丁利军
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 活体采卵时间间隔对牛克隆胚胎发育的影响
- 2008年
- 采用活体穿刺技术(ovum pick up,OPU),分别间隔3/4(1周2次)、5、7、10、14 d对同一批荷斯坦奶牛进行穿刺采卵,根据优势卵泡直径和所有卵丘细胞-卵母细胞复合体的状态确定采卵时卵泡所处的发育阶段,从而确定卵泡波的发育动态变化。并以间隔不同时间采卵获得的卵母细胞成熟后进行体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)制备克隆牛胚胎,重构胚体内培养7 d后,通过比较克隆囊胚的发育率判定卵母细胞质量的差异,从而确定最佳的采卵时间间隔。结果显示:①穿刺采集所有直径超过3mm的卵泡后,可起始1个新卵泡波,大约5 d后从属卵泡开始进入凋亡阶段,7 d后进入晚期凋亡阶段,第7～10 d又起始1个新的卵泡波,第14 d时第2个卵泡波中的从属卵泡起始凋亡。②间隔不同时间组克隆囊胚发育率存在差异,间隔3/4 d(1周2次)为23.1%,间隔5 d组为15.0%,间隔7 d组为10.9%,间隔10 d组为4.9%,间隔14 d组为29.0%。结果显示:间隔不同的时间采卵,卵泡所处的发育状态存在差异,并对卵母细胞质量具有显著的影响。
- 王敬军田海滨丁利军陈娟徐旭俊沙红英陈建泉成国祥
- 关键词：奶牛活体采卵体细胞核移植
- 奶牛卵泡超数同步发育及其卵母细胞的发育潜能
- 2008年
- 目的建立促奶牛卵泡超数同步发育的方法,并利用体细胞核移植和分子技术评价来自这些卵泡的卵母细胞发育潜能。方法用E2-P4对淘汰的高产奶牛进行联合处理后,分别对其实施不同组合的外源促性腺激素处理[FSH12h组,FSH48h组,FSH48h-LH6h组(简称LH6h组),FSH48h-LH26h组(简称LH26h组)]以促进其卵泡超数同步发育;然后从卵泡中回收COCs进行体外成熟,排放第一极体的卵供作优质种牛的体细胞核转移(nucleartransfer,NT)受体,以评价卵的发育潜能。结果E2-P4能成功地诱导奶牛卵巢中产生一个新的卵泡起始波,并能保证卵泡在外源促性腺激素作用下实现超数同步发育;上述四组不同组合外源促性腺激素处理的卵母细胞衍生的NT重构胚经体内培养7d后,后3组的囊胚发育率显著高于FSH12h组和对照组(P<0.01);将这些克隆囊胚移植同步发情的受体牛子宫后,仅LH26h组的卵所获得的克隆胚能实现全程发育(直至克隆小牛出生)。经RT-PCR分析颗粒细胞中FSHr、LHr和连接蛋白43(Connexin43,Cx43)等mRNA含量变化,以及Western印迹分析其Bcl-2和Bax蛋白表达水平的变化,证实该组卵巢提供的同步发育卵泡为早期闭锁卵泡。结论E2-P4-FSH48h-LH26h组合处理可人为调控牛卵泡的同步发育;处于早期闭锁状态卵泡的卵母细胞具备较高的发育潜能。
- 陈娟沙红英田海滨丁利军黄志军陈建泉葛来香徐旭俊吴友兵成国祥
- 关键词：奶牛
