黄海珍 作品数:10 被引量:34 H指数:3 供职机构: 深圳大学生命科学学院过敏反应与免疫学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 深圳市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
消化酶对花生蛋白抗原性影响的研究 被引量:2 2013年 花生是主要的食物过敏原。研究通过模拟肠道消化对花生粗提蛋白进行酶解,研究胃蛋白酶与胰蛋白酶对花生蛋白抗原性的影响。用胃蛋白酶与胰蛋白酶模拟人的消化液分别处理花生蛋白,通过ELISA和Western-blot对消化酶对花生蛋白抗原性的影响进行分析。结果表明,消化酶能有效降低花生蛋白的过敏原性。 何伟逸 吴序栎 刘志刚 黄海珍 刘飞燕 李瑶 叶烨关键词:花生 消化酶 酶解 真核表达与原核表达的德国小蠊变应原Bla g 2蛋白结构的光谱学研究 被引量:12 2006年 在基因工程技术中,采用原核表达系统获得的重组蛋白是以包涵体的形式存在,在细胞内聚集成无生物活性的不溶性颗粒,而采用真核表达系统收获的蛋白已经是经过正确的体内折叠的活性蛋白。文章分别用真核与原核表达系统表达重组变应原,通过对不同来源目的蛋白的荧光光谱和CD谱的比较和分析,对真核系统与原核系统表达出的Bla g2蛋白的高级构象进行研究,阐明了Bla g2在溶液中的二级结构,并推断出其三级结构组成类型。 刘志刚 朱健琦 黄海珍 徐宏关键词:德国小蠊 BLA 真核表达 原核表达 表面等离子体共振技术检测重组户尘螨变应原rDer p2与抗体的结合 被引量:8 2009年 利用表面等离子体共振技术对屋尘螨重组变应原(rDer p2)与单克隆抗体之间的结合作用进行了研究,并且运用该技术对尘螨过敏患者血清与变应原之间的结合作用进行了初步探讨。变应原和抗体之间的结合通常是通过免疫吸附技术或者酶免法来进行研究的,这些方法一般需要对分析物进行标记,由于背景的影响和低灵敏度,目前对抗原和抗体的反应检测所用的免疫吸附技术的准确性还远不如表面等离子共振技术。用氨基偶联法将重组变应原rDer p2固定在CM5传感片表面上后,表面等离子体共振(SPR)技术检测的结果显示,rDer p2与尘螨过敏患者血清的结合作用比单克隆抗体要弱得多。而且,尘螨过敏不同患者血清与rDer p2的结合有很大的差异性。本研究为临床上对过敏疾病的诊断提供了一个简单、快速和实时监控的检测手段。 刘志刚 黄海珍 袁萍关键词:P2 抗体 罗氏沼虾原肌球蛋白基因的克隆表达及变应原性鉴定 被引量:3 2012年 通过NCBI查找到罗氏沼虾原肌球蛋白的mRNA,根据其CDS区域设计特异引物,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆出目的基因片段,测序后将该片段克隆到原核表达载体pET-28a上,转化到E.coliBL21(DE3)和E.coli Rosatta后,经异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化.采用免疫印迹检测其与对虾过敏患者血清的IgE结合活性.对罗氏沼虾变应原进行了表达、鉴定及纯化,成功地获得了具有变应原活性的重组罗氏沼虾原肌球蛋白,为罗氏沼虾过敏性疾病的诊断、治疗奠定了基础. 罗伟芝 符春荣 邬玉兰 陈献雄 刘志刚 黄海珍关键词:罗氏沼虾 原肌球蛋白 变应原 德国小蠊变应原Bla g 2蛋白变复性的荧光光谱研究 被引量:2 2006年 包涵体中的重组蛋白经抽提后可以在变性状态下纯化,而纯化后的复性过程是基因工程下游处理的重要环节。