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朱宝
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2
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
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发文基金:
黑龙江省杰出青年科学基金
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相关领域:
农业科学
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合作作者
孔苗苗
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
马兴杰
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
王晓玲
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
仇铮
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
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鉴别猪伪狂犬病毒强弱毒的高效纳米PCR检测试剂盒及初步应用
本实验建立了鉴别猪伪狂犬病毒(PRV)强弱毒高效纳米PCR检测方法,并对相关条件进行优化,组装了试剂盒.根据PRV保守序列设计3对引物分别扩增PRV基因组的gB(431 bp)、gE(316 bp)和gG(202 bp)...
马兴杰
仇铮
崔宇超
王晓玲
张晶
朱宝
孔苗苗
罗亚坤
崔尚金
关键词:
猪伪狂犬病毒
毒性检测
试剂盒
文献传递
鉴别猪伪狂犬病病毒强弱毒的高效纳米PCR检测试剂盒及初步应用
被引量:2
2014年
试验建立了鉴别猪伪狂犬病病毒(PRV)强弱毒高效纳米PCR检测方法,并对相关条件进行优化,组装了试剂盒。根据PRV保守序列设计3对引物分别扩增PRV基因组的gB(431 bp)、gE(316 bp)和gG(202 bp)3个基因,用于区分PRV强毒与基因缺失毒株,优化反应条件后建立了纳米PCR检测PRV强弱毒的方法并组装试剂盒,对试剂盒进行了特异性、敏感性、批内批间可重复性及保存期评估试验,并对临床样品进行检测。特异性试验表明,此试剂盒对于PRV能够扩增出431(gB)、316(gE)和202 bp(gG)的目的片段,对于PRV-Bartha-K61能够扩增出431和202 bp的目的片段,对于猪捷申病毒、非洲猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及大肠杆菌等DNA或cDNA均未扩增出条带。敏感性试验表明,此试剂盒的方法比常规PCR方法敏感100-1000倍,最低核酸拷贝数检出量可以达到101 copy/μL数量级。试剂盒的批内、批间检测结果无明显差异,稳定性良好。-20℃至少可保存12个月。在对中国黑龙江、吉林等7个省市的临床送检的117份样品进行检测,结果显示,PRV强毒阳性率为51%,阴性率为49%,未发现有弱毒感染。鉴别PRV强弱毒纳米PCR试剂盒的研制,对PRV感染的早期检测、野毒株和疫苗株的鉴别、疾病控制等都有重要意义,而且也可以用于其他动物PRV感染的检测和早期诊断。
马兴杰
仇铮
崔宇超
王晓玲
张晶
朱宝
孔苗苗
罗亚坤
崔尚金
关键词:
猪伪狂犬病病毒
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