诰赵伟
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：西南大学生命科学学院三峡库区生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划重庆市科委基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 鸭肝丁酰胆碱酯酶的纯化与酶学性质研究被引量：4
- 2011年
- 目的:获得鸭肝丁酰胆碱酯酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法:采用丙酮脱脂、酸沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝丁酰胆碱酯酶;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子量测定。结果:从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的丁酰胆碱酯酶,纯化倍数为156.45倍,酶活回收率为23.60%,比活达17.21U/mg。酶相对分子量为388.85kDa,亚基相对分子量为64.70kDa。推测该酶由六个相同亚基构成。该酶最大紫外吸收为278nm。酶催化碘化硫代丁酰胆碱水解的最适pH为8.0,最适温度为35℃。该酶在pH3.0～10.0区域较稳定;在40℃以下处理1h,酶活力保持稳定。Zn2+、Mn2+和Cu2+对该酶具有显著的抑制作用。以碘化丁酰硫代胆碱为底物,测定该酶的表观Km为71.15μmol/L,没有过量底物抑制现象。结论:成功分离纯化获得丁酰胆碱酯酶,该酶具有较好的酸碱耐受性。
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- 关键词：鸭肝丁酰胆碱酯酶分离纯化
- 鸭肝谷氨酸脱氢酶的纯化与酶学性质研究被引量：5
- 2010年
- 目的:获得鸭肝谷氨酸脱氢酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法:采用丙酮脱脂、重金属离子沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和SephacrylS-200凝胶层析方法,分离纯化鸭肝谷氨酸脱氢酶,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子质量测定。结果:从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的谷氨酸脱氢酶,纯化倍数为60.93倍,酶活力回收率为11.02%,比活力达24.37U/mg。酶相对分子质量为371.41,亚基相对分子质量为61.60。推测该酶由6个相同亚基构成。该酶对NADH的Km为53.19μmol/L,最适pH值为10.0,最适反应温度为35℃。该酶在pH8.0左右较稳定;在40℃以下酶活力保持稳定。Zn2+、Li+和Cu2+对该酶具有显著的抑制作用。结论:分离纯化获得谷氨酸脱氢酶,该酶具有较高应用价值。
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- 关键词：鸭肝谷氨酸脱氢酶分离纯化
