杨继山
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：'泰山学者'建设工程专项青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪精子结合和内化外源基因的影响因素研究被引量：3
- 2009年
- 精子介导基因转移（SMGT）是目前转基因动物研究中简单而高效的方法之一，其中精子结合和内化外源基因的效率是精子介导转基因成功的关键。本试验以DIG标记的线性化EGFP作为示踪基因来检测猪精子结合和内化外源基因的影响因素，结果表明：猪精子能够自发结合外源基因，结合部位主要在精子顶体后区。精子结合外源DNA的阳性率随共孵育时间延长而增加，在37℃或39℃时孵育60min后，阳性率不再增加；在17℃时孵育90min后，阳性率不再增加。在检查的15只公猪样本中，精子与外源DNA的结合率为6．57％～35．81％，内化率为2．99%～24．66％，个体间差异显著（P〈0．01）。精浆能够强烈抑制外源基因的结合和内化，脂质体及DMSO能够显著提高转染效率。死精子能够结合外源基因，但不能将其内化；反复冻融导致质膜破裂的精子对外源基因有更高的结合率，且不受个体影响。
- 杜欢杨继山翟向玮孙理兰柳丽华沈伟闵令江潘庆杰
- 关键词：精子外源基因
- 抗凝血酶Ⅲ转基因山羊遗传稳定性的检测
- 本试验以ATⅢ转基因原代山羊及杂交产生的后代组成的转基因山羊核心群为研究对象，以ATⅢ基因(AntithrombinⅢ，ATⅢ)作为检测的目的基因，利用PCR技术、定量PCR技术、ELISA技术对转基因山羊核心群ATⅢ基...
- 杨继山
- 关键词：转基因山羊基因拷贝数蛋白表达量
- 转基因动物检测方法的研究进展被引量：8
- 2010年
- 转基因动物检测方法随着转基因产品的逐步产业化而受到越来越多的关注。对转基因动物的检测分别从DNA、转录、翻译和整体表型的水平进行了综述,讨论了目前检测方法中存在的问题,对未来检测技术的发展前景进行了展望。
- 杨继山潘庆杰董晓
- 关键词：转基因动物
- 抗凝血酶Ⅲ转基因山羊外源基因拷贝数及其蛋白表达量的测定被引量：4
- 2010年
- 目的:检测抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)转基因山羊外源基因的拷贝数及ATⅢ蛋白的表达量,分析拷贝数与蛋白表达量的相关性。方法:用Primer 5.0软件设计外源基因ATⅢ及山羊管家基因GAPDH的引物,以倍比稀释的标准品进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,通过标准曲线计算外源基因拷贝数;通过酶显色底物法检测ATⅢ蛋白的含量。结果:依据ATⅢ和GAPDH基因标准曲线方程计算得到的山羊个体间外源基因的拷贝数相差很大,最少的为5,最多为25,且不同转基因山羊间ATⅢ表达水平的差别达10倍以上。结论:外源基因表达水平在受到拷贝数的影响外,也受到整合位点等其他因素的重要影响。
- 杨继山董晓潘庆杰
- 关键词：基因拷贝数蛋白表达量转基因山羊
- 抗凝血酶III转基因山羊遗传稳定性的检测
- 杨继山
- 关键词：转基因山羊抗凝血酶III基因拷贝数蛋白表达量
