- HbCoi1基因启动子酵母单杂pHIS载体的构建及互作蛋白筛选
- 2015年
- 茉莉酸是调节天然橡胶树产胶的主要激素,HbCoi1是茉莉酸信号的受体,研究HbCoi1基因的表达调控对了解橡胶树的产胶机理具有重要的意义。首先PCR扩增HbCoi1基因的启动子,然后将目标序列插入pHis2.1载体,构建酵母单杂诱饵载体。将该载体转入酵母Y187菌株感受态中,在缺失培养基上检测自转录激活,发现HbCoi1基因的启动子在3-AT浓度为10 mmol·L-1时自转录激活得到有效抑制。在此基础上,通过与橡胶cDNA文库进行酵母单杂筛选,得到了几个可能与Hbcoi1启动子发生互作的基因,其中包括DNA结合蛋白、核糖体蛋白和功能未知基因,旨在为深入研究Hbcoi1基因表达调控打下基础。
- 洪灏刘小婷肖华黄惜袁红梅
- 巴西橡胶树锌指蛋白基因的克隆及功能鉴定
- 2015年
- 锌指蛋白是一类能与DNA/RNA结合并调控基因表达的蛋白.前期笔者通过酵母双杂技术筛选到1个可能与JAZ蛋白互作的巴西橡胶树锌指蛋白（命名为Hbzinc-finger）,该基因的cDNA全长序列有2 262bp,编码753个氨基酸.该蛋白碳末端有1个PB1结构域,在336 ～381处氨基酸序列编码1个ZnF_ZZ锌离子结合结构域.红色荧光蛋白亚细胞定位结果表明,Hbzinc-finger定位于细胞核,酵母自转录激活显示该蛋白有自转录活性.该基因的表达受创伤影响,表明橡胶锌指蛋白的表达可能受茉莉酸信号调控.
- 肖华林云蒸姚笛欧阳沫黄惜
- 关键词：亚细胞定位
