陈国栋
- 作品数：7 被引量：21H指数：2
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划甘肃省科技重大专项计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 不同条件下BHK-21细胞生长状态比较及口蹄疫病毒生产过程中部分条件的优化
- 口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。消灭控制FMD 已成为世界各国共同关注的问题。疫苗为有效预防口蹄疫提供了重要技术手段。我国和世界大多数采用接种疫苗来防治口蹄疫的...
- 陈国栋贾宁刘英
- 关键词：BHK-21细胞口蹄疫病毒细胞鉴定
- 口蹄疫病毒部分免疫功能肽段的合成、鉴定及免疫功能评价
- 2015年
- 利用微波多肽合成仪Liberty,合成O型口蹄疫病毒VP1 140～160和200～213氨基酸序列的两条肽段,并用高压液相色谱仪及质谱分析仪就合成的多肽片段进行分析纯化和鉴定;将合成的多肽片段作为半抗原与载体蛋白BSA偶联,免疫小鼠,进行血清制备和抗体效价测定.结果表明：成功合成了口蹄疫2条免疫功能短肽,其纯度均达到80%以上.半抗原成功与载体蛋白偶联;小鼠抗血清经过抗体效价检测证明半抗原与载体蛋白偶联组的抗体水平高于其余2个对照组,但是达不到免疫保护的水平.同时说明Liberty是一种操作简单、方便,合成效率高的多肽合成仪,可高效合成研究用多肽.
- 龚真莉蒋韬祁淑芸陈国栋李勇刘艳红
- 关键词：口蹄疫病毒
- 口蹄疫病毒P1+2A基因真核表达载体的构建被引量：11
- 2006年
- 通过RT-PCR方法获得了口蹄疫病毒O型,编号为OF3毒的P1+2A区的目的基因,并将其克隆到克隆载体pMD18-T上,再根据表达载体pQE-Trisystem的特性及酶切位点设计合适的表达引物.由表达引物通过PCR技术从克隆载体上扩增出带有特定酶切位点的目的片段,再对载体和目的片段进行酶切处理,处理后由T4 DNA连接酶将二者连接.通过PCR及酶切鉴定,结果证明口蹄疫病毒目的基因片段已被正确克隆到表达载体pQE-Trisystem上.
- 龚真莉刘湘涛刘磊尚佑军尹双辉田宏郑海学陈国栋
- 关键词：口蹄疫病毒
- 猪瘟的流行病学特点、诊断与控制措施被引量：8
- 2007年
- 猪瘟是一种猪的高度接触传染的病毒性疾病,严重威胁养猪事业的发展,是我国猪的四大疫病之一。我国目前猪瘟发生的原因很多,造成了巨大的经济损失。本文针对我国的疫病现状,参照欧洲等发达国家的控制措施,对猪瘟的流行病学特点、诊断及控制措施等方面做一较为全面系统的介绍,为有效控制猪瘟,研究改进猪瘟疫苗和认真制定执行控制和消灭猪瘟的长期规划提供资料。
- 龚真莉刘光远陈国栋
- 关键词：猪瘟病毒流行病学特点
- 口蹄疫病毒OH株结构蛋白基因VP1的克隆与表达
- 2006年
- 采用RT-PCR方法扩增获得了O型口蹄疫病毒的主要免疫原VP1基因,将其插入pMD18-T载体进行序列分析,结果表明,所获得的基因片段含有完整的FMDV结构蛋白VP1编码区。根据表达载体pQE-Trisystem的克隆位点序列和该VPl基因片段的末端序列设计了1对表达引物,以重组pMD-T-VP1阳性质粒为模板,扩增获得了VP1基因,通过酶切将其克隆至表达载体pQE-Trisystem上。经测序证实,重组表达质粒所含的外源基因VP1编码框正确无误。将重组表达质粒pQE-VP1转化至大肠埃希氏菌M15,通过IPTG诱导促使VP1基因高效表达,SDS- PAGE和Western-blot分析表明,表达产物大小与预期的结果(26 ku)一致,且具有良好的反应原性。以2 mmol／L IPTG诱导表达5 h时表达量最高,其中70％-80％的目的蛋白存在于菌体裂解后的上清中,表明外源基因VP1主要以可溶性方式表达。
- 龚真莉刘湘涛尚佑军田宏吴锦艳尹双辉陈国栋
- 关键词：口蹄疫病毒VP1基因基因克隆
- 口蹄疫病毒P1+2A基因在BHK–21细胞中的表达被引量：2
- 2006年
- 本研究将已构建好的、包含口蹄疫病毒P1+2A基因的重组表达质粒pQE-Tri/P1+2A经质脂体2000转染哺乳动物细胞BHK-21,转染后一定时间进行检测。通过SDS-PAGE、Western-blotting、荧光抗体染色、ELISA等检测方法表明,FMDVP1+2A基因片段在BHK-21细胞中成功表达,表达的蛋白能被口蹄疫阳性血清所识别而且具有良好的生物学活性。这一结果的取得,为进一步研制新型口蹄疫基因工疫苗及其配套诊断试剂奠定了基础。
- 龚真莉刘湘涛田宏吴锦艳代兴国尚佑军陈国栋
- 关键词：口蹄疫病毒
- 不同条件下BHK-21细胞生长状态比较及口蹄疫病毒生产过程中部分条件的优化
- <正>口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。消灭控制FMD已成为世界各国共同关注的问题。疫苗为有效预防口蹄疫提供了重要技术手段。我国和世界大多数采用接种疫苗来防治口蹄...
- 陈国栋贾宁刘英
- 关键词：BHK-21细胞口蹄疫病毒细胞鉴定
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