罗林
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金会项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测被引量：1
- 2007年
- 目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定。重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测。结果构建的重组质粒pBluescript-SK-II-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列。亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7-HNP-3,测序鉴定表明其插入目的基因序列无误。重组诱饵质粒自激活和毒性检测显示无自激活现象发生,对酵母细胞AH109无毒性作用。结论成功构建了防御素HNP-3成熟肽的酵母双杂交诱饵载体;为用酵母双杂交技术研究与防御素HNP-3成熟肽相互作用蛋白质打下了基础。
- 马生秀邓璐霞罗林彭媛媛路会侠张敏熊文碧冯云吴琦王伯瑶黄宁
- 关键词：防御素成熟肽酵母双杂交
- 腹腔注射乳化异氟醚对大鼠气道上皮组织β防御素mRNA表达的影响
- 2010年
- 目的本研究旨在探讨腹腔注射乳化异氟醚对大鼠气道上皮细胞中β防御素BD-1、BD-2以及促炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-8 mRNA表达水平的影响。方法健康清洁级SD大鼠36只随机分成6组,分别为A^F组。A组经腹腔注射生理盐水,B组经腹腔注射30%脂肪乳,C^F组分别经腹腔注射0.25、0.5、1.0、1.5倍ED50量8%乳化异氟醚。各组均于注药后1 h处死大鼠,取其气管黏膜组织。从每个组收获的组织中检测β防御素BD-1、BD-2和促炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-8的mRNA表达水平。结果在腹腔注射乳化异氟醚的大鼠气管上皮组织中除BD-1和IL-8 mRNA无变化外,BD-2和促炎症因子TNF-α,IL-1βmRNA表达水平均增加,且随乳化异氟醚用量的增加而增强。结论本实验说明腹腔注射乳化异氟醚能在转录水平上调节大鼠气道上皮组织β防御素及一些促炎症因子mRNA的表达水平,且乳化异氟醚以剂量依赖的方式显著增加大鼠气道上皮细胞的β防御素BD-2以及这些促炎症因子mRNA的表达水平。
- 罗林邓璐霞黄宁朱涛
- 关键词：乳化异氟醚防御素
- 用于酵母双杂交的α-防御素HNP-1成熟肽重组诱饵载体的构建和鉴定
- 2007年
- 目的:构建和转化人α-防御素HNP-1成熟肽的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究其相互作用蛋白分子打下基础。方法:用RT-PCR扩增HNP-1成熟肽基因,将该基因片断与腺病毒载体pBluescript-SK-II定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;回收目的片断,将其连接入酵母表达载体pGBKT7,构建重组诱饵表达质粒pGBKT7-HNP-1,测序鉴定。缺陷培养方法检测重组诱饵载体有无毒性和自激活作用。结果序列分析表明HNP-1成熟肽重组诱饵表达质粒构建成功,重组诱饵表达质粒对酵母细胞无毒性作用,无自激活效应发生。结论构建用于酵母双杂交的α-防御素HNP-1成熟肽重组诱饵载体,为找出与人α-防御素HNP-1成熟肽相互作用蛋白分子打下了基础。
- 邓璐霞彭媛媛罗林冯云吴琦王伯瑶黄宁
- 关键词：Α-防御素成熟肽酵母双杂交
