王立鹤
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 供职机构:兰州大学口腔医学院更多>>
- 发文基金:甘肃省自然科学基金国家民委科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 慢病毒介导过表达端粒酶逆转录酶的人口腔黏膜上皮稳定细胞系的构建被引量:2
- 2016年
- 目的通过慢病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶逆转录酶(h TERT)基因的口腔黏膜上皮细胞(OMECs),探索构建高效、稳定的永生化OMECs细胞系的方法。方法提取293T细胞总RNA,应用聚合酶链反应(PCR)法扩增h TERT基因全长,构建重组慢病毒载体p LVX-puro-h TERT。包装慢病毒颗粒后感染人正常OMECs,经嘌呤霉素抗性筛选获得阳性克隆,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测h TERT基因m RNA和蛋白的表达水平。结果成功构建了p LVX-puro-h TERT过表达慢病毒载体并感染到OMECs中;感染细胞与正常OMECs形态相似,呈铺路石样生长;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示,h TERT在感染细胞中高表达,与正常细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过慢病毒法成功建立了过表达h TERT的OMECs稳定细胞系,为构建高效、稳定增殖的人永生化OMECs细胞系奠定了实验基础。
- 曾飒秦晓东何祥一车春晓张潇解斯羽孙贵军王立鹤
- 关键词:口腔黏膜上皮细胞人端粒酶逆转录酶
- 唾液乳酸杆菌w22a和种植体周围炎致病菌体外作用的初步研究被引量:5
- 2016年
- 目的:研究唾液乳酸杆菌w22a的潜在益生性和与种植体周围炎致病菌:牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、中间普氏菌(Pevotellaintermedia,Pi)、具核梭酸杆菌(Fusobacteriumncleatum,Fn)的体外作用,为乳酸杆菌w22a作为益生菌应用于种植体周围炎的防治提供实验依据。方法::通过检测w22a代谢产物成分、w22a对抑菌物质的耐受性等,初步探讨其口腔益生特性;并通过自聚和共聚实验、抑菌实验研究唾液乳酸杆菌w22a和种植体周围炎致病菌Pg、Pi、Fn的体外作用。结果:发现唾液乳酸杆菌w22a可产生有机酸、过氧化氢等抑菌物质,并能产生胞外多糖;w22a能够耐受一定浓度的抗生素和溶菌酶;w22a在体外有自聚集和与Pg、Pi、Fn发生共聚集的能力;其代谢产物对于Pg、Pi、Fn的生长具有不同程度的抑制作用。结论:唾液乳酸杆菌w22a能够对Pg、Pi、Fn产生生长抑制作用,具有口腔益生性,有望作为益生菌用于种植体周围炎的防治。
- 薛龙王立鹤聂红兵周海静郭曼丽康永杰杨兰
- 关键词:益生菌种植体周围炎
- 益生性唾液乳酸杆菌的筛选及其抑菌物质的初步探究被引量:1
- 2016年
- 目的:在从健康人群口腔中筛选出具有益生潜能的唾液乳酸杆菌,对益生菌用于口腔疾病的防治进行初步探究。方法:取身体健康且无口腔疾病的志愿者非刺激性唾液并进行选择性培养,筛选得到乳酸杆菌,经革兰染色鉴定及16srDNA测序分析得到唾液乳酸杆菌,将菌株纯化培养后取其无菌的发酵液上清以变形链球菌为指示菌进行抑菌实验,进而筛选出具有显著抑菌效果的目标菌株,并对该菌株发酵液中的抑菌物质进行初步分析。结果:成功筛选出目标菌株唾液乳酸杆菌w22a,其抑菌物质的抑菌作用随着浓度的增大而增强,且对热稳定、对过氧化氢酶及多种广谱蛋白酶敏感并能抑制多种口腔常见的致病菌。结论:w22a是一株有口腔益生潜能的唾液乳酸杆菌,具有一定的研究价值及应用前景。
- 王立鹤薛龙聂红兵周海静郭曼丽康永杰曾飒杨兰
- 关键词:唾液抑菌物质