费菲
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国农业大学农学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学医药卫生更多>>
- 葡萄MYC转录因子、多磷酸肌醇-5-磷酸酶Ⅰ和乌头酸酶基因的克隆和序列分析
- 葡萄卷叶相关病毒2号(Grapevine leafroll-associated virus2,GLRaV-2)为长线形病毒科(Closteroviridae)长线形病毒属(Closterovirus)成员,是侵染葡萄作...
- 费菲刘命华王萌程玉琴范在丰
- 关键词：乌头酸酶基因克隆
- 用酵母双杂交筛选与南瓜蚜传黄化病毒MP互作的寄主因子被引量：4
- 2010年
- 植物病毒编码的移动蛋白(movement protein,MP)介导病毒在寄主体内的移动,研究其与寄主间的分子互作有助于揭示病毒侵染过程中的分子机制。将南瓜蚜传黄化病毒Cucurbit aphid-borne yellows virus(CABYV)MP基因定向克隆到含有DNA结合功能域(DNA-binding domain,BD)载体上,并构建与激活功能域(activation domain,AD)融合表达的西瓜茎叶cDNA文库,然后用MP为诱饵筛选文库寻找与其互作的寄主因子。结果表明,诱饵质粒插入的MP基因可读框和氨基酸序列均正确,对酵母菌株AH109和Y187没有自主激活能力;文库滴度为2.94×106CFU/mL,且大多数插入片段在700bp以上,质量符合筛选要求;经过筛选和共转化回转验证,有48个候选阳性克隆与MP在酵母中互作。测序得到这些克隆的cDNA序列,BLAST分析结果表明,这些克隆共编码12种蛋白。
- 陈小慧费菲向海英韩成贵程玉琴
- 关键词：CDNA文库酵母双杂交筛选西瓜
- 中国北京、河北地区葡萄卷叶伴随病毒种类调查及其分子变异研究
- 由葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associa ted virus,GLRaV)引起的葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease,GLD)是葡萄上发生最为普遍、为害最为严重...
- 刘命华王克双费菲程玉琴范在丰
- 关键词：葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR分子变异
- 葡萄卷叶伴随病毒2号和3号辽宁分离物部分基因组的序列分析被引量：8
- 2009年
- 将采自辽宁兴城地区在生长期间具典型卷叶病症状的金星无核（Venus Seedless）葡萄品种休眠枝条,用RT-PCR检测4种葡萄卷叶伴随病毒（Grapevine leafroll-associated viruses,GLRaVs）,扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒2号（GLRaV-2）和葡萄卷叶伴随病毒3号（GLRaV-3）两种病毒的主要外壳蛋白（major coat protein,CP）基因的完整序列（GenBank登录号分别为FJ786017和FJ786016）。这表明该葡萄植株受到了GLRaV-2和GLRaV-3辽宁分离物（GLRaV-2-LN和GLRaV-3-LN）的复合侵染。根据检测结果,克隆了GLRaV-2-LN基因组3′端CPm（minor capsid protein）、p19（19-kDa protein）和p24（24-kDa protein）基因（GenBank登录号分别为FJ786018、FJ786019和FJ786018）。序列分析表明,GLRaV-3-LN的CP基因全长942 nt,与已报道的国内外其它分离物CP基因全序列相比,核苷酸序列同源性为89.8%~91.8%,由此推导的氨基酸序列同源性为94.9%~97.4%。GLRaV-2-LN的CP、CPm、p19和p24基因全长分别为597 nt、672 nt、486 nt和618 nt。与国外报道的几个分离物的相应蛋白基因全序列相比,核苷酸序列同源性分别为88.3%~100.0%、78.7%~99.9%、75.1%~99.4%和87.5%~99.5%;由此推导的氨基酸序列同源性分别为92.9%~100.0%、89.2%~100.0%、73.9%~99.4%和89.3%~99.0%。
- 王萌费菲周涛程玉琴范在丰
- 关键词：葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR克隆
- 中国北京、河北地区葡萄卷叶伴随病毒种类调查及其分子变异研究
- 由葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV)引起的葡萄卷叶病(Grapevine leafroll di sease,GLD)是葡萄上发生最为普遍、为害最为严重...
- 刘命华王克双费菲程玉琴范在丰
- 关键词：葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR分子变异
- 文献传递
- 利用酵母双杂交研究葡萄卷叶伴随病毒2号p24与寄主互作的初步结果被引量：1
- 2011年
- 葡萄卷叶病（Grapevine leafroll disease，GLRD）是一种世界性病毒病害，严重影响葡萄生产和葡萄酒产业。至今已报道11种具不同血清学关系的葡萄卷叶伴随病毒（Grapevine leafroll—associated virus，GLRaV）均可引起葡萄卷叶症状，其中GLRaV-2为长线形病毒属（Closterovirus）成员。
- 费菲刘命华周涛范在丰程玉琴
- 关键词：葡萄卷叶病病毒病害酵母双杂交P24寄主
- 葡萄卷叶伴随病毒3号外壳蛋白基因的原核表达和抗血清制备
- 利用特异性引物扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒3号(Grapevine leafroll-associated virus3,GLRaV-3)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并将其定向克隆到原核表达载体pET...
- 费菲王克双吕睦廸李捷程玉琴
- 葡萄卷叶伴随病毒3号抗血清的制备及应用被引量：2
- 2012年
- 为获得特异性抗血清用于批量检测葡萄苗木中的葡萄卷叶伴随病毒3号(Grapevine leafroll associatedvirus 3,GLRaV-3),本研究用含有GLRaV-3CP蛋白基因的载体pMD18-CP为模板,PCR扩增CP蛋白基因。将PCR产物定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选得到阳性克隆pET-G3CP。用终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析显示,GLRaV-3CP在大肠杆菌中得到高效表达。纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。经分析,抗血清效价为1/214,试验结果显示,此抗血清能用于葡萄植株样品中GLRaV-3不同分离物检测。
- 王克双费菲吕睦頔李捷程玉琴
- 关键词：WESTERNBLOT分离物
