曾飒
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
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- 16SrRNA高通量测序研究有龋者唾液微生物群落结构及多样性被引量：10
- 2015年
- 目的:通过16SrRNA高通量测序研究有龋和无龋者唾液的微生物群落结构及其差异。方法:在甘肃省康乐县景古镇居民口腔检查中随机选取14位汉族居民,其中,7例有龋(caries-active,CA组,DMFT≥4)、7例无龋(caries-free,CF组)。采取唾液样本,提DNA,PCR扩增,利用Illumina Miseq测序平台对16SrRNA V4区进行双端测序;利用Mothur、MEGAN4、Cluster 3.0和Java Treeview等软件进行细菌群落结构及多样性的差异分析。结果:共得到118151条优质序列,发现5738个OTUs,2795个物种,归属27个门,218个属。CA组和CF组唾液微生物群落结构有差异,其中,门水平上,Firmicutes和SR1在CA组显著低于CF组(P<0.05)。属水平上,Rothia、Alistipes和Catonella在CA组显著低于CF组(P<0.05),Scardovia在CA组显著高于CF组(P<0.05);CA组和CF组OTUs分别为(550.2±26.48),(597.4±66.07),CA组和CF组Simpson多样性指数分别为(0.73±0.03),(0.49±0.01),均无统计学差异。结论:人类口腔唾液有复杂的微生物群落结构;在门水平和属水平上,有龋者的微生物种类较无龋者稍有减少;Firmicutes和SR1菌门,Rothia、Alistipes和Catonella菌属的存在与龋病呈负相关;相反地,Scardovia等菌属的存在与龋病呈正相关。
- 王少果游祥磊车春晓曾飒周建业李志强何祥一
- 关键词：龋病微生物群落结构唾液
- 慢病毒介导过表达hTERT人口腔黏膜上皮稳定细胞系的构建
- 目的:口腔黏膜疾病是发生于口腔黏膜的所有疾病的总称，其种类繁多，病因复杂且多数疾病的致病机理尚未完全明确。其中起源于口腔黏膜的恶性肿瘤不仅发病率高而且成为影响人们生活质量的常见疾病，甚至严重威胁着生命健康。由于正常的OM...
- 曾飒
- 关键词：口腔黏膜疾病HTERT基因
- 慢病毒介导过表达端粒酶逆转录酶的人口腔黏膜上皮稳定细胞系的构建被引量：2
- 2016年
- 目的通过慢病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶逆转录酶(h TERT)基因的口腔黏膜上皮细胞(OMECs),探索构建高效、稳定的永生化OMECs细胞系的方法。方法提取293T细胞总RNA,应用聚合酶链反应(PCR)法扩增h TERT基因全长,构建重组慢病毒载体p LVX-puro-h TERT。包装慢病毒颗粒后感染人正常OMECs,经嘌呤霉素抗性筛选获得阳性克隆,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测h TERT基因m RNA和蛋白的表达水平。结果成功构建了p LVX-puro-h TERT过表达慢病毒载体并感染到OMECs中;感染细胞与正常OMECs形态相似,呈铺路石样生长;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示,h TERT在感染细胞中高表达,与正常细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过慢病毒法成功建立了过表达h TERT的OMECs稳定细胞系,为构建高效、稳定增殖的人永生化OMECs细胞系奠定了实验基础。
- 曾飒秦晓东何祥一车春晓张潇解斯羽孙贵军王立鹤
