刘亚东
- 作品数：12 被引量：43H指数：4
- 供职机构：四川农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 一种基于DMEM的霉菌固体培养基及其制备方法
- 本发明公开了一种基于DMEM的霉菌固体培养基及其制备方法，该培养基由以下原料制备而成：琼脂粉3g；氯化钠0.5‑1g；蒸馏水或超纯水150mL；DMEM培养液50‑100mL；葡萄糖0.175‑0.35g，双抗2‑3mL...
- 杨泽晓王印姚学萍李岩耿毅蒙正群张晗刘亚东徐秋梅罗怡琳周丽军
- 文献传递
- 基于TEM-PCR和基因芯片检测猪病毒性疾病的方法
- 本发明公开了一种基于TEM-PCR和基因芯片检测猪病毒性疾病的方法，依据靶序列富集多重PCR，采用4对特异性的套式PCR引物和探针，并在各内引物的5’端分别加上能被一对通用引物识别的标签序列。本发明克服了传统PCR方法的...
- 王印彭善珍杨泽晓姚学萍邬旭龙张鹏飞冷伊依肖璐任梅渗曾相杰罗忠永胡凌林星宇张博刘亚东蒙正群李桂黎王波
- 文献传递
- 一株牛源肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定与耐药基因型检测被引量：21
- 2017年
- 从病死犊牛肺脏组织中分离到一株革兰阴性短杆菌,进行了细菌分离纯化、生化试验、16SrDNA测序鉴定、小鼠致病性试验、药敏试验,及碳青霉烯类酶与产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)等7种耐药基因的PCR检测。结果鉴定该菌为肺炎克雷伯氏菌,其16S rDNA扩增序列与GenBank中肺炎克雷伯氏菌同源性达99%。对小鼠致病性强。该菌分离株对氨苄西林、头孢呋辛、复方新诺明、红霉素耐药,而对碳青霉烯类、第四代头孢等受试药物均为敏感。耐药基因PCR检测仅扩增出约862 bp的SHV基因片段,与公布的SHV-1基因序列同源性达99.3%。该牛源克雷伯氏菌分离株耐药表型与耐药基因检测结果一致。
- 蒙正群冷依伊任梅渗刘亚东王印姚学萍杨泽晓
- 关键词：肺炎克雷伯氏菌耐药基因
- 鸡柏氏禽刺螨感染的初步研究
- 2017年
- 为探索四川某鸡场近年来肉鸡每年夏季均发生以腹部、腿部皮肤出现丘疹与痂皮为特征性病变的疫病病因,根据送检病鸡的临床症状、剖检病变和疾病流行特点进行初步诊断,并采用常规实验室诊断方法和PCR技术进行寄生虫检查、细菌分离鉴定、鉴别诊断和治疗的初步研究。结果显示,从病鸡体表检查到的禽刺螨为柏氏禽刺螨,PCR扩增其线粒体细胞色素氧化酶亚单位1(CO 1)基因的576 bp大小靶片段与柏氏禽刺螨OB株核苷酸序列的同源性为99%;同时从丘疹病变组织中分离到1株阿尼蒂斯葡萄球菌,该葡萄球菌分离株不致死昆明小鼠,耐受青霉素、阿莫西林、环丙沙星、头孢他啶、复方新诺明、卡那霉素和强力霉素等13种受试药物;确定此疫病由鸡柏氏禽刺螨感染引起,灭鼠、杀螨和敏感药物抗菌措施具有良好防治效果。这是国内鸡发生柏氏禽刺螨感染的首次报道,为鸡禽刺螨感染的防控及相关研究提供了科学参考。
- 杨泽晓刘亚东李俐睿姚学萍王印周丽军蒙正群罗怡琳李岩
- 关键词：皮炎葡萄球菌
- 兔出血症病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2017年
- 为建立快速检测兔出血症病毒(RHDV)的TaqMan荧光定量PCR方法,根据RHDV VP60基因保守序列设计1对特异性引物和1条探针,进行条件优化,检测重复性、敏感性和特异性,建立了RHDV TaqMan荧光定量PCR方法。结果显示,标准品浓度在2.8×10~6~2.8×10~2 copies/L范围内具有良好的线性关系,最低可检测到2.8×10~1copies/L的标准品阳性质粒,变异系数小于2%。结果表明,建立的TaqMan荧光定量PCR方法的特异性、敏感性、重复性均达到试验设计要求,能快速检测临床样品中的RHDV,为我国RHDV的检测及其定量检测的相关研究提供了一种可靠的技术工具。
- 蒙正群李桂黎周丽军冷依伊罗怡琳刘亚东王印姚学萍杨泽晓
- 关键词：兔出血症病毒TAQMAN荧光定量PCR
- 一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法
- 本发明公开了一种快速检测非洲猪瘟病毒环介导等温扩增的方法，包括LAMP最佳反应体系为25μL：1μL8UBstDNA聚合酶，2.5μL10×ThermoPolbuffer缓冲液，6μL2.5mMeachdNTPs，4μL...
