孙庆梅
- 作品数：2 被引量：14H指数：1
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰PRMT5表达肝癌细胞稳转细胞株的建立及鉴定
- 2017年
- 目的探讨干扰蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)表达肝癌细胞稳转细胞株的建立及鉴定。方法针对PRMT5设计出该基因的有效短发夹RNA(shRNA)片段,选择合适慢病毒载体,通过基因工程技术,构建出PRMT5慢病毒载体介导的shRNA重组载体,并通过PCR以及测序检测构建序列的正确性。将重组病毒载体在病毒包装细胞中大量生产后,用病毒原液感染PRMT5表达量相对较高的SMMC-7721、BEL-7402细胞,2 d后,用最低杀死浓度的嘌呤霉素进行筛选,得到克隆样生长的细胞,扩大培养后分别提取蛋白和RNA,Western印迹和q PCR检测PRMT5的表达。结果成功构建出由人源性PRMT5慢病毒载体介导的shRNA重组载体p LKO.1-sh-PRMT5,PCR及测序均证明构建序列的正确。Western印迹法和q PCR检测,p LKO.1-sh-PRMT5干扰组的PRMT5蛋白及mRNA水平明显低于p LKO.1-sh-GFP组(P<0.05),p LKO.1-sh-PRMT5载体具有良好的干扰效果。结论运用慢病毒感染并筛选出稳转细胞株,在干扰效率及经济角度均优越于瞬时转染,为今后研究PRMT5在肝癌细胞中作用功能提供了良好的科研工具。
- 季云李小琴赵婷玲孙庆梅严凌花李莉
- 关键词：RNA小分子干扰慢病毒属载体蛋白质类
- B超引导改良塞丁格PICC置管技术应用于乳腺癌患者化疗的体会被引量：14
- 2016年
- 目的 探讨B超引导下改良塞丁格技术行PICC置管应用于乳腺癌化疗患者的临床效果。方法 收集我科2013年11月-2015年5月需长期静脉输液化疗且外周血管条件差的98例乳腺癌患者的临床资料,经B超引导下改良塞丁格技术置入巴德单腔三向瓣膜式PICC导管。结果 置管成功率100%,其中1针成功92例,2-3针成功6例,有8例轻微并发症发生。结论 采用B超引导下改良塞丁格技术进行PICC置管操作方便,穿刺成功率高,减少了机械性静脉炎的发生,为乳腺癌患者术后化疗用药提供了一条安全方便的输液途径。
- 季云赵婷玲孙庆梅严凌花孙丽娟
- 关键词：超声引导改良塞丁格技术乳腺癌化疗
