张志远
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
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- 低氧肺动脉高压大鼠的肺动脉组织凋亡被引量：5
- 2010年
- 目的研究bcl-2、bax凋亡相关基因在低氧处理大鼠肺动脉中的表达,探讨低氧肺动脉高压的发病机制及防治措施。方法36只Wistar大鼠随机分为3组,分别为正常对照组、低氧肺动脉高压组、低浓度一氧化碳(CO)组,每组12只,采用原位细胞凋亡、原位杂交、免疫组化等方法检测肺动脉的凋亡状况。结果①原位凋亡检测示,正常对照组、低氧肺动脉高压组、低浓度CO组的凋亡率分别为8.1%,37.6%,76.5%,三者间差异显著;②原位杂交显示,正常对照组bax、bcl-2杂交呈弱阳性表达。低氧肺动脉高压组bax杂交呈弱阳性表达,低浓度CO组呈强阳性表达,但bcl-2杂交可见低氧肺动脉高压组呈强阳性表达,低浓度CO组呈弱阳性表达;③免疫组织化结果表明,低浓度CO组bcl-2、bax蛋白均有升高,以bax为著。低氧肺动脉高压组虽然也有表达,但程度较弱,且bcl-2表达处于优势。结论低浓度CO可以调节bcl-2、bax凋亡基因的表达,从而促进肺动脉组织的凋亡。
- 刘婷李运成钱桂生张志远杨昱王关嵩
- 关键词：低氧肺动脉高压凋亡
- 复合培养对低氧时肺动脉平滑肌细胞表达细胞因子的调节
- 2009年
- 目的研究低氧对肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)白细胞介素-1β、4、10、13(IL-1β、4、10、13)活性的影响,及复合培养下肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)对其调控作用。方法大鼠PASMCs单独培养或与PMVECs复合培养,分为正常组、低氧作用2h(H2)、6h(H6)、12h(H12)、24h(H24)组,采用ELISA法测定各组培养细胞上清中IL-1β、IL-4、IL-10、IL-13的活性。结果低氧刺激后PASMCs的IL-1β、IL-4、IL-10、IL-13活性2h开始升高,6h达高峰,12h降低;各时相点复合培养组均低于对应的单独培养组(P<0.01)。结论低氧可以激活PASMCs的IL-1β、IL-4、IL-10、IL-13活性,在复合培养条件下,PMVECs对此效应具有下调性影响。
- 张志远钱频王建春程序刘婷钱桂生王关嵩
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌细胞肺微血管内皮细胞
- 低氧肺动脉高压时血红素氧合酶基因表达状况的研究被引量：5
- 2009年
- 目的探讨血红素氧合酶（heme oxygenase，HO）基因在低氧肺动脉高压大鼠肺动脉组织中的表达及一氧化碳（carbon monoxide，CO）对其的影响。方法60只Wistar大鼠随机分为5组：常氧组；低氧肺动脉高压组；血晶素组；锡原卟啉组；低浓度CO组（n=12）。采用紫外分光光度计、逆转录-聚合酶链反应、免疫组织化学染色和原位杂交进行检测。结果①HO-1活性：低氧组、血晶素组、低浓度CO组肺动脉组织HO-1活性以胆红素生成量计算，均升高，其中血晶素组最高，与正常对照组比较，差异有显著性（P〈0．01）。②逆转录-聚合酶链反应：各组大鼠肺动脉HO-2mRNA表达没有明显变化，均保持稳定。缺氧组、血晶素组、锡原卟啉组和低浓CO组HO-1mRNA均明显高于正常对照组，以低浓度CO组升高最明显（P〈0．01）。血晶素组和低浓度CO组均显著高于缺氧组（P〈0．01），而锡原卟啉组低于缺氧组。③免疫组织化学染色：低氧组肺动脉内膜、中膜的HO-1表达均明显升高，血晶素组和低浓度CO组更高，锡原卟啉组和常氧组均有很微弱表达。④原位杂交：低氧组肺动脉3层均加深2～3级，低浓度CO组肺动脉外、中、内膜细胞质均明显加深4级。处理前后HO-2的染色变化不大。结论低氧肺动脉高压时，肺动脉组织HO-1基因的表达升高，可能在肺动脉高压的发生和发展中起一定作用。
