- 缺氧时肺动脉平滑肌细胞膜电位、细胞质及线粒体Ca^(2+)的动态变化被引量:1
- 2007年
- 目的研究缺氧时肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)膜电位、细胞质游离Ca2+及线粒体游离Ca2+的动态变化,探讨缺氧性肺血管收缩(hypoxic pulmonary vasocontriction,HPV)的可能机制。方法分离成年Wistar大鼠PASMCs进行体外培养,将PASMCs分为3组:分别负载荧光指示剂Di-8-ANEPPS(2μmol/L)、Fluo-4/AM(4μmol/L)和Rhod-5F(5μmol/L)。利用Na2S2O4(2mmol/L)的强还原特性,对细胞进行化学缺氧干预,在共聚焦显微镜下观察缺氧环境下细胞膜电位、细胞质Ca2+和线粒体Ca2+的动态变化。结果用Na2S2O4对PASMCs施加缺氧刺激后,PASMCs细胞膜电位荧光强度迅速大幅度降低,继而迅速回升,于100s时升至峰值且高于初始水平,随后逐渐下降低于初始水平;缺氧刺激后PASMCs细胞质Ca2+荧光强度缓慢增高,并呈持续增高趋势;PASMCs线粒体Ca2+荧光强度在缺氧刺激后迅速增高,持续约30s后回降至低于起始值,随后开始回升,达到并逐渐高于起始值。结论缺氧刺激PASMCs,导致膜电位、细胞质Ca2+和线粒体Ca2+呈特定模式的升高和降低的动态变化,除了细胞质Ca2+稳态失衡之外,线粒体Ca2+变化可能在HPV发生中也起着重要的作用。
- 何秀娟许蜀闽张涛李雪辉孙玮王培勇
- 关键词:膜电位缺氧肺动脉平滑肌线粒体
- 不同因素对肺动脉平滑肌细胞线粒体游离钙的作用效应被引量:1
- 2006年
- 目的:通过观察肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)在化学缺氧、细胞膜去极化和血管舒缩活性物质等不同因素作用下线粒体游离钙([Ca2+]mit)的动态变化特点,探讨:[Ca2+]mit与缺氧性肺动脉收缩(hypoxia pulmonary artery constriction,HPV)发生之间的关联。方法:分离成年Wistar大鼠PASMCs进行体外培养,负载线粒体钙荧光指示剂Rhod-5F(5μmol/L),分组施加2mmol/L连二亚硫酸钠(Na2S2O4)化学缺氧、18mmol/LKCl、10-6mol/L血管紧张素II(Ang II)和100μmol/L一氧化氮供体(SIN-1)等不同刺激因素,在激光共聚焦扫描显微镜下观察[Ca2+]mit的动态的变化。结果:用Na2S2O4对PASMCs施加缺氧刺激,[Ca2+]mit荧光强度在缺氧刺激后迅速增高,持续约30s后回降至低于起始值,随后开始回升,达到并逐渐高于起始值,继而于100s缓慢回升,逐渐高于起始时荧光强度;向PASMCs加入KCl后,[Ca2+]mit迅速升高,40s后缓慢下降,于400s后恢复并维持在初始值;向PASMCs加入AngII后,[Ca2+]mit迅速小幅度升高,于20s时开始降低,于100s时至最低,形成低谷平台,持续至400s时逐渐回升,于600s恢复接近初始水平;向PASMCs加入SIN-1后,[Ca2+]mit迅速降低,于80s时降至最低,形成低谷平台持续至160s时开始回升,于200s时回升至平稳水平但仍低于初始值。结论:给予PASMCs缺氧、细胞膜去极化、舒缩血管活性物质等刺激,可以引起线粒体Ca2+发生相应变化,线粒体[Ca2+]mit可能在HPV发生中也起着重要作用。
- 何秀娟许蜀闽张涛李雪辉王培勇
- 关键词:线粒体钙肺动脉平滑肌
- 主动脉平滑肌细胞钙信号与CREB活性的关系
- 目的探讨钙信号的不同变化引起细胞CREB 活性动态变化的特点。方法培养的主动脉平滑肌细胞通过转染钙敏感绿色荧光蛋白标记的转录因子GFP-CREB,用激光共聚焦显微镜实时动态研究去极化、血管紧张素Ⅱ受体兴奋、β受体兴奋以及...
- 刘健张涛何秀娟许蜀闽王培勇
- 关键词:病理学与病理生理学钙绿色荧光蛋白CREB平滑肌细胞
- 文献传递
- 大鼠颈动脉显微和超微结构的增龄变化
- 2011年
- 目的:观察不同年龄组大鼠颈动脉显微及其超微结构,探讨大鼠颈动脉内皮细胞在动脉老化发生发展过程中的变化特点.方法:30只大鼠按其月龄分为青年组(2~3月龄)、成年组(10月龄)和老年组(28~30月龄),每组10只.大鼠颈动脉固定、切片后,每只大鼠随机选切片5张,每张切片随机取4个视野,分别在光学显微镜、扫描电镜、透射电镜下,观察并比较各组大鼠颈动脉结构特点.结果:青年组大鼠颈动脉厚薄较均匀,管腔内表面光滑,内膜、中膜和外膜分界清楚,内皮细胞胞浆丰富均匀,核膜完整,表面有微绒毛;成年组大鼠颈动脉厚薄欠均匀,部分内皮细胞增厚,内皮细胞完整,胞浆稀薄,细胞器减少;老年组大鼠颈动脉厚薄不均一性,管腔内表面欠光滑,内膜可见明显隆起增厚,内皮层脱落、肿胀、增生或缺失,内皮细胞胞浆稀薄,细胞浆较少,微绒毛消失.结论:与青年组、成年组大鼠相比,老年组大鼠颈动脉内膜结构破坏严重,各层结构欠清晰,内皮细胞表面微绒毛消失,出现脱落衰老凋亡现象,并有红细胞等附着.
- 张涛王延江周华东
- 关键词:颈动脉内皮细胞扫描电镜透射电镜