- 应用实时荧光PCR技术检测烟曲霉的初步研究被引量:5
- 2009年
- 目的:根据烟曲霉Mto1基因特异位点设计并合成探针及引物,建立应用实时荧光PCR检测烟曲霉的方法。方法:通过对多种病原曲霉Mto1基因序列的比对分析,在烟曲霉特异位点设计引物及探针,并对其进行特异性及敏感性进行验证。结果:通过对曲霉属26株不同曲霉菌及其他属的6株不同病原真菌的特异性验证未发现有交叉反应,敏感性实验显示应用该方法可检出1.08×10-6μg/ml的模板DNA。结论:实验建立了应用实时荧光PCR技术检测烟曲霉的方法,该方法具有特异、灵敏、快速等特点并能有效避免普通PCR中的样品间交叉污染问题。
- 刘金华史艳宇贺丹刘攀张宇徐立波王丽
- 关键词:烟曲霉实时荧光PCR
- 烟曲霉不同菌株致病力差异的研究
- 2010年
- 目的通过筛选出致病力最强和最弱的菌株研究烟曲霉的致病机制。方法SPF级雄性ICR小鼠216只,体重(20±0.5)g。随机分9组,每组8只(感染组7组,阴性对照组和正常对照组各1组)。其中感染组和阴性对照组小鼠免疫抑制后,分别接种7株烟曲霉的孢子悬液和生理盐水。正常对照组不注射环磷酰胺和孢子悬液。每日观察小鼠的生存状态。对死亡小鼠和处死小鼠的脏器进行组织匀浆菌落计数和病理学检测。实验重复3次。通过比较生存率、中位生存期、平均体重、组织匀浆菌落计数和组织病理学变化等来比较烟曲霉的致病力差异。结果①感染组小鼠接种孢子悬液后,体重迅速下降。肺组织病理学检测观察到组织坏死,菌丝聚集;肺组织匀浆培养得到的菌株经分子生物学鉴定为烟曲霉。②阴性对照组小鼠体重下降速度较感染组慢,无死亡;肺组织病理学检测未见菌丝侵袭。③通过比较生存率、中位生存期、组织病理学变化等指标,从7株烟曲霉中筛选得到致病力最强和最弱的菌株(烟曲霉JLC50134和JLC30566)。结论不同烟曲霉菌株间存在致病力的差异。
- 张宇宋文刚高嵩刘攀王丽
- 关键词:致病力动物模型烟曲霉