韩娇
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 供职机构：山西师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：环境科学与工程农业科学生物学更多>>
- 联合浸提法测定土壤有效态镉被引量：9
- 2016年
- 使用联合浸提法测定3种土壤（褐土、棕壤、黑土）有效态重金属Cd,并与DTPA、HCl法比较,探讨联合浸提法测定土壤Cd的可行性。进行盆栽试验,测定小麦全量镉,分析我国北方3种土壤不同方法有效态Cd测定值与小麦吸收Cd的相关性。结果表明,HCl-Cd值在3种土壤间差异较大,联合浸提法和DTPA法Cd测定值在3种土壤间差异较小。联合浸提法比常规方法有效态Cd浸出率高。此外,联合浸提法有效态Cd测定值与土壤Cd添加量有较好相关性,相关系数为0.993~0.999;与常规方法有效态Cd测定值有较好相关性,相关系数为0.899~0.998;与小麦吸收Cd量有较好相关性,相关系数为0.982~0.997。说明联合浸提法适用于测定本研究中3种土壤中有效态镉。
- 郭继斌王莉韩娇王金云
- 关键词：重金属镉土壤
- CRISPR/Cas9系统构建的水稻OsPht基因突变体材料可用于养分转运评价被引量：2
- 2017年
- 【目的】CRISPR/Cas9是细菌和古细菌为免受外来DNA片段侵袭形成的一种适应性免疫系统。CRISPR/Cas9已经被作为一种基因编辑的工具广泛应用到很多动物和植物的基因编辑。磷元素是植物生长过程中必需的营养元素,植物对磷的吸收主要由跨膜磷转运蛋白完成。本研究利用CRISPR/Cas9技术对OryzaJaponicaKitaake水稻中冰叶日中花磷转运蛋白McPht基因的同源体OsPht磷转运蛋白基因进行编辑,构建了McPht转运蛋白基因导入水稻OsPht缺失的突变体,初步验证了该突变体材料的功能。【方法】通过CRISPR/Cas9基因编辑手段,将水稻中与McPht蛋白同源性最高的磷转运蛋白基因进行编辑。首先将待编辑的基因片段连接到U3启动子驱动的pCXUN表达载体上,转化到农杆菌EHA105中,然后通过农杆菌转化到水稻幼胚,将获得的转化后再生T0代株系移栽到田间获得T1代种子,并将T1代株系进行盆栽培养,提取株系叶片基因组DNA用于PCR检测,所有株系PCR产物纯化后进行测序,依据序列变化判定目标基因的编辑位点,并对突变体进行生理指标测定。【结果】1)基因编辑后的类型可分为两类,一类为目标编辑片段20个碱基中后6个碱基缺失,另一类为目标编辑片段20个碱基中后8个碱基缺失或突变。2)编辑位点缺失6个碱基的株系占总突变株系的28.6%,编辑位点缺失8个碱基的株系占总突变株系的42.9%,GT碱基突变株系占总突变株系的28.6%。3)水稻突变体的株高、鲜重、根系活力均小于野生型;根系扫描结果显示水稻突变体的根长、投影面积、表面积和侧根数均大于野生型;Cas-2的叶绿素和可溶性糖含量显著高于野生型,Cas-7的叶绿素和可溶性糖含量小于野生型,但差异不显著。【结论】CRISPR/Cas9基因编辑系统成功将水稻中McPht的同源体OsPht基因进行了编辑,所获得的水稻磷转运蛋白OsPht基因碱基缺失或突变不仅为所编辑基因�
- 韩娇王莉何蕊李伟王冰黄升财孙永伟程宪国
- 关键词：水稻突变体
- 小盐芥TsPIP1;1与TsTIP1;1基因增强转基因水稻耐盐性被引量：5
- 2017年
- 【目的】为更好地了解植物水通道蛋白盐胁迫下的调节作用,对小盐芥质膜内在蛋白Ts PIP1;1及液泡膜内在蛋白Ts TIP1;1在转基因水稻中的盐胁迫生理响应机制进行探究,旨在为水通道蛋白在耐盐作物分子改良育种中的应用提供理论支撑。【方法】以野生型(WT)与T3代转Ts PIP1;1及Ts TIP1;1基因水稻为材料,进行了水培试验,并设置了0、100、200 mmol/L Na Cl处理。处理一周后,分别测定水稻的光合参数、株高、生物量、相对含水量、失水率及钾、钠含量。【结果】在盐胁迫处理下,与野生型相比,转基因水稻的生物量和含水量明显增加,渗透势和失水率显著降低。转Ts PIP1;1及Ts TIP1;1基因水稻根部及地上部的Na^+含量都显著降低,K^+在转基因株系中的累积显著高于野生型,降低了体内Na^+/K^+比,并且能够保持更强的净光合速率、气孔导度、蒸腾速率及水分利用效率。在200 mmol/L Na Cl处理下,与野生型相比,Ts TIP-5、Ts TIP-7及Ts PIP-19的株高分别高出8.2%、11.6%、4.9%;单株干重分别高出17.9%、23.9%、16.9%;地上部Na^+/K^+比分别降低24.3%、24.4%、24.8%;根部Na^+/K^+比分别降低29.6%、27.5%、32.4%;渗透势分别显著降低了18.3%、19.4%、30.3%;相对含水量分别增加了5.8%、5.5%、5.4%;净光合速率分别增加了50.4%、78.5%、56.2%。【结论】Ts PIP1;1及Ts TIP1;1增强了转基因水稻的光合呼吸作用,通过降低植物体内Na^+/K^+比,参与植物细胞的渗透调节,提高了细胞持水能力,促进转基因水稻的生长发育,增强了水稻的耐盐性。
- 李伟韩娇黄升财何蕊王冰程宪国
- 关键词：转基因水稻盐胁迫水通道蛋白