- 王印邬旭龙杨泽晓姚学萍张鹏飞姜睿姣肖璐张博刘亚东冷伊依胡凌林星宇曾相杰罗忠永任梅渗蒙正群
- 文献传递
- 基于牛源布鲁氏菌外膜蛋白胶体金试纸条的研制
- 布鲁氏菌病(Brucellosis)是一种发病率较高的人畜共患性疾病，其对公共卫生造成严重的影响，故而对于该菌的检测及防控显得尤为重要。为了探索布鲁氏菌快速检导纯化为基础，进行了测技术，本研究以布鲁氏菌外膜蛋白诱牛源布鲁...
- 刘亚东
- 关键词：布鲁氏菌外膜蛋白多克隆抗体胶体金试纸条
- 文献传递
- 一种新型同时检测6种猪病毒病简化靶序列富集多重PCR的建立和初步应用被引量：1
- 2016年
- 为建立一种新型同时检测6种猪常见病的方法,针对猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪细小病毒(PPV)的保守基因,设计6对特异引物,在引物的5′端加上一段非同源性标签序列,再设计1对可识别标签序列的超级引物。通过优化反应条件,建立了6种猪常见病毒的简化靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)检测方法。灵敏度试验结果显示,该方法对PRV、JEV、CSFV、PCV2、PRRSV、PPV核酸的最低检测限度分别为4.36×103、2.21×103、2.69×103、3.18×103、2.63×104、3.12×104copies/L,而单重PCR检测的最低限度分别为1.3×101、2.59×102、8.03×101、3.29×101、2.65×101、2.45×102copies/L。该方法对54份临床样本的检测结果与国标单重PCR检测结果的一致性为94.9%。本试验建立的方法特异、灵敏、操作简便且成本低廉,对这6种猪病常见病原的同时检测有一定的参考意义。
- 肖璐邬旭龙王印杨泽晓姚学萍任梅渗张鹏飞冷依伊张博刘亚东蒙正群
- 关键词：猪伪狂犬病病毒猪瘟病毒猪圆环病毒2型猪繁殖与呼吸综合征病毒猪细小病毒
- 兔出血症病毒与兔出血症病毒2型复合RT-PCR检测方法的初步研究被引量：8
- 2016年
- 为建立用于兔出血症病毒(RHDV)与兔出血症病毒2型(RHDV2)鉴别诊断的检测方法。根据Gen Bank已公布的RHDV和RHDV2的VP60基因,设计合成6对特异性引物和10条搭桥引物,采用RT-PCR和搭桥PCR技术分别获取RHDV和RHDV2的VP60基因中保守区片段,构建重组质粒p MD-19T-RHDV2、p MD-19T-RHDV441和p MD-19T-RHDV294,并以其为模板,经过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及人工感染RHDV样品和临床样品的应用,对RHDV与RHDV2的复合RT-PCR检测方法进行了初步研究。结果显示,建立的RHDV与RHDV2复合RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可分别扩增出RHDV和RHDV2的VP60保守区基因片段大小为294 bp和435 bp,RHDV与RHDV2的检测限度分别为160和230个拷贝的靶基因片段,而p GM-T-EBHSV(已构建)、兔巴氏杆菌、兔源大肠杆菌和沙门菌等病原的检测结果均为阴性。样品检测结果显示,人工感染样品的RHDV检出率为100%(5/5),30份临床检样RHDV和RHDV2检测结果均为阴性。
- 杨泽晓赵希仑李岩姚学萍王印刘亚东蒙正群耿毅白瑜
- 关键词：兔出血症病毒RT-PCR
- 一株鹅源多杀性巴氏杆菌强毒株的分离鉴定及其血清型鉴定相关基因的克隆被引量：5
- 2016年
- 为探索某鹅场鹅巴氏杆菌病疫情发生的原因,采集初诊为鹅巴氏杆菌感染病例的肝脏、心脏等样品进行细菌分离纯化,经过染色镜检、培养特性、生化试验、种与血清型PCR鉴定、致病性试验和药敏试验等进行鉴定,并根据Gen Bank中多杀性巴氏杆菌血清型相关基因设计引物进行其血清型相关基因的克隆分析。结果显示,分离到1株荚膜A型鹅源多杀性巴氏杆菌,属于多杀亚种,血清型Ⅰ型,具有较强致病性,对实验小鼠最小致死量为5 cfu。该分离菌株具有多重耐药性,仅对头孢三嗪、头孢噻吩、头孢他啶、头孢唑肟和氟苯尼考5种药物敏感。成功克隆的该分离菌株荚膜合成相关基因hya D-hya C的开放阅读框4 155 bp,与已发布基因序列同源性高达99%;血清型Ⅰ型PCR的扩增基因片段303 bp,与巴氏杆菌C48-1株扩增基因片段序列完全相同。综上,该株血清型Ⅰ型荚膜A型的鹅源多杀性巴氏杆菌强毒株,是鹅场疫情发生的病原,克隆的荚膜合成相关基因和菌体血清型特异性基因遗传相对稳定。
- 杨泽晓刘常钰王印姚学萍邬旭龙王波李桂黎蒙正群刘亚东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌血清型PCR鉴定
