刘亚娟
- 作品数：8 被引量：27H指数：4
- 供职机构：重庆出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 家畜嗜衣原体TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 为快速检测家畜嗜衣原体,选取家畜嗜衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因的高度保守区域,设计特异性引物和探针,通过对反应条件的优化,建立家畜嗜衣原体TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法的最低检测限为2.8×10copies/μL,在2.8×102~2.8×106 copies/μL范围内具有良好的线性关系,其标准曲线方程为y=-3.281 5x+41.396,线性相关系数r2=0.999 4,扩增效率为101.7%;该方法可特异性检测家畜嗜衣原体,对肺炎嗜衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热嗜衣原体、流产嗜衣原体等6种动物衣原体无交叉反应,特异性好;其批间重复试验和批内重复试验的变异系数分别为0.170 2%~0.467 2%、0.331 4%~2.796%,重复性良好。采用本试验建立的方法与OIE推荐的方法进行比较,二者的结果表现出良好的符合率。该方法的建立为家畜嗜衣原体的早期检测和流行病学调查提供了有效的检测手段。
- 叶自霞杨俊聂福平王昱袁曾壮李应国王国民李贤良保雨刘亚娟刘力
- 关键词：荧光定量PCR
- 动物源性葡萄球菌多重耐药基因cfr研究进展被引量：5
- 2015年
- 葡萄球菌是畜禽化脓性感染、败血症或脓毒败血症的主要病原体,常引起奶牛乳腺炎、禽类葡萄球菌病、羔蜱脓毒症等疾病。由于抗生素的滥用,出现了大量耐药性葡萄球菌,其中携带多重耐药基因cfr的葡萄球菌广泛存在于在畜牧生产中。该类葡萄球菌通过cfr的编码产物作用于核糖体23SrRNA腺苷2503的C8位点,对氯霉素类、林可酰胺类、恶唑烷酮类、截短侧耳素类和链阳菌素A类耐药,为动物疫病防控带来了巨大挑战。论文综述了动物源性葡萄球菌中cfr的分布情况、耐药机制、基因环境及检测技术等方面的研究进展,为深入研究其传播机制、研发新型抗葡萄球菌药物及建立切实有效的cfr多抗预测预警体系提供参考。
- 保雨刘亚娟刘力彭祥伟张昌莲
- 关键词：葡萄球菌CFR耐药机制
- 猪六种重要病原寡核苷酸芯片检测方法的初步建立被引量：1
- 2016年
- 为建立同时鉴别检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）、副猪嗜血杆菌（HPS）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪肺炎支原体（Mhp）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪瘟病毒（CSFV）这6种病原的寡核苷酸芯片方法,根据这6种病原的特异保守序列,设计了6对特异性引物和探针,建立多重PCR体系,优化杂交参数,进行方法评估。结果显示,该方法检测APP、HPS、Mhp、PCV2、PRRSV及CSFV的灵敏度分别为5.8×10^2copies/L、7.8×10^3copies/L、6.8×10^3copies/L、6.3×10^2copies/L、4.8×10^3copies/L、5.5×10^2copies/L,且与猪源伪狂犬病病毒、猪细小病毒、日本乙型脑炎病毒、猪水疱病病毒、水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、蓝舌病病毒、小反刍兽疫病毒及沙门菌等9种病原无交叉反应。用建立的多重PCR对186份临床样本的检测结果显示,单一感染率为18.3%（34/186）,混合感染率为5.9%（11/186）,与测序验证完全一致。该方法为多种病原的流行病学调查和临床诊断提供了一种快速、高通量的检测手段。
- 保雨聂福平杨俊王昱刘亚娟王国民李贤良李应国张超刘力
- 关键词：寡核苷酸芯片HPSMHPPCV2PRRSVCSFV
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌LAMP方法的建立被引量：8
- 2016年
