毕波
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 氧化葡糖杆菌1.637山梨糖还原酶基因sr功能初步研究
- 2016年
- 目的:研究山梨糖还原酶基因sr(B932_3022)在氧化葡糖杆菌1.637生长代谢中的作用。方法:构建sr基因同源敲除质粒p GX-srup-Gm-down,PCR扩增得到打靶片段,电击转化导入氧化葡糖杆菌1.637,通过庆大霉素抗性和PCR筛选sr基因重组敲除菌,分别以山梨醇和山梨糖为碳源考察野生菌与敲除菌生长和山梨糖代谢的差异。结果:抗性和PCR验证结果显示敲除了氧化葡糖杆菌1.637的sr基因;与野生菌相比,敲除菌生长出现滞后,以山梨醇为碳源时敲除菌山梨糖积累增多,而以山梨糖为碳源时山梨糖消耗减少。结论:氧化葡糖杆菌1.637的sr基因敲除影响菌株前期生长与山梨糖代谢。
- 陆璐熊向华汪建华赵巧林毕波梁志锋张惟材
- 关键词：基因敲除山梨糖
- 抗A型肉毒毒素鼠源性单克隆抗体的制备和鉴定被引量：4
- 2016年
- 目的制备与鉴定抗A型肉毒神经毒素重链C端(heavy chain of botulinum neurotoxin serotype A,Bo NT/AHc)特异性鼠单克隆抗体。方法通过纯化Bo NT/AHc抗原、免疫BALB/c小鼠并建立杂交瘤细胞以制备鼠单抗,用ELISA、Western印迹实验和抗体分型试剂盒进行分析鉴定,并通过ELISA检测鼠单抗与Bo NT/AHc突变体结合,初步鉴定其在Bo NT/AHc的结合表位。结果得到纯度较高的Bo NT/AHc抗原,制备了4株特异性鼠单抗1A4、3H3、3H7、5H8。间接ELISA结果显示,单抗细胞上清效价均>3.0×103;Western印迹检测结果显示,单抗均能与Bo NT/AHc特异性结合;抗体亚型鉴定结果为1A4、3H7属于Ig G1(Κ),3H3属于Ig M(Κ),而5H8属于Ig G2b(Κ);叠加ELISA实验表明,4株单抗抗原识别表位相近;用ELISA检测单抗与Bo NT/AHc突变体结合实验结果初步确定了4株单抗与Bo NT/AHc的结合表位。结论对抗A型肉毒毒素鼠源性抗体完成了制备和鉴定,为肉毒毒素中和抗体的开发与阐明中和抗体的表位奠定了基础。
- 赵巧林陆璐毕波景爱霞汪建华张惟材熊向华
- 关键词：肉毒杆菌毒素重链抗体单克隆中和抗体表位
- 高效液相色谱法分析吡咯喹啉醌被引量：4
- 2015年
- 目的：建立一种通过高效液相色谱（HPLC）定量测定吡咯喹啉醌（PQQ）的分析方法。方法：将PQQ标准品及发酵制备的PQQ结晶粉末溶于10 mmol/L NaOH溶液，利用高效液相色谱仪进行测定。采用Waters XBridge C18（4.6 mmx150 mm，5μm）作为分离柱，用甲醇-水（用三氟乙酸调节pH值为1.0）梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，于室温下检测PQQ，检测波长为365.8 nm。结果：检测得PQQ标准品的保留时间约为7.8 min，在0.03125-1 mg/mL范围内线性关系良好，相关系数（r2）在0.9999以上，平均回收率为98.6%。结论：高效液相色谱法分析PQQ的灵敏度和准确度高，是一种可靠的PQQ定量分析方法。
- 魏静远李大攀赵炜楠葛欣毕波熊向华汪建华杨秀萍张惟材
- 关键词：高效液相色谱吡咯喹啉醌分析方法
