王克双
- 作品数:8 被引量:5H指数:2
- 供职机构:中国农业大学更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学理学医药卫生更多>>
- 葡萄卷叶伴随病毒1号河北和辽宁分离物CP基因序列分析被引量:4
- 2012年
- 为获得葡萄卷叶伴随病毒1号(Grapevine leafroll-associated virus 1,GLRaV-1)中国分离物的分子信息,提高其检测可靠性,本研究从河北怀来和辽宁兴城地区带有明显卷叶症状的葡萄样品中提取的叶柄韧皮部总RNA,采用RT-PCR克隆了GLRaV-1的河北(GLRaV-1-HB)和辽宁分离物(GLRaV-1-LN)的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因,并进行了序列分析。结果表明:GLRaV-1-HB和GLRaV-1-LN的CP基因核苷酸同源性为90.7%,由此推导的氨基酸同源性为93.8%;与已报道的国外3个GLRaV-1分离物的CP基因全序列相比,其核苷酸与氨基酸序列同源性分别为90.0%~96.0%和92.9%~97.5%。以CP基因序列构建的进化树表明,现有的5个分离物可分为3组,其中本研究得到的GLRaV-1-HB和GLRaV-1-LN,分别与巴西分离物(GLRaV-1-PS,GenBank登录号为GQ332536.1)和伊朗分离物(GLRaV-1-IR-S7,FJ952151.2)为一组;澳大利亚分离物(GLRaV-1-AUS,AF195822.1)单独为一组。
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- 关键词:葡萄卷叶病RT-PCR进化树
- 中国北京、河北地区葡萄卷叶伴随病毒种类调查及其分子变异研究
- 由葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV)引起的葡萄卷叶病(Grapevine leafroll di sease,GLD)是葡萄上发生最为普遍、为害最为严重...
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- 关键词:葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR分子变异
- 文献传递
- 玉米铁氧还蛋白的新用途
- 本发明公开了玉米铁氧还蛋白的新用途。本发明所提供的新用途为铁氧还蛋白V在制备抑制花叶病毒复制的产品中的应用、序列表中序列1所示的蛋白的编码基因在制备抑制花叶病毒复制的产品中的应用、以及含有序列表中序列1所示蛋白的编码基因...
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- 文献传递
- 两种铁氧还蛋白在病毒侵染过程中的功能研究
- 王克双
- 中国北京、河北地区葡萄卷叶伴随病毒种类调查及其分子变异研究
- 由葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associa ted virus,GLRaV)引起的葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease,GLD)是葡萄上发生最为普遍、为害最为严重...
- 刘命华王克双费菲程玉琴范在丰
- 关键词:葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR分子变异
- 葡萄卷叶伴随病毒3号外壳蛋白基因的原核表达和抗血清制备
- 利用特异性引物扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒3号(Grapevine leafroll-associated virus3,GLRaV-3)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并将其定向克隆到原核表达载体pET...
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- 葡萄卷叶伴随病毒3号抗血清的制备及应用被引量:2
- 2012年
- 为获得特异性抗血清用于批量检测葡萄苗木中的葡萄卷叶伴随病毒3号(Grapevine leafroll associatedvirus 3,GLRaV-3),本研究用含有GLRaV-3CP蛋白基因的载体pMD18-CP为模板,PCR扩增CP蛋白基因。将PCR产物定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选得到阳性克隆pET-G3CP。用终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析显示,GLRaV-3CP在大肠杆菌中得到高效表达。纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。经分析,抗血清效价为1/214,试验结果显示,此抗血清能用于葡萄植株样品中GLRaV-3不同分离物检测。
- 王克双费菲吕睦頔李捷程玉琴
- 关键词:WESTERNBLOT分离物
- 玉米铁氧还蛋白的新用途
- 本发明公开了玉米铁氧还蛋白的新用途。本发明所提供的新用途为铁氧还蛋白V在制备抑制花叶病毒复制的产品中的应用、序列表中序列1所示的蛋白的编码基因在制备抑制花叶病毒复制的产品中的应用、以及含有序列表中序列1所示蛋白的编码基因...
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