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李友
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
广东医学院
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发文基金:
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘根
广东医学院
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广东医学院
崔理立
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刘婷婷
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2014
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慢病毒载体介导的APP695过表达SH-SY5Y细胞系的构建和鉴定
被引量:2
2014年
目的通过构建pLVX-APP695-PGK-Puro慢病毒载体,用以建立可以稳定过表达APP695蛋白的SH-SY5YAPP695细胞株。方法利用PCR方法扩增目的基因片段APP695,并构建pLVX-APP695-PGK-Puro慢病毒载体,鉴定后将构建好的载体与慢病毒包装系统共转染293T细胞,并以最适感染复数感染神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,筛选稳转SH-SY5Y-APP695细胞株并用PCR和Western blot鉴定稳转株细胞APP695表达。结果对pLVX-APP695-PGK-Puro载体进行酶切鉴定及DNA测序证明构建过表达APP695的重组慢病毒载体成功,PCR和Western blot显示构建的SH-SY5Y细胞稳转株成功。结论成功构建APP695基因的慢病毒载体并成功构建了SH-SY5Y-APP695细胞株,该载体可在SH-SY5Y细胞株中高水平表达APP695。
崔理立
蔡玉洁
刘根
程婉雯
刘宇
刘婷婷
李友
关键词:
慢病毒载体
SH-SY5Y细胞
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