杨晶
- 作品数：117 被引量：367H指数：11
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 红花油酸去饱和酶基因的克隆及序列分析
- 2014年
- 【目的】对红花油酸去饱和酶FAD2基因进行克隆和生物信息学分析,为深入研究该酶的功能提供理论依据。【方法】提取红花种子总RNA,通过RT-PCR方法进行反转录,PCR扩增得到FAD2基因全长cDNA序列。运用生物信息学方法,对红花FAD2氨基酸序列的理化性质、系统进化、蛋白定位和跨膜区域等进行预测和分析。【结果】成功克隆获得了红花FAD2基因,其开放阅读框cDNA长1 140bp,编码380个氨基酸,预测分子质量43.6ku,理论等电点8.37,带有正电残基(强酸性)30个、负电残基(强碱性)34个。FAD2蛋白含有3个极度保守的His-Box,不存在明显的信号肽,存在6个跨膜结构域,与疏水区域预测结果一致。红花FAD2核苷酸的分子进化树分析显示,其与日本栽培稻的亲缘关系较近。红花FAD2氨基酸序列比对结果表明,不同植物的FAD2具有较高的同源性,同源性平均达72.94%。【结论】成功克隆了红花FAD2基因,并对其编码的蛋白进行了生物信息学分析。
- 王文慧强卫东王清曼邹德毅吴治邦王晶晶王沥浩杨晶
- 关键词：红花基因克隆同源性分析信号肽
- 发状根在药用植物基因工程研究进展
- 利用发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）转化药用植物得到的发状根（hairy roots）具有激素自养,生长迅速,富集次生代谢产物和遗传稳定性高等特点,广泛应用于各种药用植物,为含量稀少的的中药...
- 李天航杨晶王艳芳郭咏昕李昌禹李海燕李校堃
- 关键词：发状根药用植物基因工程次级代谢产物外源蛋白
- 文献传递
- 利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21)被引量：5
- 2011年
- 【目的】在番茄中表达人成纤维细胞生长因子-21(Fibroblast growth factor-21,FGF21),为利用植物反应器规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi)作为转基因植物的选择标记,将人源fgf21基因克隆至表达载体pCAMBIA1390RⅡ(简写为p1390RⅡ)上,构建重组表达质粒p1390 RⅡMFGF21。采用冻融法将质粒p1390RⅡMFGF21转入根瘤农杆菌EHA105,叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum)"中蔬6号",采用PCR检测、Southern杂交筛选转基因番茄阳性植株,并对FGF21蛋白在转基因番茄叶片中的表达进行了Western blot分析。【结果】成功构建了带pmi安全选择标记基因的植物双元表达载体p1390RⅡMFGF21,在番茄中初步建立了以pmi为选择标记基因的遗传转化体系,共获得了26株转基因番茄植株,其中5株为阳性克隆,转化率为19.2%。采用PCR扩增和Southern blot分析进行检测,结果表明,重组fgf21基因已整合到转基因番茄基因组中。Western blot分析检测结果显示,FGF21蛋白在转基因番茄叶片中有一定水平的表达,并具有良好的抗原性。【结论】获得了以pmi为选择标记成功表达FGF21蛋白的转基因番茄遗传体系。
- 付宏岐李海燕庞实锋杨晶李洪志薛萍刘秀明李营王艳芳李校堃
- 关键词：农杆菌生物反应器番茄
- 红花油体提取条件优化及稳定性研究被引量：4
- 2015年
- 油体是储藏脂肪的亚细胞单位,其表面包裹一层磷脂和油体蛋白。这种稳定的结构可以保护油体面对环境的压力,使油体可以应用在食品、化妆品及制药工业中。研究红花油体的提取方法及红花油体乳液的基本性质,旨在为以油体为基质的载体体系研究奠定基础。以pBS为介质,采用梯度离心法,比较了不同提取条件对红花油体的提取效率的影响;对其在不同pH值、NaCl浓度条件下红花油体的平均粒径和稳定性进行测定。结果表明,红花油体在pH值≥6条件下,平均粒径为1.75-2.05μm和p H值≤6条件下,平均粒径1.50-1.75μm;NaCl浓度0.2和0.4 mg/m L时,红花油体分散较为均匀,NaCl浓度1.2和2.0 mg/m L时,红花油体出现聚集现象。蔗糖浓度0.1和0.2 mg/m L时,红花油体分散较为均匀,蔗糖浓度为0.4-1.0 mg/m L时,红花油体比较密集,随着蔗糖浓度的增加,红花油体的粒径逐渐开始不均一。红花油体的最佳提取条件是pH7,NaCl浓度0.2 mg/m L,蔗糖浓度0.1 mg/m L,稀释后的红花油体溶液在不加入保护剂或者不经过物理方法处理下,保存起来不稳定。
- 杨晶韩高强刘忠良卢振吴治邦王清曼邹德毅强卫东陈伟
- 关键词：红花油体粒径稳定性
- 大豆24 kDa油体蛋白基因与aFGF融合转化红花的研究被引量：6
- 2013年
