许健 作品数:15 被引量:31 H指数:4 供职机构: 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 北京市农林科学院科技创新能力建设专项 国家自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
补体因子C3d基因在禽鸟中进化与感染禽白血病病毒相关性 C3d是补体被激活后,经一系列重要的生物活性反应后的裂解终产物,在先天性免疫和获得性免疫之间起着桥梁作用。正常机体血清中的C3d补体活性及含量相对稳定,然而病理情况下被异常激活并消耗,导致血清中C3d水平改变,因此C3d... 李永清 江波 许健 李霄阳牛传染性鼻气管炎病毒壳膜蛋白VP8的抗血清制备 牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus,IBRV)是牛传染性鼻气管炎的病原体,IBRV壳膜蛋白VP8在病毒复制及致病过程中发挥重要作用.本研究将表达IBRV ... 马振邦 李霄阳 许健 王萍 李永清关键词:牛传染性鼻气管炎病毒 原核表达 免疫原性 多克隆抗体 牛传染性鼻气管炎病毒致病机制研究进展 被引量:11 2017年 牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)主要引起牛的呼吸道、生殖道等炎症反应,也可以引起呼吸困难及流产。IBRV的致病机制尚不清楚,目前发现IBRV的非结构蛋白和结构糖蛋白与病毒毒力相关,不但影响病毒的复制及对宿主细胞的感染,同时也与病毒的免疫逃逸密切相关。除此之外,IBRV通过诱导宿主细胞凋亡造成持续性感染及激活炎症复合体诱导严重的炎症反应,造成宿主广泛病理反应的发生。因此,探索IBRV毒力蛋白结构功能、IBRV感染诱导的细胞凋亡及宿主炎性复合体激活的分子机制,将成为未来IBRV研究的热点。 许健 沈俊俊 黄秀芬 李永清关键词:牛传染性鼻气管炎病毒 细胞凋亡 马立克氏病病毒RLORF1编码蛋白通过抑制宿主IFN-β表达促进病毒复制 2022年 为了研究马立克氏病病毒(MDV)抑制宿主天然免疫的机制,本试验构建了RLORF 1基因缺失MDV(CVI988^(△RLORF1)和RB1B^(△RLORF1)),结合RLORF 1基因的过表达方法探讨该基因对MDV复制以及Ⅰ型干扰素反应的影响。结果显示,MDV RLORF 1基因缺失一方面降低了病毒复制能力(P<0.001),另一方面上调了病毒诱导宿主的Ⅰ型干扰素反应的能力(P<0.05或P<0.001),而在鸡胚成纤维细胞(CEF)中过表达RLORF 1后,MDV病毒的复制能力明显增强(P<0.001),且RLORF 1基因转录蛋白可显著抑制宿主的干扰素-β(IFN-β)表达(P<0.001)。结果表明,MDV感染过程中可以通过RLORF 1基因编码蛋白抑制宿主的Ⅰ型干扰素表达,进而通过抑制宿主的天然免疫反应保证病毒感染后的早期复制。 江波 蔡云虹 曹梦瑶 刘文晓 程晶 许健 李永清关键词:马立克氏病病毒 病毒复制 规模化奶牛场犊牛腹泻的病原检测与分析报告 被引量:4 2021年 为了调查某规模化奶牛场犊牛腹泻的发病原因,试验采用血清抗体检测、细菌分离培养、寄生虫卵镜检和病毒核酸检测方法对腹泻犊牛的血样和粪便进行了检查。结果表明,该奶牛场牛病毒性腹泻/黏膜病病毒抗体阳性率为65.00%,牛轮状病毒抗体阳性率25.00%,牛冠状病毒抗体阳性率15.00%;分离到1株结肠弯曲杆菌和1株空肠弯曲杆菌;所检腹泻犊牛粪便和血液样品中,4份粪便样品和1份血液样品检出牛冠状病毒,2份粪便样品检出轮状病毒,1份粪便样品和1份血液样品检出牛病毒性腹泻/黏膜病病毒,同一份粪便样品中同时检出牛病毒性腹泻/黏膜病病毒和牛冠状病毒;通过镜检,球虫卵囊检出率77.78%,在1份粪样中发现蛔虫卵,2份粪样中发现其他线虫卵。该牛场流行性腹泻的原因可能为夏季高温潮湿引起犊牛免疫力下降导致的多病原体感染。 阮继湘 刘文晓 江波 许健 李永清 程晶关键词:犊牛腹泻 病原体 抗体 共表达鸡传染性法氏囊病病毒LX株VP2基因及鸡新城疫病毒PX02/3株F基因的重组火鸡疱疹病毒的构建 被引量:3 2020年 为构建表达传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP 2基因和鸡新城疫病毒(NDV)F基因的重组火鸡疱疹病毒(HVT)。