王红雨
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划吉林省教育厅科研项目长春市科技局项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 轮状病毒外壳蛋白VP7基因在拟南芥种子中表达及免疫原性分析被引量：1
- 2017年
- 为了研究开发植物来源的轮状病毒疫苗,试验采用模式植物拟南芥作为生物反应器,将轮状病毒主要中和抗原基因VP7通过农杆菌介导法转化野生型拟南芥,获得了含有VP7的转基因拟南芥稳定株系,并分析其种子表达蛋白的免疫原性。首先根据拟南芥密码子的偏好性,设计合成优化的VP7基因,构建植物表达载体p PHAP1301-His-HRVVP7;然后通过农杆菌介导的Floral Dip法转化拟南芥,收获T0代种子后播种,喷用草铵膦筛选转基因拟南芥获得T1代种子,重复上述过程最终获得T3代拟南芥种子,通过RT-PCR、Western、ELISA法等进行分析。结果表明:VP7基因已成功整合到拟南芥的基因组并进行了转录和蛋白表达,并且VP7蛋白占总可溶性蛋白的0.31%,即每克转基因拟南芥种子中所含目的蛋白为43.3μg。以转基因拟南芥稳定株系种子中的可溶性蛋白口服免疫小鼠,可使小鼠获得免疫原性。说明通过植物作为生物反应器生产轮状病毒疫苗方法可行。
- 李余先官丽莉杨晶刘秀明杨赫周永刚王红雨李海燕李校堃
- 关键词：轮状病毒VP7拟南芥免疫原性
- VP7-CTB融合蛋白在拟南芥种子中的表达及免疫原性分析被引量：1
- 2017年
- 为了研发植物来源的轮状病毒疫苗,采用模式植物拟南芥作为生物反应器,将轮状病毒主要中和抗原基因VP7融合CTB,通过农杆菌介导法转化野生型拟南芥,获得了含有VP7-CTB的转基因拟南芥稳定株系,并分析其种子表达蛋白的免疫原性。首先,根据拟南芥密码子的偏好性,设计合成优化的VP7和CTB基因,构建植物表达载体pPHAP1301-his-VP7-linker-CTB;再通过农杆菌介导的Floral Dip法转化拟南芥,收获T0代种子后播种,喷用草铵膦筛选转基因拟南芥获得T1代种子,重复上述过程最终获得T3代拟南芥种子,通过RT-PCR、W estern-bolt、ELISA等进行分析。结果表明,his-VP7-linker-CTB基因已成功整合到拟南芥的基因组并进行了转录和蛋白表达,并且VP7蛋白占总可溶性蛋白的0.39%,即转基因拟南芥种子中所含目的蛋白为52.65 g/g。最后,用转基因拟南芥稳定株系种子中的可溶性蛋白口服免疫小鼠,使小鼠获得免疫原性;乳鼠攻毒试验证明,母鼠免疫后产生的抗体能够有效传递给子代,具有很好的保护作用。
- 李余先官丽莉周永刚刘秀明杨晶郭咏昕杨赫王红雨李海燕李校堃
- 关键词：轮状病毒拟南芥免疫原性
- 红花转录物组中筛选的Unigene100791基因克隆、生物信息学分析及功能预测
- 2016年
- 目的:克隆红花Unigene100791基因,研究其表达情况;并对该基因的特性进行生物信息学分析,为后续红花代谢调控及提高红花油产量,使其满足食品工业市场需求奠定理论基础。方法:从红花转录物组数据库中筛选得到转录因子Dof相关基因Unigene100791的中间片段;利用RNAiso plus试剂法提取红花种子总RNA,利用RT-PCR方法反转录得到红花种子c DNA;采用3'Race方法从红花种子中克隆Unigene100791基因的全长序列;通过生物信息学方法对其全长基因进行分析,构建该基因与相关物种的系统进化树,研究其蛋白序列的同源性及其理化性质与结构特征,预测其生物学功能。结果:成功克隆了红花Unigene100791基因,其基因全长1274 bp;开放阅读框981 bp,编码326个氨基酸,理论分子质量约为35026.5 u,理论等电点9.5,带正电残基27个,带负电残基18个,序列含有典型的加尾信号poly(A);红花Unigene100791基因编码产物与烟草Dof2.4-1亲缘关系较近,属于Dof超家族,此蛋白存在信号肽,不存在跨膜结构。结论:成功克隆了红花Unigene100791基因,并对其编码的蛋白质进行了生物信息学分析。
- 陈笑沈彦岐王清曼杜林娜卢玉彬强卫东郭咏昕王红雨杨莹杨晶魏健
- 关键词：红花转录因子DOF生物信息学