- 目的:利用红花表达酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF),为利用植物生物反应器规模化生产aFGF奠定基础。方法:将人源aFGF基因改造为植物偏好性的aFGF基因序列,通过PCR搭桥技术克隆植物偏好的aFGF基因,利用酶切连接方法构建植物油体表达载体,通过冻融法转到根瘤农杆菌EHA105,利用农杆菌介导的方法转化到塔城红花中,对转化红花进行PCR,Southern杂交,RT-PCR分子检测。结果:扩增出植物偏好的aFGF基因的全长序列,并与大豆油体蛋白基因Doil基因融合,成功地插入到改造好的含有大豆油体蛋白启动子表达载体中,探索了进行红花遗传转化的最佳条件,成功获得单位点插入的3个独立转化红花植株,在转录水平都有大小一致的aFGF的表达。结论:该实验成功构建了含aFGF植物油体表达载体,并筛选出最佳的遗传转化条件,A为0.6,侵染时间为10 min,共培养3 d,获得了aFGF转录水平表达的转基因红花植株,这将红花油体蛋白本身的皮肤保护作用,与FGFs的创伤修复作用累加,快速开发出外用创伤药物奠定基础。
- 盖玉红王旺金潇王嘉琪李宏博王刚杨晶魏健
- 关键词：AFGF红花
- 去除选择标记基因的Cre/lox重组系统在植物中的应用被引量：2
- 2009年
- 获得无选择标记基因的转基因植物越来越受到研究者的重视。目前,应用得较广泛的去除选择标记基因的方法有共转化法和位点特异性重组法,其中位点特异性重组系统中Cre/lox重组系统研究最多。以下介绍了Cre/lox位点特异性重组系统的原理、特点及其近几年在植物中的应用,针对本实验室在这一领域的研究情况,重点阐述了Cre/lox系统的应用前景。随着植物反应器研究领域的不断壮大,去除筛选标记基因是植物反应器研究的必然趋势。
- 刘秀明孟欣欣李海燕杨晶付宏歧李校堃
- 关键词：转基因植物
- 蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物对链脲佐菌素诱导2型糖尿病小鼠的降血糖作用及机制研究被引量：3
- 2018年
- 研究蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物(PHAE)的降血糖活性及其作用机制。建立链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病C57BL/6J小鼠模型,考察PHAE灌胃处理对糖尿病模型小鼠糖脂代谢相关指标的影响。在此基础上,利用小鼠胰岛杂交瘤细胞MIN6初步探讨其作用机制。结果表明,与模型组相比,连续20d灌胃PHAE(1000、3000 mg/kg)可显著提高糖尿病小鼠体重和血清胰岛素水平(p<0.05),并显著降低其空腹血糖、血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平(p<0.05)。此外,PHAE可刺激MIN6细胞增殖、促进分泌胰岛素并且显著上调Epac2蛋白表达。实验结果提示,蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物具有降血糖和调血脂活性,其降糖活性可能与其作用于胰岛细胞并促进胰岛素分泌有关,这一研究结果为蝙蝠蛾拟青霉的深入研究开发提供一定的数据依据。
- 杜林娜姚宇魏东旭初国栋赵晨妍郑德庆杨晶
- 关键词：2型糖尿病链脲佐菌素胰岛素信号通路
- 不同红花品种的组织培养及油脂含量的比较被引量：1
- 2013年
- 以5个不同品种的红花为试材,研究比较了其种子萌发率,组织培养过程中的污染率、分化率和生根率,以及籽粒含油率和可溶性蛋白质含量等。结果表明:"吉红早熟"的种子萌发率高,分化率相对较高,尤其生根率较其它几个品种均较高,所以此品种适合作为红花组织培养的基因型,另外,"吉红早熟"品种的种子含油量较高,适合开发成为红花油类产品。
- 魏健王文慧王沥浩王旺盖玉红杨晶
- 关键词：红花油脂含量
- 一种含有血管内皮生长因子活性多肽的植物油体护肤乳液
- 本发明公开了一种含有血管内皮生长因子活性多肽的植物油体护肤乳液，利用镶嵌于油体表面的油体蛋白与血管内皮细胞生长因子的融合表达产物可直接作为活性成分用于护肤品的开发，简化了血管内皮生长因子与乳化剂（或保护剂）混合的加工工艺...
- 李校堃李海燕杨晶官丽莉郭咏昕王法微杜林娜王艳芳王南董圆圆刘秀明姚娜冯鹤齐玉红
- 文献传递
- 红花遗传转化受体系统的建立及转酸性成纤维细胞生长因子aFGF的初步研究被引量：13
- 2010年
- 目的:将aFGF与红花的油体蛋白融合,转入红花中,直接通过提取红花油来实现红花与aFGF的双重功效。方法:以不同日龄的红花子叶为外植体,采取正交试验设计的方法,摸索出红花再生体系的最佳条件。然后通过农杆菌介导法将aFGF基因转入到红花中,对不同浓度的抗生素进行筛选,进行PCR鉴定,计算阳性率。结果:根据不同的激素配比,确定了红花分化的最佳培养基为MS+BA1.0 mg.L-1+NAA0.2 mg.L-1;生根的最适培养基为1/4 MS+NAA2.0 mg.L-1+IAA0.5 mg.L-1。3种不同种类和浓度的抑菌抗生素对红花浸染后的抑菌效果略有不同,结合抑菌效果,污染率,芽的分化率以及成本问题等因素的综合考虑,抑菌抗生素选择用Tim,质量浓度为400 mg.L-1即可抑制细菌的生长,同时有利于芽的分化;hyg的筛选压力则选择6 mg.L-1为它的临界浓度;对8棵转化植株进行鉴定,阳性率为25%。结论:通过器官发生途径,确定出红花分化与生根的最佳激素组合与配比,建立了红花的再生体系;确定出最适的抑菌抗生素与筛选抗生素的浓度;经过筛选获得的再生植株,通过PCR检测,部分扩增出aFGF目的基因,证实了aFGF基因整合到红花基因组中。这为红花作为植物生物反应器的研究奠定了扎实的基础。
- 杨晶李海燕付宏歧刘秀明李校堃
- 关键词：红花AFGF
