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构建人肺鳞状细胞癌旁组织cDNA文库及筛选与HNP-1相互作用的阳性克隆: 彭媛媛

用于处理有机污染物的生物质石墨烯及其制备方法和应用: 本发明公开了用于处理有机污染物的生物质石墨烯及其制备方法和应用，是由以餐厨垃圾水解残渣为前驱体、熔融碳酸盐为活化剂和催化剂合成的，包括以下步骤：将餐厨垃圾水解残渣干燥、粉碎、过筛后与碳酸盐按一定比例混合；然后在惰性气体保...; 李盼禹张永奎彭媛媛

利用同源重组构建人肺鳞状细胞癌旁组织的酵母双杂交cDNA文库被引量：2: 2008年; 背景:酵母双杂交技术是目前应用最成功的研究蛋白质相互作用的技术平台。目的:运用SMART(switching mechanism at5′end of RNA transc-ript)技术构建人肺鳞状细胞癌旁组织的酵母双杂交cDNA文库。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-07/2007-01在四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学感染免疫实验室完成。材料:人肺鳞状细胞癌旁组织由四川大学华西医学中心附属第一医院胸外科提供。方法:运用SMART技术,以纯化的Poly(A)+RNA为模板,用Powerscript逆转录酶进行转录,并在mRNA的5’末端添加一段5’-oligo作为延伸后的模板,从而富集全长cDNA。纯化的双链cDNA与线性化pGADT7-Rec质粒载体共同转化酵母菌株感受态AH109,经胞内同源重组形成环状文库质粒。应用营养缺陷的方法在SD/-Leu平板上筛选并收集所有克隆从而获得酵母双杂交的人肺鳞状细胞癌旁组织cDNA文库。主要观察指标:采用琼脂糖凝胶电泳观察人肺鳞状细胞癌旁组织的cDNA文库构建结果,并进行文库容量及多态性鉴定。结果:①总RNA和mRNA纯度较好,比较完整。②双链cDNA文库大小介于0.5～3kb之间。③共获得1.2×106转化子,重组子不同插入片断大小在0.3～2kb之间,文库具有较好的多样性。结论:在酵母菌株AH109成功构建了用于酵母双杂交的人肺鳞状细胞癌旁组织cDNA文库。; 彭媛媛邓璐霞石艳娥赵媛陈军利王薇冯云吴琦王伯瑶黄宁; 关键词：SMART技术 CDNA文库同源重组酵母双杂交

人血红蛋白及其片段体内外抗菌活性研究被引量：11: 2008年; 目的分离人血红蛋白及其片段,进行体外抗菌活性分析和比较,并对血红蛋白体内抗菌活性进行初步探讨。方法利用阳离子交换及分子筛分离人血红蛋白α、β链;溴化氰法裂解α/β链,反相高效液相色谱技术纯化其片段;琼脂糖弥散法抑菌实验检测抗菌活性;构建大鼠大肠埃希菌阴道感染模型,设立实验组（血红蛋白组）和对照组,观察各组大鼠阴道组织形态学变化。结果体外抑菌实验示：血红蛋白、α/β链及其片段有抑菌作用,但其主要针对的是革兰阴性菌大肠埃希菌;而且除α1~32的抑菌作用较弱外,血红蛋白、α/β链及其片段三者抑菌活性比较,其效能基本相似。大鼠体内抗菌实验示：与基质对照组（感染后不治疗）比,血红蛋白组阴道复层扁平上皮表层较平滑,固有层内炎细胞浸润明显减少,且组织内充血明显减轻。结论人血红蛋白及其片段具有体外抑菌活性,而且血红蛋白在大鼠体内能减轻大肠埃希菌阴道感染炎症程度。; 周新娥欧阳运薇潘小玲何跃东李恒邓璐霞石艳娥彭媛媛赵媛黄宁; 关键词：人血红蛋白片段抑菌

