宋硕
- 作品数:6 被引量:13H指数:3
- 供职机构:厦门大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 基于人乳头瘤病毒次要衣壳蛋白L2的广谱疫苗研究进展被引量:1
- 2019年
- 人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)次要衣壳蛋白L2具有广谱中和表位,被认为具有成为新一代广谱预防性疫苗的潜力。目前上市的HPV疫苗均是基于主要衣壳蛋白L1,但都被证明只对疫苗保护型别有效,仍无法覆盖所有高危型别的HPV,且成本较高不利于在发展中国家推广,因此急需开发低成本高覆盖的预防性疫苗。本文综述了基于L2疫苗的相关研究策略,对HPV广谱预防性疫苗的研究具有参考意义。
- 池鑫宋硕黄诗雯陈婷婷夏宁邵李少伟
- 三色混合荧光HPV假病毒中和检测系统的建立及评价被引量:4
- 2018年
- 目的建立三色混合荧光HPV假病毒中和检测系统,并评价其在检测HPV九价疫苗免疫血清免疫原性的应用。方法分别选取红色、绿色和蓝色荧光蛋白的质粒N31-MCHREEY、N31-EGFP和N31-mTagBFP构建HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58假病毒,利用双抗夹心法和病毒半数组织培养感染剂量法检测HPV假病毒浓度和感染滴度;利用单色荧光与三色混合荧光HPV16/33/45假病毒,检测HPV九价疫苗免疫小鼠血清的中和滴度,以验证三色混合荧光HPV假病毒系统的准确性;采用单色荧光和三色混合荧光HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58假病毒系统检测HPV九价疫苗免疫食蟹猴血清的中和滴度,判断其是否可应用于HPV九价疫苗免疫血清的免疫原性检测。结果含有绿色、红色和蓝色荧光质粒的HPV16型假病毒的浓度为5~6 μg/ml,HPV6/11/18/31/33/45/52/58的三色混合荧光假病毒浓度为1~3 μg/ml。获得了分别含有EGFP、Mcherry和mTagBFP报告基因的9个型别的HPV假病毒,且满足中和检测需要;9个型别单色荧光HPV假病毒的滴度值均在1×104~1×105之间,即它们具有相似的感染滴度。检测HPV九价疫苗免疫的小鼠血清时,单色荧光与三色混合荧光HPV16/33/45假病毒系统所得中和滴度值差异均无统计学意义(P值均〉0.05);检测HPV九价疫苗免疫的食蟹猴血清时,单色荧光与三色混合荧光A、B和C组HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58假病毒所得中和滴度值差异均无统计学意义(P值均〉0.05)。结论成功地建立了三色混合荧光HPV假病毒中和检测系统;验证其与单色荧光HPV假病毒系统具有一致性;证实其可应用于检测HPV九价疫苗免疫血清的免疫原性检测中。
- 魏双萍范飞陈洁柳欣林杨与柔王致萍宋硕李智海魏旻希王大宁李少伟夏宁邵
- 关键词:疫苗免疫血清人乳头瘤病毒
- 悬浮驯化HEK-293FT细胞表达人乳头瘤病毒16型假病毒及其冷冻电镜结构解析被引量:3
- 2016年
- 为了大量获得人乳头瘤病毒(HPV)16型的假病毒颗粒(PsV),将贴壁生长的293FT细胞驯化成为悬浮细胞系进行大规模的悬浮培养,同时优化假病毒纯化方法,并使用冷冻电镜解析其三维空间结构。本研究通过逐步降低培养基中血清浓度和加入抗聚团剂等方法,获得了可在Wave生物反应器中大规模悬浮培养的293FT细胞,经过携有HPV16L1、L2基因和GFP报告基因的质粒转染,实现了大规模制备HPV16假病毒;利用CsCl等密度和蔗糖密度梯度超速离心的方法,获得高纯度的HPV16假病毒颗粒,滴度为8.2×10^5 TCID50/μL;蛋白印迹结果显示HPV16假病毒中含有L1和L2蛋白,定量ELISA测得L1蛋白的含量为156.0μg/mL;最后使用Tecnai G2F30冷冻电镜和Falcon电子直接探测相机采集冷冻HPV16假病毒的图像,应用AUTO3DEM软件解析其结构,结构分辨率为14A,呈现为T=7的等二十面体对称结构,直径为600A。本研究为HPV疫苗临床血清中和检测、高分辨率HPV16假病毒的结构解析及L1和L2相互作用研究奠定了良好基础。
- 王大宁刘亚静郑清炳李智海范飞柳欣林宋硕顾颖夏宁邵李少伟
- 关键词:人乳头瘤病毒假病毒
- 人乳头瘤病毒预防性疫苗的研究进展和应用现状被引量:2
- 2016年
- 高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染被证实是诱发女性宫颈癌的主要原因。宫颈癌已成为继乳腺癌之后世界范围内严重威胁妇女健康的疾病。目前宫颈癌治疗效果不佳,因此预防HPV感染尤为重要。国外已上市的3种HPV预防性疫苗显示出良好的安全性和有效性,但由于生产成本和售价较高,阻碍了其在发展中国家和经济较落后的地区推广应用。目前,这些疫苗尚未在我国上市,本文综述了HPV疫苗的研究进展和应用现状,为即将在我国上市的HPV疫苗提供信息。
- 李韵冰宋硕王大宁李智海夏宁邵李少伟
- 关键词:人乳头瘤病毒宫颈癌疫苗
- 突破病毒型别特异性的人乳头瘤病毒三型交叉疫苗的理性设计
- 疫苗是预防感染性疾病最有效的武器。而自然界中,多种病毒如流感病毒(influenzavirus)、人免疫缺陷病毒(Humanimmunodeficiencyvirus,HIV)、鼻病毒(Rhinovirus)、人乳头瘤病...
- 宋硕
- 关键词:人乳头瘤病毒
- 人乳头瘤病毒样颗粒组装研究进展被引量:4
- 2018年
- 病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)作为一种形态结构与真病毒高度相似的空心颗粒,具有真病毒类似特性,在机体内能刺激免疫系统产生高滴度的中和抗体,又因为其缺乏核酸无法复制,近年来一直被作为理想的候选疫苗蛋白。目前上市的三种人类乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)疫苗都是属于基因工程VLP疫苗。对于HPV VLP组装的研究能够更好的为疫苗研发方面提供更多的优化手段。该文旨在总结这十几年人乳头瘤病毒VLP组装的研究进展,为HPV以及其它病毒的基因工程疫苗研发提供更多有价值的信息,为人类健康作出贡献。
- 史晶洁宋硕王大宁李智海夏宁邵李少伟
- 关键词:疫苗