引量：5
- 2020年
- 犬乳腺肿瘤是母犬常见的肿瘤性疾病,据报道,在犬乳腺肿瘤疾病中,50%的病例为恶性乳腺肿瘤。犬乳腺肿瘤的病因复杂,其致病原因通常分为内因与外因,外因有化学因素、物理因素、生物因素,内因包括遗传因素、激素因素及性别、年龄等。1临床症状病犬为10岁雌性拉布拉多犬,其后腹部有包块,包块表皮破溃,破溃未增大。2检查2.1临床检查病犬T:38.4℃,P:84/min,R:24/min,体重29 kg,可视黏膜粉红,患部皮温高,破溃,包块约15 cm×5 cm×5 cm,其左后肢轻度水肿。
- 张源杨晓农黄坚卢建远
- 关键词：肿瘤性疾病拉布拉多犬母犬生物因素
- 猫传染性腹膜炎诊断被引量：2
- 2020年
- 猫传染性腹膜炎(FIP)是由猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)引起的猫科动物传染病,致死率较高。FIP根据宿主的免疫应答反应可分为渗出型和非渗出型,渗出型特征为炎性渗出物积聚于体腔内,非渗出型特征为脑水肿或个别脏器肉芽肿或有坏死灶,临床上常有混合型。FIPV是猫冠状病毒(FCoV)的高毒力突变株,多经粪便—口、鼻途径传播,易感宿主为幼年或老年猫,雄猫发病率高于雌猫。
- 王丹黄坚岳华张斌
- 关键词：免疫应答反应渗出型猫科动物坏死灶炎性渗出物高毒力
- 一例犬细小病毒与圆环病毒混合感染的诊断报告
- 2020年
- 本试验的目的是对1例以呕吐和血便为突出症状的6月龄博美犬进行病原检测。采用PCR方法检测了犬细小病毒、犬冠状病毒、犬瘟热病毒、犬圆环病毒和犬星状病毒五种致犬腹泻的病毒,结果显示为犬细小病毒和犬圆环病毒的混合感染。本试验为犬病毒性腹泻的病原诊断提供了参考。
- 冯帆卢建远黄坚汤承
- 关键词：犬细小病毒PCR
