许程剑
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：新疆生产建设兵团博士基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 核酸疫苗的运送载体-减毒鼠伤寒沙门氏菌被引量：6
- 2005年
- 以染色体-质粒平衡致死系统为特征的减毒鼠伤寒沙门氏菌是一种有效的基因递呈载体,突变菌体通过入侵到宿主的派伊尔氏结,进而被抗原递呈细胞如树突状细胞和巨噬细胞吞噬,最终将突变菌体携带的外原基因导入真核细胞并在其中表达,从而诱导机体产生针对外原基因的黏膜、体液和细胞免疫应答,期间,减毒沙门氏菌起到免疫佐剂的作用。这为发展高效免疫,低成本的口服活疫苗提供了一个新的思路。文章着重就沙门氏菌的减毒基因?平衡致死系统以及免疫应答的机制等做以综述。
- 武军元许程剑陈创夫
- 关键词：减毒沙门氏菌免疫
- 产毒素大肠杆菌LTB-K99融合基因的构建被引量：3
- 2006年
- 利用PCR技术从原始菌种中扩增得到K99和LTB基因,将K99和LTB基因连接起来,构建了LTB-K99融合基因。融合基因克隆到pBS-T载体上,转化大肠杆菌top10,经Bam HI和Xho I双酶切鉴定重组质粒。测序分析结果表明,该融合基因有正确的阅读框,为以后转入表达载体的构建奠定了基础。
- 许程剑陈创夫武军元王琦张金波刘辉
- 关键词：LTB基因融合基因
- 利用搭桥PCR法实现轮状病毒VP7表位片段的重组
- 2005年
- 选择了RV VP7的3个高度保守可诱发高水平体液免疫反应的中和性抗原表位,人工合成了这3个表位片段。采用了一种不需要限制性内切酶和连接酶的重组DNA方法—搭桥PCR法,方便快速地构建了轮状病毒VP7蛋白的重组表位基因,将其T/A克隆入PBS-T载体,经过测序与报道序列同源性达100%。结果表明:搭桥法PCR简单易行,快速准确,尤其是在构建2个或多个小基因片段的融合时,比酶切、连接方法更具优越性。
- 王琦陈创夫武冬梅许程剑史芳芳张金波祝建波
- 新疆绵羊种布鲁氏菌GroEL基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2005年
- 参考牛种布鲁氏菌的GroEL(热休克蛋白)基因设计引物,扩增出新疆绵羊种布鲁氏菌GroEL基因片段,将其片段克隆到T载体上测序。结果表明:新疆源布鲁氏菌GroEL基因片段长1641bp,编码546个氨基酸,与羊种(B.melitensis)、猪种(B.suis)以及牛种(B.abortus)GroEL基因的核苷酸序列同源性分别为99.88%、99.82%、99.88%,推导的氨基酸序列同源性在99%以上,显示了很强的保守性。
- 刘辉陈创夫许程剑王远志韩亚杰
- 关键词：布鲁氏菌克隆
- 新疆绵羊种布鲁氏菌HtrA基因与GroEL基因的克隆及其原核表达
- 2007年
- 根据已发表的牛流产型布鲁氏菌HtrA(High temperature requirment A)基因、GroEL(热休克蛋白)基因设计特异性引物,从新疆绵羊种布鲁氏菌基因组中扩增出HtrA、GroEL基因片段,将HtrA、GroEL基因片段纯化后分别克隆到T载体上测序,结果表明新疆绵羊种布鲁氏菌HtrA基因片段长1542 bp,编码513个氨基酸,与发表的牛种(B.abortus)、羊种(B.melitensis)、猪种(B.suis)的HtrA基因序列的同源性分别为99.68%、99.81%、99.55%。GroEL基因片段长1641 bp,编码546个氨基酸,与B.melitensis、B.suis以及B.abortus GroEL基因的核苷酸序列同源性分别为99.88%、99.82%、99.88%。HtrA基因和GroEL基因与发表的B.abortus、B.melitensis、B.suis的HtrA基因和GroEL基因序列的具有很高的同源性。按正确的阅读框架分别将两基因片段定向克隆到表达载体pET-28a上,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,HtrA、GroEL基因能在大肠杆菌中成功表达,表达的蛋白分子量都约为60 Ku,并能和布鲁氏菌免疫兔子产生的抗体发生特异性的结合。
- 刘辉陈创夫韩亚杰董玲许程剑
- 关键词：布鲁氏菌GROEL克隆
