陈琦
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- RNA干扰ATG16L1抑制人胃癌细胞BGC823自噬并促进顺铂诱导的细胞凋亡被引量：2
- 2019年
- [目的]检测RNA干扰自噬相关基因16L1 (autophagy-related gene 16L1,ATG16L1)表达后胃癌细胞的自噬活性,观察在ATG16L1敲减下顺铂(DDP)对胃癌细胞凋亡的影响。[方法]用ATG16L1 siRNA技术构建ATG16L1低表达的人胃癌BGC823细胞株作为干扰组,转染阴性干扰的BGC823细胞作为阴性转染组,未转染的BGC823细胞作为对照组;Western blot检测各组细胞中ATG16L1的表达和自噬标志物微管相关轻链蛋白3(microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3,LC3)及死骨片蛋白1 (sequestosome 1,P62)的表达;免疫荧光观察LC3II情况。CCK-8实验检测DDP处理后各组细胞增殖能力,计算IC50值。经DDP刺激后,流式细胞术检测细胞凋亡,再用Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白表达。最后应用公共数据库Kaplan-Meier对多组胃癌患者mRNA表达谱进行分析,预测ATG16L1的表达水平对患者预后的影响。[结果] ATG16L1 siRNA干扰组较对照组蛋白表达水平明显降低(P<0.001);LC3II水平下降(P<0.01),P62水平上升(P<0.01),并且LC3荧光强度下降(P<0.05)。经DDP诱导后,干扰组细胞增殖明显受抑(P<0.001),细胞凋亡率明显增加(P<0.01);ATG16L1干扰组中促凋亡分子cleaved caspase-3、cleaved caspase-9表达比对照组明显增加(P<0.001,P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P<0.001)。公共数据库Kaplan-Meier表达谱芯片分析结果显示高表达ATG16L1组较低表达组预后差,差异有统计学意义(P=0.001)。[结论] RNA干扰ATG16L1抑制胃癌细胞自噬,并能够明显增强顺铂诱导人胃癌细胞的凋亡,提示靶向干扰ATG16L1抑制细胞自噬后可能通过调控细胞凋亡提高胃癌细胞对化疗药物的敏感性。
- 张玉梅林方方冯凡陈琦刘月琴许文林沈慧玲
- 关键词：自噬胃肿瘤顺铂细胞凋亡
- 钠氢交换蛋白抑制剂Cariporide对MCF-7/ADR细胞化疗敏感性影响机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的肿瘤细胞膜内外pH值的改变对于肿瘤的侵袭、转移密切相关,通过细胞内外的H^+/Na^+交换维持细胞内环境的稳态,细胞的凋亡水平与化疗药物耐药的发生密切相关。本研究观察钠氢交换蛋白1(sodium hydrogen exchange 1,NHE-1)抑制剂Cariporide(CP)对人乳腺癌细胞MCF-7/ADR增殖、凋亡和对多柔比星(adriamycin,ADR)敏感性影响,并探讨其相关作用机制。方法以终浓度分别为3、6、9、12、60和100μg/mL的CP处理MCF-7和MCF-7/ADR细胞48h,以终浓度分别为1、5、50和100μg/mL的ADR以及2种药物联用分别处理MCF-7/ADR细胞24、48h,CCK8法检测其对细胞的增殖影响,Graphpad prism 5分别计算单用及药物联用时的IC_(50),CompuSyn软件计算2种药物的联用指数(CI);采用流式细胞术检测药物单用及联用后对细胞凋亡率的影响;RT-PCR法检测MDR-1、NF-κB等相关核转录因子的表达;蛋白质印迹法检测CD44、MDR-1、NF-κB p65、Caspase-3/9和Bcl-2的表达。结果 CP对乳腺癌细胞有增殖抑制作用,呈剂量及时间依赖性,CP与ADR联用可以明显降低ADR对MCF-7/ADR细胞的IC_(50)值,其值由(82.45±5.86)μg/mL下降至(42.2±2.03)μg/mL,t=7.57,P<0.05。流式细胞术检测结果显示,对照组、单用ADR组、单用CP组、药物联用组细胞的凋亡率分别为(4.02±0.19)%、(6.34±0.39)%、(9.55±0.47)%和(15.12±0.65)%,F=666.2,P<0.001。荧光定量PCR结果表明,单用CP及CP联用ADR组MDR-1、NF-κB mRNA表达均下降。蛋白质印迹法结果显示,单用CP及CP联用ADR耐药相关蛋白CD44、MDR-1表达下调,NF-κB p65表达下调,抑凋亡蛋白Bcl-2表达下降,凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9表达上调。结论 CP可以增加MCF-7/ADR细胞对ADR的敏感性,可能是通过下调耐药相关蛋白的表达,活化凋亡相关蛋白,诱导细胞凋亡,从而有效逆转肿瘤细胞的耐药。
- 陈琦冯凡朱小兰刘月琴苏兆亮许文林
- 关键词：CARIPORIDE增敏逆转耐药
- MicroRNA与乳腺癌干细胞的研究进展
- 2020年
- 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,尽管目前治疗手段的多样性,乳腺癌的复发及转移仍不断增加,使临床治疗遇到瓶颈,乳腺癌干细胞理论的提出为其治疗提供新的思路。MicroRNA作为一种非编码RNA,通过与靶基因mRNA结合影响转录及表达。随着对MicroRNA和乳腺癌干细胞的进一步研究,MicroRNA在乳腺癌干细胞中的功能日益突出,本文就MicroRNA与乳腺癌干细胞的研究进展及相互作用进行论述。
- 熊尚婉陈琦陈琦
- 关键词：MICRORNA乳腺癌干细胞免疫逃逸凋亡
- CD44剪接变异体(CD44v)在肿瘤中的研究进展被引量：5
- 2017年
- CD44是一种黏附性的跨膜受体糖蛋白,根据外显子表达方式可分为CD44标准体(CD44s)和CD44剪接变异体(CD44v)两种。大量研究证实CD44v的异常表达与多种癌症的发生和发展密切相关,尤其是CD44v在转移性肿瘤中的选择性表达及其与细胞骨架的相互作用。由于CD44v存在着多种复杂的剪接变异体形式,拟从结构上对NCBI中的CD44v进行差异序列的全面比较,综合阐述CD44v在不同肿瘤中的研究及其靶标治疗,为进一步研究CD44v的功能提供理论依据。
- 冯凡曹卫平陈琦朱小兰许文林
- 关键词：CD44V选择性剪接同源序列肿瘤