- 关键词：口腔黏膜上皮细胞人端粒酶逆转录酶
- 针对变异链球菌的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性被引量：1
- 2016年
- 目的研究针对变异链球菌(S.mutans)的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性。方法通过标准固相合成技术(Fmoc保护法)合成人源抗菌肽LL-37、S.mutans感受态刺激肽(CSP)C端16个氨基酸组成的多肽CSPC16及二者的重组多肽C16LL-37;以LL-37、CSPC16为对照组,采用平板菌落计数法检测C16LL-37对S.mutans、黏性放线菌、大肠埃希菌、嗜酸乳杆菌、金黄色葡萄球菌的抗菌活性及其对S.mutans的靶向性。通过扫描电子显微镜(SEM)观察,浓度为32μmol·L^(-1)的C16LL-37作用后S.mutans的细胞形态学变化;利用酶联免疫吸附法测定C16LL-37的红细胞溶血率以及不同条件对C16LL-37抗菌活性的影响。结果 1)C16LL-37对S.mutans的最小抗菌浓度为16μmol·L^(-1),最小杀菌浓度为64μmol·L^(-1)。2)C16LL-37浓度为64μmol·L^(-1)时,作用30 min后S.mutans存活率为3.46%,作用60 min后细菌存活率降至0%,其他4种细菌在各时间的存活率均大于60%(P<0.05)。3)SEM观察:经C16LL-37(32μmol·L^(-1))作用后,部分S.mutans细胞形态出现不规则改变,部分细胞的细胞膜粗糙、细胞质外溢或出现细胞裂解。4)C16LL-37浓度不超过64μmol·L^(-1)时,红细胞溶血率低于0.33%,与阴性对照组无明显差异(P>0.05)。5)不同温度、p H值、盐浓度及低浓度胰蛋白酶处理后,C16LL-37的抗菌活性无明显变化(P>0.05)。结论 C16LL-37对变异链球菌具有靶向特异性,并且具有较强的抗菌活性、较高的生物安全性及良好的稳定性。
- 车春晓姜科宇马媛媛曾飒周建业李志强何祥一
- 关键词：变异链球菌抗菌肽
- 口腔枯草芽孢杆菌代谢产物的抑菌活性研究被引量：4
- 2015年
- 目的:从口腔中分离枯草芽孢杆菌并验证其代谢产物对主要致龋菌的抑制作用。方法:搔刮法提取牙菌斑,平板稀释法筛选出细菌后,进行形态学观察及16SrDNA基因序列的比对。琼脂平板打孔法检测其代谢产物对变形链球菌、粘性放线菌及嗜酸乳杆菌的抑菌活性。结果:从牙菌斑中分离出3株细菌,通过形态学及16SrDNA基因序列检测确定为枯草芽孢杆菌;其代谢产物对变形链球菌、粘性放线菌、嗜酸乳杆菌均具有抑制作用,其中对粘性放线菌抑制作用最强。结论:牙菌斑中可以分离出枯草芽孢杆菌,并且其代谢产物对主要致龋菌具有抑制作用,枯草芽孢杆菌有望作为益生菌在龋病防治中发挥重要作用。
- 游祥磊王少果曾飒车春晓周建业王佳佳李志强何祥一
- 关键词：枯草芽孢杆菌代谢产物抑菌活性致龋菌
- 益生性唾液乳酸杆菌的筛选及其抑菌物质的初步探究被引量：1
- 2016年
- 目的:在从健康人群口腔中筛选出具有益生潜能的唾液乳酸杆菌,对益生菌用于口腔疾病的防治进行初步探究。方法:取身体健康且无口腔疾病的志愿者非刺激性唾液并进行选择性培养,筛选得到乳酸杆菌,经革兰染色鉴定及16srDNA测序分析得到唾液乳酸杆菌,将菌株纯化培养后取其无菌的发酵液上清以变形链球菌为指示菌进行抑菌实验,进而筛选出具有显著抑菌效果的目标菌株,并对该菌株发酵液中的抑菌物质进行初步分析。结果:成功筛选出目标菌株唾液乳酸杆菌w22a,其抑菌物质的抑菌作用随着浓度的增大而增强,且对热稳定、对过氧化氢酶及多种广谱蛋白酶敏感并能抑制多种口腔常见的致病菌。结论:w22a是一株有口腔益生潜能的唾液乳酸杆菌,具有一定的研究价值及应用前景。
- 王立鹤薛龙聂红兵周海静郭曼丽康永杰曾飒杨兰
- 关键词：唾液抑菌物质