- 为建立快速检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）的鉴别方法，衣研究根据APP ApxIVA基因的保守区设计6条环介导等温扩增（LAMP）引物，利用Loopamp Realtime Turbidimeter LA-320c实时浊度仪对反应体系和条件进行优化，建立了APP的LAMP方法。结果显示：该方法在64℃下反应15rainDNA即可出现扩增，扩增后2～3min内即可判定结果，最低检测限为0．307ng／L，具有良好的重复性及稳定性，与其他病原菌无交叉反应，同时，试验结果可实现肉眼可视化观察。采用建立的LAMP方法与SN／T14472011标准公布的方法同时对36份临床疑似APP样品进行检测分析，结果显示：APP阳性10份，阴性26份，两种方法的符合率为100％。本研究建立的方法为防止猪传染性胸膜肺炎的传播提供了有效的检测手段。
- 刘亚娟聂福平杨俊王昱石宝石保雨叶自霞王国民李贤良李应国肖进文刘力
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌
- 沙门菌夹心DNA杂交检测方法的建立被引量：3
- 2015年
- 为建立简便快速、特异检测沙门菌的方法,根据沙门菌invA基因序列,分别设计特异的捕获探针和检测探针,通过探针与目标rRNA结合,优化反应条件,建立了检测沙门菌的夹心DNA杂交方法。该方法在1.5h内即可完成全过程检测,加入TMB显色液可直接肉眼观察结果或采用酶标仪测定D450nm值判定结果。该方法对其他相关病原菌均无特异性反应,最低检测限为1.2CFU/mL,具有良好的精确度。批内变异系数在16.53%~17.97%之间,批间变异系数在16.33%~22.10%之间。本方法的建立为沙门菌的大批量、快速检测和防控提供了新的技术手段。
- 刘亚娟聂福平张超杨俊王昱石宝石保雨王国民李贤良李应国刘力
- 关键词：沙门菌
- 流产嗜衣原体TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立被引量：7
- 2015年
- 为建立一种快速、准确检测流产嗜衣原体(C.abortus)Taq Man-MGB荧光定量PCR方法,本研究根据C.abortus主要外膜蛋白基因的特异保守序列设计引物及探针,并优化反应条件,建立了检测C.abortus的荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.6×103拷贝/μL^1.6×107拷贝/μL内具有良好的线性关系,相关系数为0.9999。该方法仅对C.abortus的靶基因扩增呈阳性,而对鹦鹉热嗜衣原体、家畜嗜衣原体、鼠衣原体、沙眼衣原体、肺炎嗜衣原体、猪源衣原体核酸扩增结果均为阴性,特异性强;其最低检出限为1.6拷贝/μL;组内和组间重复性试验变异系数均小于3%,具有良好的重复性。利用建立的方法和普通PCR方法同时对225份临床样品进行检测,结果显示荧光定量PCR检出率比普通PCR高4.5%,表现较高的灵敏度和准确性。本研究建立的方法对C.abortus的临床鉴别检测和疾病诊断具有重要意义。
- 保雨聂福平王昱杨俊袁曾壮叶自霞刘亚娟张姜琳吴蕊田郡王国民刘力李应国
- 关键词：荧光定量PCR
- 维生素D通过Wnt信号通路对肠道发育调控机制的研究进展被引量：2
- 2015年
- Wnt信号通路广泛存在于脊椎和无脊椎动物体内,对动物机体各组织器官发育,如肝脏、肾脏、肠道等起着至关重要的作用。维生素D是一组脂溶性类固醇衍生物,维生素D不直接作用于靶器官,而是通过与维生素D受体(VDR)结合从而发挥其生物学效应。近年来研究表明,VDR可以通过影响Wnt信号通路的传导进而影响肠道发育,本文就VDR对Wnt信号通路的影响、Wnt信号通路对肠道发育的调控机制等方面作一综述,以期为Wnt信号通路在肠道发育调控研究提供参考。
- 石宝石徐玲张小龙赖星刘亚娟唐志如
- 关键词：WNT信号通路肠道发育维生素D受体
- 宿主miRNA调节沙门氏菌感染的研究进展被引量：1
- 2015年
- Micro RNAs（mi RNA）是由真核细胞表达的一类长约19 nt～25 nt的内源性非编码小RNA分子,在调控宿主转录后的基因表达起着关键作用,为免疫细胞中的关键分子。在动物、植物以及病毒中均能够检测到mi RNA的存在,通过mi RBase数据库查到目前为止发现的mi RNA共有28645种,其中已经确定的小鼠mi RNA有1 000多种,
- 刘亚娟保雨彭祥伟刘力石宝石
- 关键词：沙门氏菌感染宿主真核细胞表达小RNA免疫细胞非编码
