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王琰

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：西安交通大学口腔医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇脊髓
  • 1篇脊髓损伤
  • 1篇共表达
  • 1篇分子
  • 1篇靶分子
  • 1篇MIR-9
  • 1篇MIRNA

机构

  • 1篇第四军医大学
  • 1篇陕西省人民医...
  • 1篇西安交通大学...

作者

  • 1篇杨安钢
  • 1篇鞠躬
  • 1篇薛茜
  • 1篇张坤
  • 1篇王键
  • 1篇赵湘辉
  • 1篇田婉莹
  • 1篇王琰

传媒

  • 1篇细胞与分子免...

年份

  • 1篇2015
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
miR-9和miR-124共表达载体的构建与靶分子鉴定
2015年
目的构建miR-9和miR-124单独表达和串联共表达的真核表达载体,并鉴定其共同靶分子。方法将pri-miR-9和pri-miR-124的编码序列分别插入或串联后插入真核表达载体p CAG,转染He La细胞后,实时定量PCR鉴定成熟miRNA的表达水平。构建miR-9和miR-124分子完全互补的靶基因萤光素酶报告载体,双萤光素酶报告系统检测表达的成熟miRNA的生物学功能。利用生物信息学软件预测miR-9和miR-124的共同靶分子,将靶分子mRNA的3'非翻译区(UTR)克隆入p GL3luciferase报告基因载体中,观察转染细胞后miRNA对报告基因表达的影响。结果经测序及酶切鉴定证实3种miRNA表达载体构建完全正确,实时定量PCR检测表明这3种表达载体均能正确高表达成熟的miRNA。双萤光素酶报告系统检测证实3种载体表达的miRNA分子具有生物学活性。生物学软件预测发现小分子GTP结合蛋白Ras相关蛋白2a(Rap2a)是miR-9和miR-124的靶基因,成功构建了含有Rap2a 3'UTR的萤光素酶报告基因载体。双萤光素酶报告系统提示miR-9和miR-124均能抑制Rap2a的表达。结论成功构建了miR-9和miR-124的单独表达和共表达载体,并能高表达具有生物学活性的成熟的miR-9和miR-124分子。Rap2a可能是miR-9和miR-124的一个共同靶分子。
薛茜王琰张坤赵湘辉田婉莹杨安钢鞠躬王键
关键词：MIRNA脊髓损伤
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