通过对变应原Bla g 2蛋白复性前后荧光光谱的比较和分析、变性剂(尿素和SDS)对复性后Blag 2蛋白的荧光滴定实验、以及复性后Bla g 2在不同pH下的荧光光谱分析,推断出Bla g 2蛋白分子在不同环境下构象的变化及其光谱学特征,初步建立了一种新的检测重组变应原蛋白变复性的光谱实验方法。 朱健琦 刘志刚 黄海珍 朱永烽 徐宏关键词:德国小蠊 变应原 BLA 复性 荧光光谱 复方中药抑制大鼠肥大细胞脱颗粒的作用及其机制 2015年 目的探讨复方中药(Formula-3)抑制大鼠肥大细胞脱颗粒的作用及其机制。方法通过DNP-BSA-IgE激发建立致敏的RBL-2H3细胞模型。采用MTT实验检测Formula-3(中药组成:人参9g,干姜9g,黄连9g,当归9g,乌梅30g,灵芝30g)对细胞活性的影响;利用酶联免疫吸附法研究Formula-3对致敏肥大细胞β-氨基己糖苷酶及细胞因子的影响;共聚焦激光扫描荧光显微镜观察检测SOC通道的变化。结果成功建立致敏的细胞模型。Formula-3不会对细胞活性造成影响。Formula-3可减少致敏肥大细胞β-氨基己糖苷酶的释放,Th2型细胞因子和Th1型细胞因子的水平亦有显著变化(P<0.05);能够抑制肥大细胞膜上SOC通道的开放,Ca2+瞬变从1.83降至1.18(P<0.05)。结论 Formula-3通过抑制SOC通道的开放达到抑制肥大细胞脱颗粒的目的。 何伟逸 杨成彬 刘晓宇 黄海珍 杨平常 刘志刚关键词:复方中药 肥大细胞 脱颗粒 花生过敏及其主要致敏原Ara h1的研究进展 被引量:3 2013年 花生是一种具有致敏作用的重要食品,能够引起严重的过敏反应。花生的致敏性研究是食物安全研究领域的一个重要课题。本文主要论述了近年来花生致敏现状及花生主要致敏原Ara h1研究进展,包括花生致敏特点、脱敏方法等方面的内容。对降低花生引起的过敏反应风险具有一定意义,同时为对花生过敏者的临床脱敏治疗提供理论依据。 何伟逸 冯玥 蒋聪利 曹际娟 刘志刚 黄海珍 吴序栎关键词:过敏反应 花生 致敏原 脱敏 花生过敏患者血清中抗Arah1的IgG与IgE分离纯化研究 2014年 Ara h1是花生的一种主要致敏原蛋白,能够使花生过敏患者产生特异的IgG与IgE,从而导致花生过敏症状。Ara h1与其特异IgG和IgE的结合是导致花生致敏的一个重要原因。本研究利用Protein A亲和层析柱与Ara h1作为配体的亲和层析柱纯化抗Ara h1的IgG与IgE。高纯度的抗Ara h1特异IgG与IgE对探讨研究其与Ara h1之间相互作用具有重要意义。 何伟逸 李瑶 景江珊 冯玥 幸鹏 黄海珍 吴序栎 刘志刚关键词:ARA H1 过敏 尘螨过敏原的基础研究及其产业化 刘志刚 冉丕鑫 李勤 钟南山 吉坤美 沙金 李国平 喻海琼 李靖 李盟 秦承学 黄海珍 刘晓宇 孙宝清 白羽 (1)尘螨过敏原的分布与种类研究①对中国不同地理区域[中国南部(广州和深圳)、中东部(上海和南昌)和北部(北京和沈阳)]尘螨螨类的大规模调查研究。②对空调滤网中尘螨种类分布及其季节性变化规律、主要过敏原含量检测、室内空调...关键词:关键词:免疫治疗 阴离子交换层析法分离纯化花生主要过敏原Ara h1的研究 被引量:5 2013年 Arah1蛋白是花生的主要过敏原蛋白。本研究从天然的花生提取花生蛋白质,通过硫酸铵分级沉淀及阴离子交换层析法纯化花生主要过敏原Ara h1。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白纯度,结合免疫印迹实验对Arah1免疫活性进行鉴定。结果表明:采用阴离子交换层析法纯化出的Arah1纯度达到90%以上。得率为23.1%。免疫印迹实验表明,此方法纯化出来的Arah1仍具有免疫原性,能跟花生过敏病人血清特异结合。 何伟逸 吴序栎 刘志刚 黄海珍 李瑶 叶烨 曹鹤瑶关键词:花生 食物过敏 纯化