胡灿
- 作品数：14 被引量：63H指数：5
- 供职机构：广州中医药大学脾胃研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教委E研究院-上海高校网格项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 黄芪和白术提取物对IEC-6细胞迁移过程多胺介导钾通道激活信号通路作用的研究
- 目的:细胞迁移是胃肠黏膜损伤修复的重要环节,胃肠黏膜修复是益气健脾中药的重要作用机理之一。本实验观察黄芪和白术提取物(糖复合物)对小肠上皮细胞(IEC-6)细胞迁移过程多胺介导钾通道激活信号通路的作用。
- 胡灿李茹柳随晶晶温鹏刘佳陈蔚文
- 文献传递
- IEC-6细胞迁移实验影响因素的研究
- 肠上皮细胞迁移是肠粘膜正常生长和修复过程的重要环节,本实验观察细胞种植密度、细胞迁移时间、Matrigel基质、细胞迁移抑制剂、培养液血清、受试药等因素对肠上皮细胞(IEC-6,新生正常大鼠小肠隐窝细胞)迁移的影响。方法...
- 胡灿李茹柳王静徐颂芬陈蔚文
- 关键词：小肠上皮细胞细胞迁移
- 文献传递
- RPS20 miRNA质粒载体的CT26细胞转染条件优化研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨阳离子脂质体法转染CT26细胞适宜的转染条件,为小鼠体内以RNA干扰法进行脾虚证相关基因RPS20的功能鉴定提供参考。方法以6孔培养板培养CT26细胞,利用阳离子脂质体转染pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-neg Control plasmid进入CT26细胞,荧光显微镜、流式细胞仪两种方式观察不同剂量的质粒和转染试剂对转染效率的影响。结果荧光显微镜下细胞计数法检测转染效率,4.0μg和6.0μg质粒的转染效率无明显差异;流式细胞仪检测转染效率,以Lipofectamine2000 15.0μL+质粒4μg转染效率最高,平均为25.3%。结论 6孔培养板,4.0μg质粒+15.0 μL Lipofectamine2000为CT26细胞优化的转染条件。
- 高小玲李茹柳郭文峰徐颂芬胡灿陈蔚文
- 关键词：RNA干扰
- 人参皂苷Rg1对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响被引量：1
- 2011年
- 【目的】观察人参皂苷Rg1对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽化合物的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。【方法】Caco-2细胞长满瓶底后继续培养28 d,然后给予人参皂苷Rg1(终浓度为50 mmol/L)处理,并设立空白对照组及cAMP抑制剂(Rp-8-Br-cAMP)对照组,采用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞对二肽化合物Glycyl-Sarcosine的转运能力,采用Western blot法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。【结果】人参皂苷Rg1处理组Caco-2细胞15、30、60、120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量均显著高于空白对照组对应时点的量(P<0.05或P<0.01),人参皂苷Rg1与Rp-8-Br-cAMP合用组15、30、60、120 min时点均显著低于相应时点单用人参皂苷Rg1组(P<0.05或P<0.01),人参皂苷Rg1处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达显著增加(P<0.05);荧光定量PCR结果显示:人参皂苷Rg1能显著下调SLC15A1表达(P<0.05)。【结论】人参皂苷Rg1具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与其促进胞浆中PepT1蛋白嵌入胞膜中发挥转运二肽的功能有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰胡灿温鹏高小玲李茹柳陈蔚文
- 关键词：基因表达调控转运功能细胞培养
- 理中汤、人参皂苷Rg1、6-姜酚对Caco-2细胞PepT1转运功能影响的比较被引量：2
- 2011年
- 目的:观察比较理中汤、人参皂苷Rg1、6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28d后分别给予理中汤、人参皂苷Rg1、6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用westernblot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:理中汤、人参皂苷Rg1及6-姜酚均在不同程度上表现为促进Caco-2细胞转运Glycyl-Sarcosine的作用;Caco-2细胞经理中汤/人参皂苷Rg1/6-姜酚处理24h后,细胞膜PepT1蛋白表达水平均明显增高。6-姜酚能明显上调Caco-2细胞SLC15A1表达,人参皂苷对Caco-2细胞SLC15A1表达的作用表现为下调,理中汤对Caco-2细胞SLC15A1表达作用不明显。且理中汤、人参皂苷Rg1、6-姜酚三者作用各有特点。结论:理中汤及其成分人参皂苷Rg1、6-姜酚具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰胡灿刘佳高小玲陈蔚文
- 关键词：理中汤人参皂苷RG16-姜酚环磷酸腺苷
- 高效液相色谱法检测小肠上皮细胞多胺含量被引量：9
- 2011年
