杨桂林
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株的构建及筛选被引量：1
- 2015年
- 目的:构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株,为研究SLC7A11基因的表达沉默对肝癌发生发展的影响奠定基础。方法:针对SLC7A11基因的不同部位合成3个siRNA的寡核苷酸片段,分别将其克隆到真核表达载体p GPU6/GFP/Neo中。利用脂质体转染法分别将质粒导入肝癌LM3细胞,24小时后观察细胞内GFP表达情况,并通过real-time PCR及Western blot的方法比较各组细胞SLC7A11基因mRNA和蛋白的表达水平,然后用G418对转染细胞进行筛选培养。结果:经酶切分析及测序验证,成功构建了靶向沉默SLC7A11基因的真核表达质粒p GPU6-SLC7A11-siRNA;通过real-time PCR及Western blot的方法验证,成功筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株。结论:成功构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株,为进一步研究SLC7A11基因表达沉默对肝癌细胞发生发展的影响奠定了基础。
- 吴伟刚田圆刘琢冰刘妙娜刘威龙杨桂林陈心春周伯平
- 关键词：肝癌细胞细胞株
- BLCAP基因RNA过编辑对肝癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2016年
- 目的研究BLCAP基因RNA过编辑对肝癌SMMC7721、Focus细胞的生长增殖能力的影响,并探讨其在肝癌发生发展的作用。方法采用半定量PCR的方法分析BLCAP基因在11株肝癌细胞以及2株正常肝脏细胞中的表达情况,选出2株BLCAP基因相对低表达的肝癌细胞株。以基因转染技术,将空质粒(pc DNA3.1,对照组)、BLCAP_WT(野生型)和BLCAP_RDD(过编辑型)质粒(实验组)分别转染肝癌细胞株,通过Western blot法检验转染效率。利用CCK-8生长曲线试验和平板克隆形成实验检测肝癌细胞株的增殖能力。结果半定量PCR结果显示BLCAP基因在肝癌SMMC7721、Focus细胞中的表达量相对较低。Western blot的结果显示,实验组细胞BLCAP基因的蛋白表达水平较对照组细胞明显增高(P<0.05),表明转染较成功。CCK-8生长曲线试验和平板克隆形成实验的结果显示,肝癌SMMC7721和Focus细胞在转染BLCAP_RDD质粒后,其增殖能力较空质粒对照组及BLCAP_WT组细胞明显增强(P<0.05)。结论 BLCAP基因过编辑可促进肝癌SMMC7721和Focus细胞的增殖,提示其在肝癌细胞中的过编辑与肝癌的发生发展密切相关。
- 刘琢冰吴伟刚刘妙娜刘威龙杨桂林陈心春周伯平
- 关键词：BLCAP基因肝癌细胞增殖
- 深圳市首例甲型H1N1流感危重症孕产妇临床报道被引量：2
- 2011年
- 目的探索孕产妇甲型H1N1流感危重型病例的临床特点及诊治经验。方法深圳市首例甲型H1N1流感危重症孕产妇患者,应用奥司他韦和扎那米韦联合抗病毒治疗,早期机械辅助通气、抗菌药物、糖皮质激素、对症支持等综合治疗。采用荧光定量RT-PCR评价抗病毒治疗效果,动态放射学检查、血气分析、血常规和生化检查监测病情变化。结果该孕产妇以高热、咳嗽、呼吸困难为主要症状,3d后进展为重症肺炎,合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。联合抗病毒治疗后,患者体内的病毒在短期内得到有效控制和清除;抗菌药物有效控制细菌感染;机械通气、激素及其他对症支持治疗有效控制了ARDS。结论孕产妇甲型H1N1流感病情重、进展快,易合并ARDS为其主要临床特征。早期迅速清除病毒、及时正确的机械通气、选择有效抗菌药物控制继发细菌感染是治疗成功的关键。激素类药物的使用值得进一步探索。
- 李慧涓刘映霞李国保刘智傅向东刘艳杨桂林陈心春周伯平
- 关键词：孕产妇甲型流感H1N1呼吸窘迫综合征抗病毒药
