王建国
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- MiRNA-491-5p慢病毒过表达载体构建及其稳定表达细胞株的筛选被引量：2
- 2014年
- 目的:构建miRNA-491-5p慢病毒过表达载体,筛选miRNA-491-5p稳定表达细胞株。方法 :构建PCDH-511B-miRNA-491-5p载体,转染HEK293T细胞,通过实时荧光定量PCR检测miRNA-491-5p的含量。结果:实时荧光定量PCR检测显示转染慢病毒载体组miRNA-491-59表达水平是对照载体组的1 000倍,证明目的基因已在转染细胞中成功表达。结论:成功构建了miRNA-491-5p慢病毒过表达载体和筛选出了miRNA-491-5p稳定表达细胞株。
- 杨诗悦肖娟娟赵敦梅卢慧敏郑亚标张苹王建国沈方圆樊丽霞王静婷张敏王明华
- 关键词：实时荧光定量聚合酶链反应慢病毒
- 大豆悬浮细胞培养及作为外源基因转化受体的研究被引量：2
- 2015年
- 以吉林小粒7号大豆品种为材料,切取无菌幼苗下胚轴诱导愈伤组织,初步建立了大豆悬浮细胞系,测定不同硼酸浓度下悬浮细胞生长变化;采用农杆菌介导法对大豆悬浮细胞进行外源GUS基因的转化,先通过不同程度的超声处理确定最佳超声时长,然后在最佳超声处理时长的基础上,探讨了硼酸浓度对转化效率的影响;最后采用PCR和Southern blot杂交对抗性愈伤做分子鉴定。结果表明：大豆悬浮细胞正常生长硼酸浓度在2.0-10 mg·L^-1,过高或过低均会抑制大豆细胞正常的生长,高于100 mg·L^-1时抑制作用最显著。但在转化过程中,适当增加硼酸浓度（10-30 mg·L^-1）则能够提高悬浮细胞的转化效率,并且有助于转化组织的筛选,借以3 min超声的辅助作用,30 mg·L^-1硼酸浓度下转化效率达到1 mg转化细胞团中含28个转化体。
- 方星胡倩倩王建国岳娜孟祥勋
- 关键词：大豆悬浮细胞农杆菌
- 硼营养对大豆组织再生及农杆菌介导的遗传转化效率的影响被引量：1
- 2013年
- 硼在维持植物细胞壁和细胞膜等方面有着重要的作用。以大豆品种吉林小粒7号为试验材料,研究硼浓度对大豆子叶节丛生芽的诱导的影响,并在不同硼元素浓度下采用农杆菌介导法将报告基因(GUS)导入大豆中,用组织化学法测定GUS基因的表达并计算瞬时表达率,最后采用PCR和斑点杂交做进一步的鉴定,以探讨硼介导的大豆转化效率及可行性。结果显示高硼和低硼培养基对大豆丛生芽诱导均有一定的抑制作用,尤其是高硼情况下丛生芽诱导率显著降低。30 mg·L-1硼酸环境下农杆菌介导的大豆转化效率较之正常硼酸环境下有显著的提高,GUS瞬时转化率高达35.92%。这一现象对建立新的大豆遗传转化体系的意义有待于进一步探究。
- 胡倩倩方星王建国岳娜孟祥勋
- 关键词：大豆硼农杆菌GUS基因
