李双双
- 作品数：8 被引量：14H指数：1
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- 潜伏感染期猪伪狂犬病病毒基因组甲基化预测及图谱测定
- 2015年
- 为研究DNA甲基化在PRV潜伏感染中的作用,本研究首先对PRV全基因组甲基化状态进行预测,再采用亚硫酸氢盐PCR测序的方法检测急性期及潜伏感染期IE180及EP0启动子区及转录起始位点附近区域的甲基化状态。结果显示,急性期及潜伏感染期IE180及EP0启动子区及转录起始位点附近区域均存在散在的甲基化位点,并未发现广泛的甲基化区域,与预测结果一致。结果表明,潜伏感染期间PRV基因组发生甲基化的可能性很小,进而可知DNA甲基化在PRV潜伏感染过程中未起到关键的作用。
- 郑关民陈文定余秋颖陈陆张玉娟杨利李双双常洪涛李永涛赵军王川庆
- 关键词：猪伪狂犬病病毒甲基化
- 兔源大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性检测研究被引量：13
- 2013年
- 对河南省部分地区的兔源大肠杆菌做了分离鉴定,并进行兽医临床常用抗菌药物的敏感性检测。从郑州、济源、登封、武陟4个地区的兔场分离鉴定出27株大肠杆菌,进行了11种药物的敏感性检测,结果表明:27株大肠杆菌对多粘菌素的敏感率(96.3%)最高,对头孢噻呋/舒巴坦、头孢噻呋、阿米卡星的敏感率依次为:59.3%、59.3%、55.6%,对兽用常见抗生素头孢噻呋、阿米卡星、氟苯尼考等均有不同程度的耐药现象。
- 李双双贺志沛罗俊娜石帅张小彩王东方刘晓星张向阳吴华
- 关键词：大肠杆菌药物敏感性耐药谱
- 猪ISG15抗PRV作用及机制的初步研究
- 干扰素刺激基因15（Interferon stimulated gene15，ISG15）编码的ISG15蛋白作为抗病毒天然免疫反应中重要的一员，参与肿瘤免疫应答、细胞凋亡、细胞因子表达、转录调控等多种生物学过程。作为I...
- 李双双
- 关键词：猪伪狂犬病基因表达
- 文献传递
- 猪白细胞介素18基因的克隆及真核表达重组质粒的构建
- 2017年
- 为获得表达猪白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)的真核表达重组质粒,试验通过RT-PCR从猪脾脏、肺脏和淋巴结组织中扩增猪IL-18全基因并定向克隆到真核表达载体pZJ-1,测序分析和酶切鉴定正确后,转染至293T细胞中,并通过实时荧光定量PCR和Western blotting分别在基因和蛋白水平检测IL-18的表达。结果表明,试验成功构建了真核表达重组质粒pZJ-IL-18,且可以在293T细胞中表达IL-18基因。Western blotting试验证实,猪IL-18多克隆抗体能与约17ku的表达产物发生特异性反应,表明IL-18能正确表达且具有反应原性。本试验构建了表达猪IL-18基因的真核表达质粒,并在293T细胞中瞬时表达,为进一步研究IL-18的功能奠定基础。
- 石昂时庆贺李新果王玉国杨利李双双陈陆王川庆
- 关键词：IL-18基因真核表达载体克隆
- 猪ISG15基因的克隆表达与多克隆抗体的制备
- 2017年
- 本研究从家猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出家猪ISG 15基因,经测序和序列分析,将ISG 15片段与p ET28a质粒连接,构建重组原核表达载体p ET28a-ISG15;经IPTG诱导表达后,通过Ni柱纯化,以获得ISG15蛋白。用纯化的ISG15蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。结果显示,家猪ISG 15基因CD S区长504 bp,编码167个氨基酸,包括两个泛素样结构域(N端第3~75位和C端第81~156位氨基酸肽段)及C末端保守序列为LRLRGG;W estern-blot分析表明重组ISG15蛋白的免疫原性良好;经ELISA测定血清中抗体的效价为1∶102 400。上述研究结果为进一步揭示家猪ISG15蛋白的功能奠定了基础。
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- 关键词：蛋白表达多克隆抗体
- PRV感染PK-15细胞对prv-miR-LLT11a表达时相的影响被引量：1
- 2017年
- 为研究伪狂犬病病毒(PRV)的致病机制,将PRV QBA株按0.5个感染复数(MOI)的剂量接种PK-15细胞,分别在感染后0、1、2、4、6、8、12、24 h收取细胞并提取microRNA(miRNA),采用茎环引物实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测prv-miR-LLT11a的表达时相。RT-q PCR扩增结果显示,熔解曲线峰值单一,扩增曲线拐点清晰。RT-q PCR检测结果表明,PRV QBA株感染PK-15细胞1 h后,prv-miR-LLT11a表达量极显著升高,随后表达量下调,在感染6 h后表达量降至最低,感染8 h后表达量持续急剧升高。
- 杨利石昂李新果李双双时庆贺郑关民王玉国陈陆王川庆
- 关键词：伪狂犬病病毒PCR
- 空间网络视角下的河南省旅游一体化研究
- 2019年
- 从网络社团的视角认识河南省区域旅游发展的空间网络特征,对于深入推进河南省局部区域旅游一体化建设具有重要指导意义。本文基于 2016 年河南省各个旅游节点之间的联系强度数据构建河南省县域旅游流网络,并借助社会网络分析方法与理论,运用 Nirvana and Crewman 算法将河南的 126 个市、县区归类为 6 个社团 , 对各个社团的内部联系和外部联系强度进行了分析。通过计算节点的 P、Z 值,对各节点进行了角色识别,并提出一体化发展战略,以期为河南省旅游发展提供建议。
- 侯贺平阎丽李双双孟慧红
- 关键词：空间网络区域旅游一体化社团发现
- 家猪ISG15重组蛋白及其编码基因、重组质粒、重组菌株和应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体公开一种家猪ISG15重组蛋白及其编码基因、重组质粒、重组菌株和应用。家猪ISG15重组蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。编码所述家猪ISG15重组蛋白的基因，及包含所述基因...
- 陈陆李双双李永涛杨霞常洪涛王新卫赵军王川庆
- 文献传递