本研究利用基因重组技术,在HVT基因组的非必需区UL45-46插入CMV启动子调控下的IBDV LX株的VP 2基因表达盒,然后在HVT基因组的非必需区US1-10插入pec启动子调控下的NDV PX02/3株的F基因表达盒,成功构建并拯救出同时表达IBDV和NDV保护性抗原基因的重组HVT病毒(rHVT-VP2-F)。经PCR、Western Blot、IFA鉴定,重组病毒能稳定表达具有生物学活性的VP2蛋白和F蛋白。本研究为研制rHVT-VP2-F活载体疫苗提供了科学依据。 王子书 王萍 许健 许健 李永清 李永清关键词:新城疫病毒 传染性法氏囊病病毒 重组火鸡疱疹病毒 F基因 鸡毒支原体耐热核酸酶MGA0676原核表达及性质鉴定 鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,M.gallisepticum)是引起鸡呼吸困难、气囊炎等症状的慢性呼吸道疾病的病原体。支原体核酸酶是支原体重要的毒力相关蛋白,在支原体致病过程中发挥重要作用... 李鹏 许健 李霞 张云科 吴文学关键词:鸡毒支原体 原核表达 文献传递 抗牛传染性鼻气管炎病毒囊膜gD糖蛋白的单链抗体在昆虫细胞中表达及活性检测 被引量:4 2017年 为了获得具有生物学活性的牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gD蛋白特异性单链抗体,试验采用PCR方法扩增杂交瘤细胞的cDNA单链抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,通过重叠延伸PCR及Linker序列获得完整的单链抗体基因,将单链抗体基因克隆至杆状病毒载体pFB-LICBse中,构建重组转移载体pFB-VH-VL,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒rBacmid-VHVL,将重组杆粒rBacmid-VH-VL转染至Sf9细胞中获得携带单链抗体基因的重组杆状病毒。该重组杆状病毒在Sf9细胞中表达了分子质量约为30ku的单链抗体蛋白。Western blotting结果显示,重组单链抗体蛋白能被His标签抗体特异性结合,也能特异性结合gD蛋白。间接免疫荧光试验结果显示,该单链抗体蛋白能够识别感染牛肾细胞MDBK中的IBRV。本研究在昆虫细胞中成功表达了具有识别IBRV的gD蛋白特异性单链抗体,为牛传染性鼻气管炎的诊断与治疗奠定了基础。 吴靖 许健 黄秀芬 沈俊俊 何后军 李永清关键词:牛传染性鼻气管炎病毒 单链抗体 杆状病毒表达系统 鸡马立克氏病病毒ICP0蛋白抑制宿主IFN-I抗病毒分子机制研究 为了探究鸡马立克氏病病毒(Marek s disease virus,MDV)对宿主IFN-I抗病毒的作用机理,解析MDV逃逸先天性免疫的分子机制.本研究根据现有疱疹病毒相关的研究进展,研究病毒表达的立即早期蛋白0(IC... 许健 李永清 蔡云红 江波 刘文晓 靳换 李霄阳 洪家兵 孔子萌关键词:鸡马立克氏病病毒 免疫反应 牛传染性鼻气管炎gB基因TaqMan探针及SYBR Green 1荧光定量PCR方法的建立与比较 被引量:6 2017年 为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)荧光定量PCR检测方法,本研究利用IBRV g B基因序列设计引物及相应探针,分别建立Taq Man探针与SYBR Green 1荧光定量PCR方法,并对两种方法的敏感性等综合比较。结果显示,SYBR Green 1荧光定量PCR方法的相关系数(R2)为0.998,扩增效率(E)为95.7%;Taq Man探针荧光定量PCR方法的R2为0.999,E为108.3%;两种方法的敏感性均为0.2 TCID50,变异系数均小于3%。综合结果显示,两种检测方法无显著差异。最后,本研究成功建立了检测IBRV的荧光定量PCR,将为IBRV的临床检测提供方法。 张喜喜 许健 李永清 周双海关键词:牛传染性鼻气管炎病毒