尹双辉
- 作品数：175 被引量：292H指数：8
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家肉羊产业技术体系建设项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- 小反刍兽疫病毒H蛋白的表达及间接ELISA方法的建立被引量：6
- 2016年
- 利用原核表达系统表达了小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血凝素蛋白(H)作为ELISA包被抗原,建立了PPR抗体检测的间接ELISA方法,并对所建立方法的相关条件进行了优化。优化结果显示:抗原的最佳包被质量浓度为20mg/L;血清最佳稀释度为1∶80;酶标二抗的最佳浓度为1∶20 000;抗原抗体反应时间和酶标二抗孵育时间均为45min。批内及批间重复试验结果变异系数均小于10%,说明该方法具有较好的可重复性。检测羊口疮、羊痘、蓝舌病和山羊支原体血清结果均为阴性,说明该方法具有良好的特异性。检测临床血清样品80份,并与国外c-ELISA试剂盒比较,符合率为93.75%。因此,本方法可以用于小反刍兽疫的临床血清抗体检测及流行病学调查。
- 栾志舫陈妍吴锦艳王光祥田宏尹双辉杨顺利尚佑军张志东刘湘涛
- 关键词：小反刍兽疫原核表达间接酶联免疫吸附试验
- 一种用于检测羊传染性脓疱皮炎病毒的试剂盒及其检测方法
- 本发明提供了一种用于检测羊传染性脓疱皮炎病毒的检测方法，通过设计一对引物和一条探针对样品的DNA模板进行实时荧光定量PCR检测，本发明还提供了利用上述检测方法检测羊传染性脓疱皮炎病毒的试剂盒。本发明针对ORFV的保守区域...
- 刘湘涛田宏吴锦艳陈妍尚佑军张克山尹双辉王光祥杨顺利刘永杰
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体
- 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体，编码所述抗体的核苷酸序列为：SEQ ID NO.8。本发明的效果在于：利用噬菌体展示技术构建PEDV M蛋白双峰驼源免疫文库，筛选获得8株来自双峰驼IgG重链抗体高变...
- 尹双辉杨顺利尚佑军蔡建平刘湘涛
- 抗口蹄疫AsiaI型病毒的双峰驼VHH重链抗体及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种抗口蹄疫Asia I型病毒的双峰驼VHH重链抗体及其制备方法和用途，属于生物技术领域。本发明首次利用重组的Asia I型病毒样颗粒抗原免疫双峰驼，利用噬菌体展示技术建立Asia I VHH免疫抗体库，筛选...
- 刘湘涛尹双辉杨顺利尚佑军孙世琪靳野田宏周广清
- 文献传递
- 一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体
- 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白特异性重链抗体，编码所述抗体的核苷酸序列为：SEQIDNO.1，SEQIDNO.2,SEQIDNO.3，SEQIDNO.4，SEQIDNO.5，SEQIDNO.6，SEQIDNO.7...
- 尹双辉杨顺利尚佑军蔡建平刘湘涛
- 猪圆环病毒2型的全基因克隆和序列分析
- 2010年
- 参考GenBank中发表的猪圆环病毒2型（PCV-2）全基因序列,设计一对PCR引物,从病料中扩增获得4株PCV-2的全基因组序列,分别命名为SDNY-PCV-2、ShD-PCV-2、HBbd-PCV-2、GSLN-PCV-2,经测序确定长度均为1 767 bp。应用DNA Star序列分析表明,4个PCV-2分离株与国外部分分离株的核苷酸序列同源性达95.5%-99.8%,与PCV-1毒株的序列同源性为76.2%-77.6%。与国内外部分分离毒株序列进化树分析表明,4个PCV-2分离毒株处于不同分支中,存在一定差异。
- 杨顺利尹双辉杨亚民刘湘涛
- 关键词：猪圆环病毒2型
- 一种猪瘟病毒血清总抗体固相阻断ELISA试剂盒所用抗原的制备方法
- 本发明公开了一种猪瘟病毒血清总抗体固相阻断ELISA试剂盒所用抗原的制备方法，属于生物领域，方法是将CSFV疫苗株C‑株细胞培养抗原灭活、浓缩、不同截留分子量层析柱纯化全抗原，稳定包被酶标板作为检测抗原，结合辣根过氧化物...
- 尹双辉杨顺利尚佑军吴锦艳袁莉刘湘涛蔡建平
- 文献传递
- 一种SVA中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒
- 本发明属于生物技术领域，涉及兽用诊断技术领域，具体的公开了一种猪塞内卡病毒中和抗体液相阻断ELISA试剂盒，所述试剂盒含猪塞内卡病毒单域抗体以及配套的检测试剂，所述猪塞内卡病毒单域抗体还可以是单域抗体的抗原结合片段，所述...
- 郭慧琛穆素雨孙世琪潘颂佳张韵尹双辉白满元吴金恩滕志东周静静丁耀忠董虎
- 抗O型口蹄疫病毒特异性单域抗体及其重组表达载体
- 本发明公开了一种抗O型口蹄疫病毒特异性单域抗体及其重组表达载体，该抗O型口蹄疫病毒特异性单域抗体具有核苷酸序列：SEQ ID NO 1或SEQ ID NO 2。本发明以O型口蹄疫病毒灭活疫苗免疫双峰驼，利用噬菌体展示技术...
- 刘湘涛尹双辉杨顺利尚佑军何继军郭建宏靳野
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及病毒拯救被引量：5
- 2011年
- 用PCR法扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)全长基因组。将全基因组插入到真核生物表达载体PcDNA3.1的多克隆位点中,获得单拷贝重组质粒P-PCV2和串连双拷贝重组质粒p-2PCV2,将所得质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经7次连续传代后,间接免疫荧光试验显示在细胞中含有病毒抗原。提取mRNA后经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录。免疫小鼠后,对免疫后不同天数小鼠的血清用ELISA检测,结果到免疫后35 d病毒几乎都能检测到衣壳蛋白特异性抗体,小鼠致死后在其体内也能检测到病毒DNA。结果表明,所构建的2种重组质粒均可表达并在体外组装出有感染性PCV2病毒粒子。为进行PCV2分子特性、疫苗免疫及致病机理研究打下了基础。
- 杨顺利尹双辉沈小燕尚佑军刘湘涛
- 关键词：猪圆环病毒2型感染性克隆病毒拯救
