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家蚕蚕蛹变应原的鉴定、分离与纯化被引量：19: 2006年; 目的鉴定、分离和纯化大造(Dazao)品系家蚕(Bombyxmori)的蚕蛹粗提液中的变应原蛋白质组分,为家蚕变应原的蛋白质组学和功能基因组学深入研究奠定基础。方法采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blotting,鉴定了家蚕蚕蛹粗浸液中变应原蛋白质分子,并通过阴离子交换和凝胶过滤层析分别对家蚕蚕蛹变应原蛋白质进行初步纯化。结果在家蚕蚕蛹粗浸液中含有表观分子量分别为80000及30000的蚕蛹变应原;从家蚕蛹全虫粗提液中初步分离到分子量为30000的蛹变应原蛋白组分。结论分离得到的家蚕蚕蛹变应原蛋白组分可用于系统研究家蚕过敏原蛋白分子的蛋白质组学和功能基因组学。; 张杰刘志刚林格叶湘锋刘瑞涛; 关键词：离子交换层析

家蚕30kD特异性变应原的分析、纯化与质谱鉴定被引量：14: 2007年; 以Coca’s提取液分别提取到不同时期家蚕Bombyx mori的粗浸液，利用SDS-PAGE和Western blotting鉴定其特异性变应原，然后用DEAE-52离子交换层析及切胶纯化出30kD的特异性变应原，再经MALDI—TOF在线联机分析，所得质谱数据进入网站搜索分析。结果显示：1～5龄家蚕均有20条左右蛋白带，其中5龄家蚕有23条蛋白带，主带有11条（82、79、60、51、46、38、32、30、28、24和18kD）。选用家蚕过敏患者阳性血清进行免疫印迹，1-4龄家蚕均显示出82和79kD的特异性变应原；但只有5龄家蚕的30kD蛋白为特异性变应原，通过离子交换层析和经切胶纯化出30kD蛋白，再经MALDI—TOF—MS鉴定该蛋白为外膜蛋白。提示家蚕不同时期抗原成分有所变化，5龄家蚕新出现的30kD蛋白为特异性变应原。; 刘志刚张杰林格; 关键词：家蚕 SDS-PAGE BLOTTING 离子交换层析

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张杰