刘军
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛源材料中BVDV检测方法的验证及应用被引量：2
- 2016年
- 目的对生物制品生产过程中使用的牛源材料(牛血清、牛源细胞等)进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)检测以保证制品的生物安全性。方法参照制药质量体系Q10(ICH Q10)对杂质的定性检测要求,采用一步法RT-PCR检测BVDV的5'-UTR保守区,并对其特异性、敏感性和重复性进行验证,然后将其应用于牛源材料中BVDV的检测。结果扩增产物为250 bp的目的片段,测序后经序列比对分析软件BLAST比对,同源性达99%,且与其他5种牛源病毒均无相关性;敏感度达1CCID50/m L。应用该方法对牛血清、牛鼻甲骨细胞(BT)、牛肾原代细胞、MDBK细胞等样品进行检测,15份为阳性,阳性检出率为12%。结论一步法RT-PCR检测BVDV,特异性强、重复性好、敏感性高,可用于牛源材料中BVDV的快速检测。
- 郭敏鱼轲刘军刘艳魏至栋
- 关键词：生物制品牛病毒性腹泻病毒一步法RT-PCR