- 王关嵩钱频李琦李运成程序周长喜张志远钱桂生
- 关键词：血红素氧合酶低氧肺动脉高压基因表达
- 反义肽核酸阻抑线粒体基因表达诱导肺癌SPC细胞凋亡的实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨以反义肽核酸(Anti-sense peptide nucleic acid,asPNA)封闭肺癌SPC-A1细胞线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)转录启动子后,对其生物学特性的影响。方法:合成针对mtDNA重链转录启动子区的asPNA,构建asPNA-三苯磷复合物并鉴定,以该复合物转染人肺腺癌SPC-A1细胞系,激光共聚焦显微镜确定该复合物的亚细胞定位,RT-PCR检测转染48 h后对mtDNA编码基因转录的影响,流式细胞术评估细胞周期分布及凋亡/坏死情况,自发光荧光仪检测细胞内ATP浓度,以未转染asPNA-三苯磷复合物的肺腺癌SPC-A1细胞为对照。结果:成功获得asPNA-三苯磷复合物,激光共聚焦显微镜显示该复合物顺利进入SPC-A1细胞线粒体;同未转染组相比,转染组SPC-A1细胞mtDNA编码基因的转录水平有所下降,而细胞内ATP浓度明显降低(P<0.01);同时,细胞周期分析显示,转染组出现明显的亚二倍体峰,而AnnexinⅤ-PI双标结果进一步证实,转染组肺癌细胞凋亡率明显增加。结论:asPNA在电子移位亲脂性阳离子-三苯磷的运载下,能够进入SPC-A1细胞线粒体并阻抑其mtDNA编码基因的转录,进而影响肺癌细胞的能量合成并诱导其凋亡。
- 王光辉黄桂君余时沧张志远钱桂生
- 关键词：肺癌反义肽核酸转录
- 肺动脉平滑肌细胞对低氧诱导的肺微血管内皮细胞白介素表达的调节及机制被引量：1
- 2009年
- 目的研究低氧对肺微血管内皮细胞(PMVECs)的白细胞介素(IL)6、IL-1β、受体酪氨酸激酶(RTK)和Janus激酶3(JAK3)表达的影响,以及肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)在其中的调控作用。方法单独培养的大鼠PMVECs分为正常(N)组及低氧2h(H2)组、6h(H6)组、12h(H12)组,另设立PMVECs共培养组(与PASMCs共同培养)和单纯培养组,均接受6h或12h的低氧(氧浓度为3%)处理。应用RT-PCR方法检测IL-6、JAK3的mRNA表达水平,放免法测定培养细胞上清中的IL-6蛋白含量,放射性酶分析法测定细胞膜、胞质中RTK的活性,ELISA法测定细胞培养上清中的IL-1β蛋白含量。结果低氧刺激后,PMVECs的IL-6、JAK3mRNA表达及IL-6、IL-1β蛋白含量均增加。与N组比较,低氧处理各组的以上各指标均有所上升(P<0.01),以6h时间点最为明显(P<0.01)。胞膜RTK活性在低氧刺激各组明显降低(P<0.01),而胞质RTK活性明显升高(P<0.01),以12h时间点最为明显(P<0.05)。在低氧刺激6h后,共培养组的PMVECs内IL-6、JAK3的mRNA表达,以及IL-6、IL-1β蛋白含量均较单纯培养组有所降低(P<0.05);在低氧刺激12h后,共培养组的PMVECs的RTK活性也较单纯培养组降低(P<0.05)。结论低氧可以促进PM-VECs的IL-6mRNA表达,并能增加IL-6和IL-1β蛋白含量,复合培养情况下PASMCs对此具有下调作用,其机制可能与RTK和JAK涉及的信号转导通路有关。
- 张志远钱桂生王建春李运成刘婷王关嵩
- 关键词：肺动脉细胞低氧受体蛋白质酪氨酸激酶类
- 溺海肺损伤的发病机制和治疗的研究进展被引量：8
- 2008年
- 溺海肺损伤的发病机制包括低氧血症和酸碱失衡、电解质紊乱、肺泡上皮细胞和肺微血管内皮细胞的直接损伤及水通道和离子通道改变、血流动力学和心功能改变、肺组织中内皮素、降钙素和血红素氧合酶改变、肺泡巨噬细胞和表面活性物质改变、血浆氧自由基、肿瘤坏死因子和白细胞介素-8等细胞因子改变。溺海肺损伤的治疗包括机械通气、糖皮质激素、高压氧治疗、NO吸入、肺灌洗和药物治疗。
- 王关嵩张志远钱桂生
- 关键词：发病机制
