王军
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金：王宝恩肝纤维化研究基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 实验性肝纤维化大鼠肝组织CTGF基因DNA甲基化的变化
- 2013年
- 目的研究实验性肝纤维化大鼠肝组织结缔组织生长因子(CTGF)启动子DNA甲基化变化及其对CTGF基因表达的影响。方法建立大鼠四氯化碳肝纤维化模型,以HE染色和Sirius red染色评估大鼠肝组织学变化;采用RT-PCR和Western blot法分别检测肝组织CTGF mRNA和蛋白质表达;采用亚硫酸氢盐修饰后测序评估肝组织CTGF基因DNA甲基化水平变化。结果在皮下注射四氯化碳6周时模型组大鼠肝组织呈III级纤维化改变;模型组大鼠肝组织CTGF mRNA及蛋白表达分别为(1.581±0.276)和(0.875±0.102),均显著高于正常对照组分别为(0.415±0.041)和(0.115±0.083),(P值均<0.01);模型组CTGF基因启动子DNA甲基化率为(1.8±1.8)%,显著低于对照组(11.6±3.8)%,(P<0.01)。结论肝纤维化大鼠肝组织CTGF基因表达上调,其机制可能与CTGF基因DNA低甲基化改变相关。
- 李光明王军潘勤葛文松范建高
- 关键词：肝纤维化结缔组织生长因子DNA甲基化
- 整合素连接激酶在重组结缔组织生长因子诱导大鼠肝星状细胞表型转化中的作用
- 2014年
- 目的研究整合素连接激酶(ILK)在重组结缔组织生长因子(rCTGF)诱导大鼠原代肝星状细胞(HSC)表型转化中的作用。方法应用胶原酶原位灌注+密度梯度离心法分离SD大鼠原代HSC,细胞贴壁培养24 h后以rCTGF处理,24 h后转染ILK小干扰RNA(siRNA)或对照siRNA,设rCTGF对照及空白对照。应用RT-PCR及Western Blot检测转染siRNA 24、48及72 h时HSCα平滑肌肌动蛋白(αSMA)、ILK及I型胶原基因表达水平变化。计量资料采用t检验。结果与空白对照相比,rCTGF处理可显著上调大鼠HSCαSMA、ILK蛋白及I型胶原mRNA表达。转染ILK siRNA可特异性抑制rCTGF诱导的ILK表达上调,与rCTGF对照相比,转染ILK siRNA 24、48及72 h时,HSC ILK蛋白表达分别下调72%±6%(t=21.39,P<0.01)、87%±9%(t=68.25,P<0.01)及47%±3%(t=18.25,P=0.003);αSMA蛋白及I型胶原mRNA表达分别下调5%±1%(t=2.52,P>0.05)及6%±3%(t=1.63,P>0.05)、31%±7%(t=34.77,P<0.01)及20±5%(t=6.71,P<0.05)和67%±8%(t=58.82,P<0.01)及43%±6%(t=15.21,P<0.01);转染对照siRNA时,HSC ILK、αSMA及I型胶原mRNA表达在相同时点无显著变化。结论 ILK可能部分介导了rCTGF诱导的大鼠HSC表型转化。
- 李光明颜士岩王军潘勤范建高
- 关键词：整合素连接激酶结缔组织生长因子小分子干扰
- 新型异喹啉类化合物12-4-Y对活化肝星状细胞凋亡的影响及其机制研究被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨新型异喹啉类化合物12-4-Y[1-乙基-8-甲氧基-5苯基吡唑并（5,1-a）异喹啉]对大鼠肝星状细胞（HSC）凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法 以不同浓度（5、10、20、40和80μg/ml）12-4-Y处理HSC-T6细胞,分别于孵育后12h、24h、36h和48h收集细胞,以MTT法检测细胞增殖,以Hoechst染色对凋亡定性,以流式细胞分析对凋亡定量,应用Western blot检测凋亡关键蛋白Caspase3表达变化。结果 12-4-Y处理12h可浓度依赖性（在5～80μg/ml范围内）抑制HSC-T6细胞增殖,细胞增殖率分别为（1.086±0.013）、（1.055±0.019）、（0.957±0.012）、（0.793±0.021）和（0.553±0.031）,均显著高于对照组水平（1.215±0.014,P〈0.05）;12-4-Y（20μg/ml）处理可时间依赖性抑制HSC-T6细胞增殖,在12 h、24 h、36 h、48 h,细胞增殖率分别为（0.957±0.012）、（0.852±0.024）、（0.641±0.032）和（0.492±0.017）,与对照组（1.318±0.007,P〈0.01）差异具有显著性;12-4-Y（20μg/ml）处理24h时,Hoechst染色显示HSC-T6可见明显凋亡小体,流式细胞分析显示凋亡率为（29.23±1.20）%,显著高于对照组[（5.47±1.39）%,P〈0.001];蛋白质印迹显示凋亡关键蛋白Caspase3的裂解产物表达亦显著增加。结论 新型异喹啉类化合物12-4-Y可显著诱导活化HSC凋亡,其机制与激活凋亡关键蛋白Caspase3有关。
- 王军李光明仝艳艳邓怡林吴劼范建高
- 关键词：肝星状细胞凋亡凋亡小体
- microRNAs在肝纤维化形成中的作用被引量：1
- 2014年
- 微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,在肝纤维化形成中miRNAs可出现表达异常,这些异常表达的miRNAs不仅参与调控肝损伤修复反应,而且可作为评估肝功能储备的分子标志物。本文就miRNAs在肝纤维化发生发展中作用的研究进展作一综述。
- 王军李光明
- 关键词：肝纤维化微小RNA肝星状细胞细胞外基质
