季磊
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市科委基金重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 短期使用雷帕霉素联合调节性T细胞可延长小鼠移植心脏时间但不能抑制受体肿瘤发生
- 2017年
- 目的研究短期使用雷帕霉素(Rap)联合调节性T细胞(Treg)在诱导同种异体小鼠心脏移植物长期存活,同时探讨此方案对移植受体肿瘤免疫的影响。方法免疫磁珠法分离得到受体小鼠脾脏Treg,经CD3/CD28单克隆抗体磁珠及2000 U/m L重组小鼠白细胞介素2(rm IL-2)体外扩增后,流式细胞术检测纯度;建立小鼠腹腔同种异体心脏移植模型(H-2~b到H-2~d),分为对照组(单纯移植)、Rap组、Rap联合Treg组。Rap组连续14 d经腹腔注射Rap 1 mg/(kg·d),Rap联合Treg组注射相同剂量的Rap,并移植当天经尾静脉过继输注扩增后的1×107个Treg,同时设同基因移植组(H-2~d到H-2~d),每日观察移植心脏搏动并在相应时点进行组织学评价。在受体肿瘤免疫实验中设三组同种异体心脏移植(H-2~b到H-2~d)小鼠,同时经尾静脉过继输注B16-F10细胞(H-2~b)(受体来源),另三组同种异体心脏移植(H-2~d到H-2~b)小鼠经尾静脉过继输注B16-F10细胞(H-2~b)(供体来源),两周后比较肺部肿瘤结节数量。结果对照组移植心脏中位生存时间(MST)为7 d,Rap组为15 d,Rap联合Treg过继输注能够显著延长移植心脏MST至93 d,组织学显示长期存活心脏淋巴细胞浸润及慢性血管病变;对于供体来源肿瘤,对照组未见肿瘤结节,Rap组为(15±8)个,Rap联合Treg组小鼠肺部肿瘤结节为(14±7)个,后2组类似无显著性差异;对于受体来源肿瘤,对照组肿瘤结节为(70±12)个、Rap组为(28±9)个、Rap联合Treg组小鼠肺部肿瘤结节为(146±12)个,与对照组、Rap组相比均显著增加。结论短期使用低剂量Rap联合Treg能够显著延长小鼠移植心脏的存活时间,但仍不能抑制受体肿瘤的发生。
- 闫挺骆晨杨先模季磊罗诗樵
- 关键词：心脏移植肿瘤免疫
- IL-6/STAT3信号通路与小鼠联合原位肝劈开和门静脉分支结扎术后肝脏再生的关系被引量：2
- 2019年
- 目的:建立联合原位肝劈开和门静脉分支结扎(associating liver partition and portal vein ligation for staged heptectomy,ALPPS)小鼠模型,研究IL-6/STAT3信号通路与ALPPS促进肝脏再生的关系。方法:将45只BALB/C小鼠随机分为3组,分别为ALPPS组、门静脉分支结扎(portal vein ligation,PVL)组和假手术(SHAM)组,每组15只。PVL组即结扎支配左外叶、中叶右侧和右叶的门静脉分支,保留支配中叶左侧和尾状叶的门静脉分支血流。ALPPS组即在PVL组的基础上,沿着中叶缺血线将中叶离断。SHAM组即离断肝韧带,游离肝脏各叶。通过测定血浆ALT值,评估ALLPS和PVL术后肝功能情况。用肝脏再生指数评估肝脏再生情况。免疫组化检测Ki-67阳性蛋白表达来评估肝细胞增殖情况。免疫印迹技术被用来检测肝组织IL-6/STAT3信号通路变化情况。结果:术后48 h的ALPPS组ALT值高于PVL组,且两者有统计学差异(P=0.000)。而ALPPS和PVL术后96 h的ALT值较48 h下降,且两者在术后96 h的ALT值无明显统计学差异(P=0.094)。术后48 h和96 h的ALPPS组的肝脏再生指数(P48 h=0.000,P96 h=0.000)和Ki-67阳性细胞与肝细胞总数比值(P48 h=0.001,P96 h=0.000)高于PVL组,且两者有统计学差异。术后48 h的ALPPS组IL-6蛋白的表达和STAT3蛋白的磷酸化程度高于SHAM组(PIL-6=0.000, Pp STAT3=0.000)和PVL组(PIL-6=0.011,Pp STAT3=0.003),且有统计学差异。结论:成功建立了小鼠ALPPS模型,ALPPS比PVL更能促进肝脏再生和IL-6/STAT3信号通路与ALPPS介导肝脏再生的过程存在密切的关系。
- 季磊闫挺任翱万顺缘罗诗樵
- 关键词：肝脏再生
- 索拉菲尼对转化生长因子-β_1诱导的人肝癌细胞系SMCC-7721的上皮-间质转化的抑制作用被引量：4
- 2018年
- 目的研究索拉菲尼对转化生长因子-β_1(TGF-β_1)诱导的人肝癌细胞系SMCC-7721上皮-间质转化(EMT)的抑制作用。方法将肝癌细胞系SMCC-7721分4组:空白组、模型组和低、高2个剂量实验组。空白组加入磷酸盐缓冲液(PBS)处理肝癌细胞,模型组用TGF-β_15 ng·mL-1处理肝癌细胞。在造模基础上,实验组分别加入索拉菲尼10,2μmol·mL-1处理肝癌细胞。各组细胞处理24 h后,划痕实验和Transwell侵袭实验分别观察不同处理组肿瘤细胞迁移和侵袭情况;以蛋白印记实验分别检测E-cadherin和Vimentin和蛋白表达情况。结果模型组、空白组与高剂量实验组的伤口愈合率分别为(53.72±2.83)%,(40.35±2.55)%,(30.38±3.00)%;这3组的穿过小室肿瘤细胞数量分别为130.25±14.39,84.50±8.81,37.75±6.75,模型组明显高于空白组,差异均有统计学意义(均P<0.05);高剂量实验组与模型组比较,这2项指标均明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组与高剂量实验组的E-cadherin蛋白表达分别为0.80±0.18,1.56±0.24;这2组的Vimentin蛋白的表达分别为1.25±0.14,0.55±0.29,高剂量实验组与模型组相比,两者差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论索拉菲尼可以抑制TGF-β_1诱导的肝癌细胞SMCC-7721的EMT和降低其迁移能力和侵袭性。
- 季磊闫挺任翱万顺缘罗诗樵
- 关键词：索拉菲尼上皮-间质转化转化生长因子-Β1