兔胸腺HMGN2的分离纯化鉴定被引量：1: 2008年; 目的:分离纯化鉴定兔高迁移率非组蛋白N2(High mobility group chromosomal protein N2,HMGN2)。方法:利用液氮研磨和5%高氯酸从新鲜兔胸腺组织获得酸溶性萃取物,经反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离得到HMGN2,经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blotting对HMGN2进行分子量测定和特异性鉴定。并利用琼脂糖弥散抑菌实验对其杀菌活性进行鉴定。结果:利用上述方法分离纯化出高纯度的兔HMGN2。对大肠埃希菌临床分离株54080、大肠埃希菌ATCC25922有明显杀菌活性。结论:建立简单分离高纯度的HMGN2的方法。; 石艳娥李恒彭媛媛邓璐霞周新娥赵媛黄宁; 关键词：HMGN2

用于酵母双杂交的α-防御素HNP-1成熟肽重组诱饵载体的构建和鉴定: 2007年; 目的:构建和转化人α-防御素HNP-1成熟肽的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究其相互作用蛋白分子打下基础。方法:用RT-PCR扩增HNP-1成熟肽基因,将该基因片断与腺病毒载体pBluescript-SK-II定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;回收目的片断,将其连接入酵母表达载体pGBKT7,构建重组诱饵表达质粒pGBKT7-HNP-1,测序鉴定。缺陷培养方法检测重组诱饵载体有无毒性和自激活作用。结果序列分析表明HNP-1成熟肽重组诱饵表达质粒构建成功,重组诱饵表达质粒对酵母细胞无毒性作用,无自激活效应发生。结论构建用于酵母双杂交的α-防御素HNP-1成熟肽重组诱饵载体,为找出与人α-防御素HNP-1成熟肽相互作用蛋白分子打下了基础。; 邓璐霞彭媛媛罗林冯云吴琦王伯瑶黄宁; 关键词：Α-防御素成熟肽酵母双杂交

利用酵母生物质制备过渡金属磷化物/生物碳复合材料去除磺胺类药物的研究: 药物及个人护理品作为人类日常生活中使用较为频繁的化学产品在全球范围内的污染已经引起了世界各国的热切关注，其中尤以抗生素为甚。磺胺类药物作为一种常用的兽用和人用抗生素，部分没有被生物体完全吸收就会随着尿液和粪便排出，最终通...; 彭媛媛; 关键词：生物碳磺胺类药物光催化降解

防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测被引量：1: 2007年; 目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定。重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测。结果构建的重组质粒pBluescript-SK-II-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列。亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7-HNP-3,测序鉴定表明其插入目的基因序列无误。重组诱饵质粒自激活和毒性检测显示无自激活现象发生,对酵母细胞AH109无毒性作用。结论成功构建了防御素HNP-3成熟肽的酵母双杂交诱饵载体;为用酵母双杂交技术研究与防御素HNP-3成熟肽相互作用蛋白质打下了基础。; 马生秀邓璐霞罗林彭媛媛路会侠张敏熊文碧冯云吴琦王伯瑶黄宁; 关键词：防御素成熟肽酵母双杂交

用于处理有机污染物的生物质石墨烯及其制备方法和应用: 本发明公开了用于处理有机污染物的生物质石墨烯及其制备方法和应用，是由以餐厨垃圾水解残渣为前驱体、熔融碳酸盐为活化剂和催化剂合成的，包括以下步骤：将餐厨垃圾水解残渣干燥、粉碎、过筛后与碳酸盐按一定比例混合；然后在惰性气体保...; 李盼禹张永奎彭媛媛; 文献传递

一种利用面包酵母通过浸渍法制备磷化钴/碳复合材料的方法: 本发明公开了一种利用酵母细胞通过浸渍法制备磷化钴/碳复合材料的方法，该方法包含以下步骤：以面包酵母为原料，先活化细胞，把活化后的酵母通过丙酮洗涤和戊二醛固定，再冻干后与钴离子溶液混合研磨均匀，最后把干燥后的固体粉末在80...; 王雅博张永奎彭媛媛童文华; 文献传递

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