李春秋
- 作品数:36 被引量:39H指数:3
- 供职机构:黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金:黑龙江省博士后科研启动基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”黑龙江省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学文化科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 中国几省市猪萨佩罗病毒巢式RT-PCR检测与遗传进化分析被引量:2
- 2019年
- 为了准确了解猪萨佩罗病毒(Porcine Sapelovirus,PSV)在中国流行情况及遗传进化规律,试验针对PSV 5’-NTR基因利用巢式RT-PCR方法对2015~2017年来自中国部分省市规模化猪场采集的368份样品进行检测,将阳性样品对VP1基因进行克隆、测序、构建进化树。巢式RT^PCR检测结果表明,368份样品中24份样品为阳性,总阳性率为6.52%;8份样品测序成功,序列分析结果表明核苷酸同源性为77.0%~99.7%,推导的氨基酸序列同源性为83.6%~100.0%,遗传进化分析结果显示,中国地区的PSV病毒呈现出遗传多样性,其中3个毒株与德国参考毒株亲缘关系较近,2个毒株与国内外参考毒株的亲缘关系均较远,变异较大。研究丰富了PSV分子流行病学资料,为进一步研究该病毒提供了参考。
- 张备李春秋苏明俊刘秋瑾乔成鹏朱金海孙东波
- 关键词:VP1分子流行病学
- 高校实验动物生物安全管理与建设被引量:5
- 2020年
- 高校是开展实践教学和科学研究的重要基地,其生物实验室可能涉及多种动物性实验,不可避免的存在实验动物生物安全隐患。因此,完善高校实验动物生物安全管理建设对保障广大师生生命安全和身体健康具有重大意义。为进一步完善高校实验动物生物安全管理体系和运行模式,针对我国高校实验动物生物安全管理现状和存在问题进行了分析,借鉴国内外先进的管理经验,依据国家法规条例,对高校实验动物生物安全管理模式进行积极探索,对存在问题提出解决方案,最大可能地减少高校实验动物生物安全隐患的出现,推动我国教育科研事业的健康发展。
- 李春秋孙艺洋王景伟赵建军刘鹏曹迪张旭王建发王春仁武瑞郑家三孙东波
- 关键词:实验动物生物安全安全管理
- 猪源副流感病毒5型SH毒株全基因组测序及分析
- 2021年
- 目的对猪源副流感病毒5型(parainfluenza virus 5,PIV5)SH毒株进行全基因组测序及分析。方法根据GenBank中登录的猪源PIV5基因组序列设计10对引物,采用RT-PCR法对各片段进行扩增、测序,并对获得的PIV5-SH株全基因组序列进行遗传进化性分析。结果 PIV5-SH毒株基因组长15 246 nt,与传统毒株PIV5-W3A核苷酸序列同源性为98.7%。基于全基因组构建的遗传进化树显示,PIV5-SH毒株与韩国犬源PIV5(1168-1)、中国孟加拉虎源PIV5(PIV5-HMZ)、中国东北虎源PIV5(PIV5-SR)及中国小熊猫源PIV5(ZJQ-221)具有较近的亲缘关系,与传统毒株W3A亲缘关系较远。进一步以PIV5 NP、F及HN基因构建遗传进化树显示,PIV5-SH毒株与PIV5 1168-1、PIV5-HMZ、PIV5-SR、PIV5 ZIQ-221和PIV5-CAN毒株亲缘关系近。结论 PIV5不同分离株基因差异较小,表现出一定的遗传稳定性。
- 姜宁郭禹汐李春秋苏明俊孔凡志孙东波
- 关键词:全基因组遗传进化分析
- 猪整合素β3多克隆抗体制备与鉴定
- 2016年
- 为了制备猪整合素β3多克隆抗体,试验利用大肠杆菌原核表达系统,对密码子优化的猪整合素β3基因主要抗原区进行原核表达,表达的重组蛋白纯化后,免疫Balb/c雌性小鼠,采血后分离血清,进一步通过ELISA和Western-blot对制备的猪整合素β3多克隆抗体进行鉴定。结果表明:猪整合素β3基因主要抗原区获得了成功表达,表达蛋白分子质量为102 ku左右,以纯化重组蛋白作为免疫原制备的多克隆抗体效价为1∶12 800,且能识别天然猪整合素β3。
- 高晶王志慧郭东华李春秋苏明俊王欣宇赵喜文王恩雨魏姗刘秋瑾孙东波
- 关键词:整合素Β3原核表达重组蛋白多克隆抗体病毒受体病毒感染
- 猪DC-SIGN真核表达载体构建及介导PEDV感染作用的初步验证
- 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的以腹泻、呕吐、脱水为主要特征的一种肠道传染病...
