田郡
- 作品数:1 被引量:7H指数:1
- 供职机构:重庆出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:质检公益性行业科研专项项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 流产嗜衣原体TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立被引量:7
- 2015年
- 为建立一种快速、准确检测流产嗜衣原体(C.abortus)Taq Man-MGB荧光定量PCR方法,本研究根据C.abortus主要外膜蛋白基因的特异保守序列设计引物及探针,并优化反应条件,建立了检测C.abortus的荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.6×103拷贝/μL^1.6×107拷贝/μL内具有良好的线性关系,相关系数为0.9999。该方法仅对C.abortus的靶基因扩增呈阳性,而对鹦鹉热嗜衣原体、家畜嗜衣原体、鼠衣原体、沙眼衣原体、肺炎嗜衣原体、猪源衣原体核酸扩增结果均为阴性,特异性强;其最低检出限为1.6拷贝/μL;组内和组间重复性试验变异系数均小于3%,具有良好的重复性。利用建立的方法和普通PCR方法同时对225份临床样品进行检测,结果显示荧光定量PCR检出率比普通PCR高4.5%,表现较高的灵敏度和准确性。本研究建立的方法对C.abortus的临床鉴别检测和疾病诊断具有重要意义。
- 保雨聂福平王昱杨俊袁曾壮叶自霞刘亚娟张姜琳吴蕊田郡王国民刘力李应国
- 关键词:荧光定量PCR