- 目的建立检测小肠上皮细胞(IEC-6)多胺含量的方法,为病理生理及药理研究中检测该细胞多胺含量提供参考。方法采用苯甲酰氯柱前衍生反相高效液相色谱法,以多胺(腐胺、精脒和精胺)含量为指标,苯甲酰氯为衍生化试剂,采用ODS-C18柱,考察和优化衍生化条件以及色谱条件。结果当衍生温度为50℃,衍生时间为8 h时,各指标成分的峰面积均较大;在柱温为25℃、流动相为甲醇∶水(55∶45)、流速1.0 ml.min-1、检测波长234 nm的条件下,各指标成分峰分离良好。线性范围:腐胺0.054～1.35 nmol,精脒0.046～1.15 nmol,精胺0.080～2.00 nmol,r2≥0.9995;高、中、低浓度的日内精密度:腐胺RSD 1.5%～3.2%,精脒RSD 1.2%～4.5%,精胺RSD 1.3%～4.1%;日间精密度:腐胺RSD 1.2%～2.7%,精脒RSD 1.0%～3.5%,精胺RSD0.8%～3.9%;高、中、低浓度的回收率:腐胺85%～110%,精脒88%～110%,精胺90%～108%。结论建立的苯甲酰氯柱前衍生高效液相色谱法适用于小肠上皮细胞中多胺含量的测定。
- 随晶晶卢文彪李茹柳温鹏胡灿赵世清陈蔚文
- 关键词：多胺柱前衍生小肠上皮细胞
- 黄芪和白术提取物对IEC-6细胞迁移过程多胺介导钾通道激活信号通路作用的研究
- 胡灿李茹柳随晶晶温鹏刘佳陈蔚文
- 理中汤对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:观察理中汤对Caco-2细胞肽转运载体(PepT1)转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予理中汤处理,并设立空白及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,用Western blot法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:理中汤处理组Caco-2细胞15,30,60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(4.52±0.57),(6.34±0.57),(7.29±0.64),(8.23±0.67)μmol/孔,高于空白对照组(P<0.05),后者分别为(2.42±0.68),(3.15±0.76),(5.62±0.20),(6.54±0.54)μmol/孔;理中汤与Rp-8-Br-cAMP合用组15,30,120 min时点分别为(2.68±0.46),(4.13±0.46),(6.73±0.43)μmol/孔,明显低于相应时点单用理中汤组(P<0.05);理中汤处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值理中汤组为(0.326±0.031),高于空白对照组(0.220±0.019)(P<0.01);理中汤对Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达未见明显作用,但与cAMP抑制剂合用,理中汤能逆转Rp-8-Br-cAMP下调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达的作用。结论:理中汤具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与其促进胞浆中PepT1蛋白嵌入胞膜中发挥转运二肽的功能有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰杨伟鹏王怡薇王彦礼胡灿温鹏高小玲陈蔚文
- 关键词：理中汤转运功能环磷酸腺苷
- IEC-6细胞迁移药理实验模型建立的研究(英文)被引量：10
- 2011年
- 建立适合肠上皮整复研究的IEC-6细胞迁移药理实验模型,并观察黄芪糖复合物对细胞迁移的影响。方法：设立不同的细胞接种密度、划痕后观察时间、辅助材料Matrigel浓度、血清饥饿处理法、细胞迁移抑制剂DF-MO（二氟甲基鸟氨酸）浓度等以考察模型的建立条件,并在已建立的模型上观察受试药的效果。结果：①细胞宜以4×105/mL接种6孔板;②宜划痕后24 h观察细胞迁移数;③5%Matrigel为适宜浓度;④血清饥饿可造成细胞迁移数明显减少,应使用含血清的培养液。⑤DFMO 2.5~5 mmol/L为抑制细胞迁移适宜浓度。⑥黄芪糖复合物及阳性药精脒能促进细胞迁移。结论：建立了适宜药理实验的IEC-6细胞迁移模型,在此模型上可反映受试药对细胞正常迁移及迁移抑制的药效作用。
- 胡灿李茹柳卢文彪羊燕群王静陈蔚文
- 关键词：IEC-6胃肠黏膜损伤细胞迁移
- 6-姜酚对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响
- 2011年
- 目的:观察6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用Western blot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:6-姜酚处理组Caco-2细胞60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(6.84±0.46),(8.61±0.54)μmol/孔,高于正常对照组(P<0.05),后者分别为(5.62±0.20)、(6.54±0.54)μmol/孔;6-姜酚与Rp-8-Br-cAMP合用组120 min时点为(6.92±0.67)μmol/孔,明显低于相应时点单用6-姜酚组(P<0.05);6-姜酚处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值6-姜酚组为(0.317±0.022),高于空白对照组(0.220±0.019)(P<0.01);荧光定量PCR结果,6-姜酚能上调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达,但与cAMP抑制剂合用后该抑制作用被阻断。结论:6-姜酚具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与上调PepT1蛋白及mRNA表达有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。
- 郭文峰杨伟鹏王怡薇王彦礼胡灿温鹏高小玲陈蔚文
- 关键词：6-姜酚转运功能环磷酸腺苷
