张金波
- 作品数：10 被引量：33H指数：4
- 供职机构：石河子大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：新疆生产建设兵团博士基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 大肠杆菌肠毒素STI、STII、LTB融合基因植物表*达载体的构建被引量：1
- 2006年
- 产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)LT和ST是导致人和动物腹泻的主要病原菌。利用PCR方法分别从pGEM-5Zf(+)-STI、K88ab(LT+,ST+)质粒中扩增到了STI、STII基因,然后通过三引物PCR实现了STI、STII基因的融合,再与LTB基因融合,并置同一阅读框。LTB基因的5′位于STII基因的3′端,并在ST基因和LTB基因之间插入7个氨基酸的连接肽。将融合基因STI-STII-LTB构建到带有核基质结合区序列(MARs)的植物表达载体pBI121-MARs中,并通过冻融法导入根癌农杆菌EHA105。
- 武冬梅祝建波陈创夫王琦张金波
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌ETECSTI融合基因植物表达载体
- 利用搭桥PCR法实现轮状病毒VP7表位片段的重组
- 2005年
- 选择了RV VP7的3个高度保守可诱发高水平体液免疫反应的中和性抗原表位,人工合成了这3个表位片段。采用了一种不需要限制性内切酶和连接酶的重组DNA方法—搭桥PCR法,方便快速地构建了轮状病毒VP7蛋白的重组表位基因,将其T/A克隆入PBS-T载体,经过测序与报道序列同源性达100%。结果表明:搭桥法PCR简单易行,快速准确,尤其是在构建2个或多个小基因片段的融合时,比酶切、连接方法更具优越性。
- 王琦陈创夫武冬梅许程剑史芳芳张金波祝建波
- 四翅滨藜在克拉玛依地区引种的形态表现及其发展潜力分析被引量：7
- 2006年
- 对引种到克拉玛依地区的四翅滨藜的生态适应性及其饲料价值进行了研究,认为四翅滨藜具有耐干旱、耐寒冷和耐盐碱等多种优良特性,是适合在新疆乃至西北荒漠、半荒漠地区栽培的营养价值高、适口性好的一种饲料灌木,将在改善生态环境和发展畜牧业等方面具有很好的发展潜力,研究结果为今后克拉玛依及生态环境相似地区引种栽培四翅滨藜提供了一定的理论依据。
- 塔依尔宋于洋吕新张金波
- 关键词：四翅滨藜发展潜力
- 转基因苜蓿口服疫苗的研究和应用被引量：5
- 2007年
- 随着植物转基因技术的成熟,利用转基因牧草生产人或动物可食性疫苗更成为当今研究的热点。苜蓿以其营养价值高,粗蛋白、维生素和矿物质含量丰富,氨基酸平衡、适口性好等优点,成为研制植物口服疫苗最为理想的生物反应器。该文分别从植物口服疫苗的优点、苜蓿的遗传转化技术、外源基因在转基因苜蓿中的表达水平及免疫效果等,介绍国内外以苜蓿作为受体生产植物可食疫苗的研究进展,指出研究中存在的问题,并展望其广阔的应用前景。
- 张金波祝建波陈创夫
- 关键词：转基因植物紫花苜蓿口服疫苗免疫
- Klenow大片段聚合酶及T_4DNA聚合酶在构建重组质粒中的应用被引量：3
- 2006年
- 利用大肠杆菌Klenow大片段聚合酶5′→3′聚合酶活性和T4DNA聚合酶3′→5′外切酶特性构建植物高效表达载体pBLT35Svp4-ST。用pUC18-435S中的T35S启动子取代植物表达载体pBLG-VP4-ST中的双35S启动子,通过Klenow大片段的聚合酶活性对植物表达载体pBLG-VP4-ST中的HindⅢ3′凹端补平,再利用T4DNA聚合酶外切酶活性将质粒pUC18-435S的四倍35S启动子即T35S中的SacⅠ3′凸端削平。在T4DNA连接酶作用下将一端为平端,另一端为BamHⅠ的粘性末端的四倍35S启动子定向连接到植物表达载体PBLG-VP4-ST中取代原有的双35S启动子,转化并筛选阳性克隆。结果经PCR和酶切鉴定证实,四倍35S启动子成功连接到植物表达载体PBLG-VP4-ST中。
- 董玲陈创夫韩亚杰张金波祝建波
- 磷酸甘露糖异构酶基因的克隆与表达载体的构建
- 2006年
- 根据genebank中公布的pmi基因序列通过PCR的方法从大肠杆菌中得到目的片断,并与pGM-T easy载体连接。将鉴定为阳性重组子中的目的基因进一步与植物表达载体pBI121的不同区域连接,成功构建了载体NPTII-pmi-121和pmi-121△NPTII。
- 王延蛟陈创夫张金波武冬梅董玲祝建波
- 关键词：甘露糖
- 产毒素大肠杆菌LTB-K99融合基因的构建被引量：3
- 2006年
- 利用PCR技术从原始菌种中扩增得到K99和LTB基因,将K99和LTB基因连接起来,构建了LTB-K99融合基因。融合基因克隆到pBS-T载体上,转化大肠杆菌top10,经Bam HI和Xho I双酶切鉴定重组质粒。测序分析结果表明,该融合基因有正确的阅读框,为以后转入表达载体的构建奠定了基础。
- 许程剑陈创夫武军元王琦张金波刘辉
- 关键词：LTB基因融合基因
- 四翅滨藜形态表现及其发展潜力分析被引量：11
- 2006年
- 对引种到克拉玛依地区的四翅滨藜的生态适应性及其饲料价值进行了研究,结果显示,四翅滨藜不仅具有耐干旱、耐寒冷和耐盐碱等多种优良特性,而且是适合在新疆乃至西北荒漠、半荒漠地区栽培的营养价值高、适口性好的一种饲料灌木,将在改善生态环境和发展畜牧业等方面具有很好的发展潜力。
- 塔依尔宋于洋吕新马兰花张金波
- 关键词：四翅滨藜发展潜力
- 产肠毒素大肠杆菌K88-STII-LTA2//LTB融合基因在烟草中的表达
- ETEC肠毒素分为不耐热性肠毒素/(heat-labile,LT/)和耐热性肠毒素/(heat-stable,ST/)两种,LT是由A、B两种亚单位组成的AB5型结构的六聚体蛋白,是目前人们发现的最强有力的黏膜免疫原和黏...
- 张金波
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌融合基因烟草
- 文献传递
- 产肠毒素大肠杆菌K88-STII-LTA2/LTB融合基因在烟草中的表达被引量：5
- 2007年
- 融合保护性抗原的LT类全毒素具有传输抗原载体和免疫佐剂两重功效。利用基因工程技术,构建了带有信号肽的Pr1as-K88ac-STII-LTA 2/UP-LTB融合基因的双价植物表达载体。双价植物表达载体通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101,并利用农杆菌介导技术叶盘法转化模式植物烟草。转基因烟草经PCR和RT-PCR初步检测,证明外源基因已经整合到受体植物基因组中,同时表明融合基因在转录水平上有表达。转基因烟草的获得,为进一步研制新型的抗腹泻植物口服疫苗奠定了良好的基础。
- 张金波祝建波彭晓明陈创夫
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌融合基因
