孙理兰
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金青岛市科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪精子结合和内化外源基因的影响因素研究被引量：3
- 2009年
- 精子介导基因转移（SMGT）是目前转基因动物研究中简单而高效的方法之一，其中精子结合和内化外源基因的效率是精子介导转基因成功的关键。本试验以DIG标记的线性化EGFP作为示踪基因来检测猪精子结合和内化外源基因的影响因素，结果表明：猪精子能够自发结合外源基因，结合部位主要在精子顶体后区。精子结合外源DNA的阳性率随共孵育时间延长而增加，在37℃或39℃时孵育60min后，阳性率不再增加；在17℃时孵育90min后，阳性率不再增加。在检查的15只公猪样本中，精子与外源DNA的结合率为6．57％～35．81％，内化率为2．99%～24．66％，个体间差异显著（P〈0．01）。精浆能够强烈抑制外源基因的结合和内化，脂质体及DMSO能够显著提高转染效率。死精子能够结合外源基因，但不能将其内化；反复冻融导致质膜破裂的精子对外源基因有更高的结合率，且不受个体影响。
- 杜欢杨继山翟向玮孙理兰柳丽华沈伟闵令江潘庆杰
- 关键词：精子外源基因
- 精子介导GFP基因在小鼠早期胚胎中的表达被引量：4
- 2007年
- 利用DIG末端标记技术和免疫组化技术分析了小鼠精子体外结合内化外源DNA的效率。试验结果表明,不同小鼠个体的精子结合外源DNA的阳性率有明显差异(P<0.01),平均为13%。利用考马斯亮蓝染色评价了小鼠精子顶体反应发生的情况,筛选出TYH培养液为较合适的体外受精液。利用小鼠体外受精技术,将体外转染GFP基因并获能的小鼠精子与成熟卵母细胞进行体外受精,受精卵进行体外培养,表达GFP胚胎的阳性率为4.7%。验证了精子介导制备转基因小鼠胚胎的可行性,并建立了利用精子载体法制备转基因小鼠胚胎的平台。
- 董焕声房勇卫李兰李晓林孙理兰翟向玮潘庆杰沈伟
- 关键词：转基因动物体外受精
- 一种人皮肤干细胞体外向原始生殖细胞分化的技术方法
- 本发明涉及一种人皮肤干细胞体外向原始生殖细胞分化的技术方法，利用机械法分离人皮肤干细胞，体外培养人皮肤干细胞，利用人皮肤干细胞体外形成拟胚体的方法进行分化，分化后用骨形态发生蛋白-4、干细胞生长因子、表皮生长因子、碱性成...
- 陈春雷马华刚程顺峰孙理兰沈伟
- 家兔原始卵泡卵母细胞体外发育的培养体系研究
- 2009年
- 本研究根据家兔卵巢的发育特征初步探讨了家兔卵巢卵母细胞体外发育的培养体系。采集新生或30日龄家兔卵巢在不同培养液中培养,并分析家兔卵母细胞的体外发生与成熟情况与体内正常发育的兔卵巢卵母细胞之间的差异,来筛选和优化家兔卵巢卵母细胞的体外培养体系。本试验从高糖DMEM、FSH浓度、BSA/血清等3个方面来筛选较好的培养条件,结果表明:①不添加高糖DMEM的M199培养液与添加的相比,卵巢上卵母细胞数量要多,但随着培养时间的延长,组织块上卵母细胞的形态会变得不清楚;②家兔卵巢组织在FSH浓度为50和100m IU/m l、添加血清的DMEM/F12培养液中生长较好,体外培养24d后,卵母细胞数量多,直径增加到65μm;③与添加BSA的培养液相比,添加血清的培养液中的卵巢卵母细胞生长状态较好,体外培养28d后,卵母细胞数量多,并且直径可达65μm。
- 翟向玮孙理兰张攀潘庆杰沈伟
- 关键词：家兔卵巢原始卵泡体外培养
- 原始卵泡形成与早期卵泡发育的遗传调控被引量：9
- 2008年
- 原始卵泡形成与早期发育调控对卵母细胞发育来说非常重要,通过对原始卵泡的体外培养,可以了解原始卵泡发育的调节机制。原始卵泡向初级卵泡的转变不依赖于促性腺激素,而主要受卵巢旁分泌因子的调控,包括Kit/KL、GDF9等促进因子和AMH等抑制因子的调控。目前,原始卵泡发育的分子调控机理研究多以小鼠为模型,而对大型哺乳动物和人的研究甚少。概述了哺乳动物原始卵泡形成与发育启动调控机制的既有研究成果,详细阐述了原始卵泡发育过程中关键分子的调控作用,并介绍了小鼠及其他哺乳动物卵泡体外培养的研究进展。
- 孙理兰谷朝勇潘庆杰沈伟
- 关键词：原始卵泡卵泡发育分子调控
- Insulin与FSH调控PGCs体外分化的卵母细胞发育的机理研究
- 哺乳动物卵巢卵母细胞发育的研究，最初主要关注生殖细胞形成的早期阶段或出生后卵泡的生长发育。而原始卵泡的体外形成与发育激活方面，虽然有小鼠原始卵泡体外培养发育并可获得成熟的卵母细胞的报道，但减数分裂前的雌性生殖细胞不能在体...
- 孙理兰
- 关键词：卵母细胞
- 一种人皮肤干细胞体外向原始生殖细胞分化的技术方法
- 本发明涉及一种人皮肤干细胞体外向原始生殖细胞分化的技术方法，利用机械法分离人皮肤干细胞，体外培养人皮肤干细胞，利用人皮肤干细胞体外形成拟胚体的方法进行分化，分化后用骨形态发生蛋白-4、干细胞生长因子、表皮生长因子、碱性成...
- 陈春雷马华刚程顺峰孙理兰沈伟
- 文献传递