- 李春秋
- 关键词:PEDV过表达
- 文献传递
- 奶牛腐蹄病坏死杆菌分离鉴定及白细胞毒素基因lktA1序列分析被引量:3
- 2015年
- 为分离纯化奶牛腐蹄病坏死杆菌,分析其与其他菌株的亲缘关系,本研究利用坏死杆菌白细胞毒素特异性引物,对奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品进行了PCR检测,利用厌氧培养基对PCR检测阳性样品进行了坏死杆菌的分离培养,以分离的坏死杆菌基因组DNA为模板,对白细胞毒素基因进行了克隆和序列分析。结果显示,9份奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品PCR检测结果均为阳性,对其中一份样品中的坏死杆菌进行分离培养,获得了纯培养物,命名为bFR13-1。坏死杆菌bFR13-1菌株白细胞毒素基因测序结果显示,与GenBank已发表的H05、A25和B35菌株的白细胞毒素基因在核苷酸水平的同源性分别为98.40%、98.35%和90.79%,推导氨基酸的同源性分别为97.7%、97.6%和89.0%。进化树分析结果显示,坏死杆菌bFR13-1菌株白细胞毒素与H05菌株的同源性最高,bFR13-1菌株与H05菌株和A25菌株呈较近亲缘关系。结果表明,不同坏死杆菌分离株的白细胞毒素呈现一定的变异性,这种变化是否与坏死杆菌致病性相关,值得深入研究。
- 高晶李春秋姚爽张立春王欣宇王志慧赵喜文魏姗王恩雨孙东波武瑞郭东华
- 关键词:奶牛腐蹄病坏死杆菌
- 一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗及其制备方法
- 本发明涉及一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗,包含牛坏死杆菌一种外膜蛋白43kDa OMP、坏死杆菌白细胞毒素截短蛋白PL‑4及坏死杆菌溶血素截短蛋白H2三种蛋白,三种蛋白的用量比为1:1:1。本发明还涉及上述牛坏死杆菌的亚单位...
- 郭东华孙东波李春秋原东伟蒋剑成贺显晶张思瑶王志慧吕思文高晶姚爽肖佳薇汪锋锋王丽娜
- 猪干扰素α-1基因的原核表达与多克隆抗体制备被引量:3
- 2014年
- [目的]利用大肠杆菌原核表达系统对猪干扰素α-1(Po IFNα-1)基因进行表达,制备Po IFNα-1重组蛋白多克隆抗体。[方法]根据Gen Bank发表的Po IFNα-1核苷酸序列,合成密码子优化的Po IFNα-1基因,构建Po IFNα-1基因的p ET-28a原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌后,利用IPTG进行诱导表达。表达的Po IFNα-1重组蛋白纯化后,免疫昆明系小鼠,制备多克隆抗体。采用Western blot技术检测Po IFNα-1重组蛋白的多克隆抗体与天然Po IFNα-1的反应性。[结果]合成的Po IFNα-1基因在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中成功表达,针对Po IFNα-1重组蛋白的多克隆抗体能够识别天然的猪干扰素α-1。[结论]合成的Po IFNα-1基因在大肠杆菌中获得了成功表达,为后续研究奠定了基础。
- 刘娜李春秋高晶耿雨菲王欣宇苏明俊魏姗王志慧王建发武瑞孙东波
- 关键词:原核表达抗体制备
- 异甘草素在制备抗猪流行性腹泻病毒的药物中的应用
- 本公开主要涉及了异甘草素在制备抗猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemic diarrhea virus,PEDV)药物中的应用,属于抗病毒应用领域。利用该药物能够在Vero E6细胞上有效抑制PEDV的复制,能够...
- 孙东波邢晓旭苏明俊李璐李梓键郭东华朱庆贺李春秋王俊
- 2014~2015年黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒的分子流行病学调查被引量:2
- 2016年
- 为了调查黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒流行情况,在2014年5月至2015年4月,在黑龙江牡丹江地区采集40份腹泻犬的粪便拭子样品,利用PCR扩增方法进行鉴定和混合感染检测,进一步做进化树进行分析。检测结果显示,在40份样品中,8份样品为CBoV阳性(20%,8/40);在8份CBoV阳性样品中,与CPV-2、CCoV、CaKV混合感染率分别为37.3%(3/8)、25%(2/8)、25%(2/8)。序列分析表明,8个CBoV毒株的NS1片段在核苷酸水平的同源性为94.2%~100%,在氨基酸水平的同源性为91.7%~100%。进化树分析显示,与韩国、美国、德国和中国香港的CBoV毒株相比,8个中国CBoV毒株表现出遗传多样性。研究揭示了黑龙江牡丹江地区流行的CBoV毒株显示出遗传多样性以及与其他肠道病毒的混合感染情况。
- 姚爽王志慧滕井胜李春秋张思瑶边秀东张立春郭东华