马鹏飞 作品数:4 被引量:21 H指数:2 供职机构: 第四军医大学西京医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省科学技术研究发展计划项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Notch信号通路与肝脏发育及肝脏疾病关系的研究进展 被引量:2 2013年 Notch基因最早于果蝇体内发现,因其部分功能缺失会导致果蝇翅缘缺刻(Notch)而得名。20世纪80年代中期,Artavanis Tsakonas首次克隆了该基因,发现其编码一类单次跨膜蛋白,即Notch受体。随后发现,从无脊椎动物到脊椎动物多个物种中Notch基因均有表达,其家族成员的结构高度保守。Notch信号通路几乎涉及所有细胞的增殖和分化活动,在调节细胞分化、增殖、凋亡等一系列生理、病理过程中都起重要作用。Notch信号通路在肝脏发育和肝脏疾病的发生、发展中有重要的调控作用,本文就近年来的研究进展做一综述。 马鹏飞 于恒超 王德盛 窦科峰关键词:肝疾病 NOTCH信号通路 黄芪甲苷对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制研究 被引量:17 2014年 目的:研究黄芪甲苷对肝癌细胞系MHCC97-H增殖和侵袭能力的影响。方法:MTT法检测5、10、20、40、80、100μg/ml不同终浓度和24、48、72h作用时间下黄芪甲苷对MHCC97-H细胞增殖的影响。Transwell侵袭实验检测100μg/ml黄芪甲苷处理48小时对MHCC97-H细胞侵袭能力的影响。选择100μg/ml黄芪甲苷处理48小时作为处理条件,实时定量PCR、Western blot检测黄芪甲苷处理后MHCC97-H细胞MMP-2、9 mRNA和蛋白质表达水平的变化,明胶酶谱法检测黄芪甲苷处理后MHCC97-H细胞培养上清中MMP-2、9分泌水平的变化。结果:各浓度和作用时间下黄芪甲苷对MHCC97-H细胞增殖均无明显抑制作用。100μg/ml黄芪甲苷处理48小时后,MHCC97-H细胞侵袭能力降低,MMP-2、9分子mRNA和蛋白质表达水平均下降,且细胞培养上清中分泌的MMP-2、9减少。结论:体外黄芪甲苷对MHCC97-H细胞增殖无明显抑制作用,但黄芪甲苷可以通过降低MHCC97-H细胞MMP-2、9分子的表达起到降低其细胞侵袭能力的作用。 马鹏飞 阮柏 王德盛 窦科峰关键词:黄芪甲苷 肝癌 增殖 γ分泌酶抑制剂对肝血窦内皮细胞的影响 被引量:1 2013年 目的:在建立高纯度小鼠肝血窦内皮细胞的体外培养的基础上研究γ分泌酶抑制剂(DAPT)对肝血窦内皮细胞活性的影响。方法:首先通过胶原酶灌注消化、percoll梯度离心和选择性贴壁分离得到高纯度、可在体外条件下培养的肝血窦内皮细胞,其次用不同浓度的DAPT(15μmol/L、45μmol/L、75μmol/L)处理细胞,然后通过MTT检测细胞增殖情况、Real time PCR检测相关分子改变。结果:在体外条件下DAPT对肝血窦内皮细胞的增殖起到促进作用,这种促进作用随着DAPT浓度的增加相应的增加;DAPT能够导致肝血窦内皮细胞Notch信号下游分子Hes1表达下调,VEGF信号中VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调。结论:γ分泌酶抑制剂(DAPT)通过抑制肝血窦内皮细胞Notch信号,引起肝血窦内皮细胞表面VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调显著增加肝血窦内皮细胞的活性。 金超 任凯夕 晏贤春 马鹏飞 郭丰成 窦科峰关键词:DAPT NOTCH信号 Notch配体的原核表达与纯化及其对四氯化碳损伤后造血的影响 被引量:1 2018年 目的:通过原核表达并纯化靶向内皮细胞的小鼠Notch重组配体m D1R蛋白,观察其对四氯化碳损伤后造血的影响。方法:PCR克隆并构建p ET22b(+)-m D1R表达载体,转化大肠杆菌,IPTG诱导,镍珠亲合层析纯化,SDS-PAGE确认目的蛋白表达。应用流式细胞术、细胞粘附实验、免疫荧光染色及实时定量RT-PCR检测蛋白的内皮靶向性和Notch激活程度。建立四氯化碳损伤小鼠模型,应用流式细胞术观察m D1R蛋白对造血干细胞(HSC)、髓系和淋系细胞的影响,应用磁珠分选Lin^-Scal-1^+c-Kit^+细胞并分析细胞周期的变化,RT-PCR检测IL-10的表达。结果:成功克隆并构建原核表达载体,获得高纯度且有生物学活性的m D1R重组蛋白。m D1R能激活四氯化碳损伤小鼠造血干/祖细胞的Notch信号途径,内源性扩增HSC和长期HSC达2.96倍和6.18倍,促进了髓系祖细胞及髓源性抑制细胞的自体扩增,尤其有利于粒/单核细胞进入血液循环,其具体机制可能与Notch信号促进应激损伤后造血干细胞增殖和上调IL-10表达有关。结论:成功构建了连接造血干细胞和造血微环境的新型Notch配体活性蛋白,证实Notch信号途径可能通过促抗炎因子表达,实现应激损伤后自体造血动员。 陈娟娟 黄斯勇 马鹏飞 吴必嘉 周思朗 赵永星 龚峻梅 梁英民关键词:NOTCH信号途径 应激损伤