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超高压结合化学萌发诱导剂对枯草杆菌芽孢的灭活作用被引量：5: 2016年; 采用化学萌发诱导剂(AGFK、肌苷、L-丙氨酸、DPA)来诱导枯草杆菌芽孢萌发,然后用超高压处理将萌发的芽孢杀灭,用平板菌落计数法、分光光度计和相差显微镜检测诱导剂对该芽孢的萌发诱导效果,并用透射电镜观察超高压处理前后芽孢内部结构的变化。结果表明:以上诱导剂能迅速诱导芽孢萌发,使用DPA时,芽孢萌发率约为95%,组合使用DPA和营养素时,芽孢萌发率约为87%,单独使用DPA时萌发率更高,这一特异现象表明目前关于芽孢萌发机制的认识还不完善。萌发后芽孢的内部结构变成了类似营养体的结构,再经压力处理后其内部结构严重受损,超高压结合化学萌发诱导剂能有效杀灭绝大部分芽孢。; 章中孙静杜文斌王一晓; 关键词：超高压芽孢枯草杆菌

芽孢皮层肽聚糖水解物RP-HPLC法分析条件优化: 2017年; 通过试验确定RP-HPLC法分析芽孢皮层肽聚糖水解物的最佳条件如下:在Welch Ultimate AQ-C18色谱柱上,柱温为30℃,流速为1 m L/min,检测波长为206 nm,洗脱时间为120 min,以甲醇和0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(p H=4.31)做流动相,在0 min^5 min时使用100%磷酸盐缓冲溶液,在5 min^120 min时流动相中的甲醇浓度从0梯度增加到30%。结果表明:用RP-HPLC法分析芽孢皮层肽聚糖水解物是可行的,为研究高压热处理下芽孢皮层肽聚糖支架水解机理,并进一步阐明高压热处理杀灭细菌芽孢的机理提供了研究方法支撑。; 杜文斌杨建兴师静孙静章中; 关键词：RP-HPLC 芽孢皮层肽聚糖水解物

芽孢皮层裂解酶的提取与SDS-PAGE分析被引量：3: 2018年; 使用2,6-吡啶二羧酸(DPA)、L-丙氨酸、肌苷等诱导芽孢萌发,从萌发液中提取芽孢皮层裂解酶。提取的芽孢皮层裂解酶经超滤浓缩后进行SDS-PAGE垂直板电泳分析。研究发现:DPA、L-丙氨酸、肌苷以及L-丙氨酸结合肌苷对枯草芽孢杆菌芽孢均有诱导萌发的作用,且DPA诱导枯草芽孢杆菌芽孢萌发效果最好。进行SDS-PAGE电泳时,进样量为15μL,分离胶浓度为10%的凝胶板跑出的蛋白条带分离的较好,凝胶板上有4条蛋白条带,通过蛋白质分子量标准曲线可得出,目标蛋白分子量大约分别为:61.10、48.64、43.25、31.28 k Da。本研究初步提取纯化了皮层裂解酶,为后继进一步提纯皮层裂解酶、研究HPTS对该酶活性和结构的影响提供试验材料,有助于阐明高压热处理下芽孢死亡的机理,推动HPTS技术在食品工业中的应用。; 孙静贺晓光张津瑜杜文斌章中; 关键词：枯草芽孢杆菌芽孢 SDS-PAGE

高温蒸煮结合酶解改性枣渣膳食纤维被引量：18: 2017年; 为探讨高温蒸煮结合纤维素酶酶解改性枣渣水不溶性膳食纤维的工艺。以枣渣为原料,采用高温蒸煮、纤维素酶酶解改性枣渣水不溶性膳食纤维,以水溶性膳食纤维得率为指标,在单因素实验基础上,采用Box-Behnken中心组合设计,通过响应面法优化高温蒸煮结合酶解改性工艺条件。结果表明:枣渣水不溶性膳食纤维经120℃高温蒸煮60 min,纤维素酶改性枣渣水不溶性膳食纤维最佳工艺条件为酶浓度0.55%、p H4.6、料液比1∶27 g/m L、酶解温度43℃,酶解时间2.5 h,在此条件下水溶性膳食纤维得率为20.03%±0.58%,与模型预测值20.37%较为一致。响应面回归方程与实验结果拟合性好,说明此模型合理可靠,可为枣渣水不溶性膳食纤维改性的工业化应用提供一定参考。; 孙静邵佩兰徐明赵宇慧杜文斌贺晓光; 关键词：枣渣不溶性膳食纤维高温蒸煮酶解响应面

荷斯坦牛κ-酪蛋白基因5′和3′侧翼序列多态性研究被引量：1: 2014年; 本试验采用PCR-SSCP技术检测了宁夏荷斯坦牛κ-酪蛋白(κ-casein protein,κ-CN)基因5′和3′侧翼区的遗传多态性。结果表明:κ-CN基因5′和3′侧翼区均存在遗传多态性,5′侧翼区有3种基因型(AA、BB和AB),等位基因频率分别为0.5345、0.4655;3′侧翼区有2种基因型(GG和GT),等位基因频率分别为0.8621、0.1379。κ-CN基因5′侧翼区基因型不符合Hardy-Weinberg平衡(P<0.01),3′侧翼区基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。5′和3′侧翼区的多态信息含量分别为0.3738、0.2095,分别表现为中度多态和低度多态;其杂合度、有效等位基因数分别为0.5019、0.2399和1.9905、1.3120。研究认为κ-CN基因5′侧翼区更适用于分析多态性与生产性能的关系,以及用于数量遗传座位的定位研究。; 黄亮尚海彬魏蕊宁素恒杜文斌张娟; 关键词：荷斯坦牛 PCR-SSCP

超高压导致芽孢亚致死损伤进而提高芽孢热敏感性被引量：3: 2017年; 分别使用150、350、550 MPa的压力在23℃下对枯草杆菌芽孢进行超高压处理,检测处理后芽孢样品的热敏感性、OD_(600)值和2,6-吡啶二羧酸(DPA)释放情况,并进行透射电镜观察。3个压力水平均能快速提高芽孢的热敏感性,150 MPa使得芽孢OD_(600)值降低、DPA显著释放、芽孢皮层明显水解、芽孢显著萌发。然而,使用350 MPa和550 MPa处理后,芽孢OD_(600)值变化和DPA释放不显著、芽孢皮层水解不明显、芽孢萌发不显著。研究结果表明:350 MPa和550 MPa处理导致了芽孢的亚致死损伤,而不是芽孢萌发,这种亚致死损伤增强了芽孢的热敏感性,并可能是高压热处理杀灭芽孢的原因之一。; 孙静张津瑜胡小松张燕杜文斌章中; 关键词：芽孢超高压

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杜文斌