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排序方式：

抗菌肽CM与血管内皮生长因子VEGF_(121)在大肠杆菌中表达及鉴定被引量：2: 2010年; 目的:构建和表达人VEGF121的基因工程菌,为肿瘤血管的靶向治疗提供实验数据。方法:通过PCR引物延伸的方法,获得SUMO-CM-VEGF121融合基因;将该融合基因与原核表达载体pET22b连接后转化至Rosetta-gami(DE3)宿主细胞中,通过IPTG诱导获得可溶性表达。将融合蛋白经DEAE阴离子交换层析、Ni-NTA和分子筛等方法进行纯化,用SUMO酶切除分子伴侣SUMO后,最终获得融合蛋白CM-VEGF121。结果:DNA测序,设计合成的SUMO-CM-VEGF121融合基因为774bp;所构建的表达菌株Rosetta-gami(DE3)/pET22b-SUMO-CM-VEGF121在20℃诱导24h可溶性最好,其可溶性表达为菌体可溶性蛋白的21%。Westernblotting检测该表达产物与人VEGF单克隆抗体具有特异性结合能力。结论:原核表达载体pET22b和Rosetta-gami宿主菌为CM-VEGF121最合适的条件,解决了其表达量低和不可溶问题。; 王会岩尹海燕尹翌秋刘孝菊赵宏鑫秦玉侠刘敏李校堃; 关键词：血管内皮生长因子融合蛋白纯化

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尹翌秋